195836. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 1-N-[L-(-)-4-amino-2-hidroxi-butiril] kanamicin származékok előállítására
7 195836 8 Az olajos párlósi maradékot 550 ml vízben és 550 ml n-butanolban felvesszük és a reakciókeveréket 1 órán keresztül keverjük, majd szűrjük. Két fázis képződik. A butanolos oldatot 550 ml vízzel telített butanollal 2-szer kirázzuk és a vizes fázist 550 ml n-butanollál telített vízzel 2-szer kirázzuk. A maradék butanolos fázist csökkenetett nyomáson szárazra pároljuk. Az olajos párlási maradékból néhány kristály képződik. A kristályokat és az olajat 100 ml metanolban oldjuk, majd 240 ml etanolt adagolunk és a reakciókeveréket 12 órán keresztül állni hagyjuk; az Így kapott kristályokat szűrjük és körülbelül 50 g kariam ic in A-t tartalmazó keveréket kapunk. A nyers terméket körülbelül 280 ipl hideg vízben oldjuk, majd az oldatot savas ioncserélő gyantán adszorbeáljuk. Az oszlopot 0,1 N ammónlum-hidroxld oldattal eluóljuk és a kapott különböző eluált frakciókat kromatográfiásan vizsgáljuk. Kanamicin A-t és (IV) képletü vegyületet tartalmazó oldatot kapunk. A frakciókat csökkentett nyomáson szárazra párolva 28,1 g (körülbelül 50%-os kitermelés) (IV) képletű vegyületet és körülbelül 18 g kanamicin A-t kapunk. A kapott (IV) képletü vegyületet további tisztítás nélkül közvetlenül a következő reakcióban használjuk fel. 6. példa G-pikolinoil-kanamicin B (IV) előállítása Az 5. példában leírtak szerint járunk el, azzal az eltéréssel, hogy kanamicin A helyett 74 g kanamicin B-t (II, R=NHz) használunk. 7. példa l-N-[L-(-)-4-pikolinoU-amino-2-hidroxi-buUi-ilJ-6-pikolinoil- kanamicin A (VII) előállítása A 4. példa szerint előállított 3,21 g (0,01 mól) (VI) képletü termék 80 ml etilénglikol-dimetiléterben elkészített oldatát cseppenként 5,27 g (0,0091 mól) (IV) képletű terméket tartalmazó 80 ml térfogatú 50X etilénglikol-dimetiléter és 50X víz keverékhez adjuk. A reakcióelcgyet 12 órán keresztül szobahőmérsékleten keverjük. A kapott oldatot melegen, csökkentett nyomáson bepároljuk és ily módon jutunk a (VII) képletű cím szerinti vegyülethez sötét színű anyag formájában, melyet Így alkalmazunk a következő eljárásban. 8. példa l-N-(L-(-)-4-pikolinoil-amino-2-hidroxi-butirií]-6-picolionil-kanamicin B (VII) előállítása A 7. példában leírtak szerint járunk el azzal az eltéréssel, hogy kanamicin B-ból előállított (IV) képletü származékot használunk. 9. példa l-N-[L-(-)-4-amino-2-hidroxi-butiril)-kanamicin A (I) előállítása A 7. példa szerint előállított (VII) képletű nyersterméket 50 ml vízben oldjuk. Az oldathoz 2,648 g (0,012 mól) réz(II) acetátot és 4 ml 5X-OS sósavat adunk. A reakcióelegyet 2 órán keresztül szobahőmérsékleten tartjuk és időnként megkeverjük. A térfogatot ezután csökkentett nyomáson történő bepárlással felére csökkentjük, majd a maradékot szűrjük. A szűrleten a felesleges Cu” ionok eltávolítása céljából hidrogén-szulfidot buborékoltatunk keresztül. Az oldatot ismét szűrjük és CG-50 minőségű savas gyantán vezetjük keresztül. A gyantás oszlopot ezután különböző koncentrációjú ammónia oldatokkal eluáljuk és a különböző frakciók tartalmát vékonyréteg kromatográfiásan vizsgáljuk. Az (I) képletű terméket tartalmazó oldatokat összegyűjtjük és csökkentett nyomáson szárazra pároljuk. Metanol/propanol clegyböl történő kristályosítás után 30X-OS kitermeléssel kapjuk az (I) képletü terméket, mely kromatográfiásan homogén és olvadáspontja 203-204 °C (hexahidrát). Kitermelés: 22 tX. fccju23 = 100 ° (c = 1,0 vízben) Nagynyomású folyadék-kromatográfiás analízis 95X-OS tisztaságot mutat. 10. példa l-N-(L-(-)-4-amino-2-hidroxi-butiril] kanamicin B (I) előállítása A 9. példában leírtak szerint járunk el, azzal az eltéréssel, hogy a kanamicin B-ból előállított (VII) képletű hyersanyagot használjuk. A cim szerinti termék olvadáspontja 190-192 °C bomlással. Kitermelés: 25 IX 11. példa 1 -N-[ L-(-)-4-amino-2-bidroxi-bu tiriljkanamicin A-biszulfát előállítása 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 5
