195825. lajstromszámú szabadalom • Eljárás olaj és/vagy foszfatidil-etanolamin elválasztására ilyeneket tartalmazó alkoholos foszfatidilkolin termékekből
2 195825 3 A találmány olyan eljárásra vonatkozik, mellyel olaj és/vagy foazfatidil etanol-amin különíthető el az ezeket tartalmazó, alkoholban oldódó foszfatidil-kolin tartalmú szója-foszfatidokból, meghatározott, csökkentett mennyiségű foszfatidil-kolint tartalmazó olaj ós/vagy foszfatidil-elanol-amin egyidejű előállításával, kovasavgélen végzett kromatografálás útján. Az élelmiszer- és kozmetikai iparnak olyan foszfatid-keverékekre van szüksége, amelyek foszfatidil-kolin mellett egészen pontosan meghatározott mennyiségű olajai és/ /vagy foszfatidil-etanol-amint tartalmaznak, amely mennyiség a természetes foszfolipidekból nyerhető foszfatidil-kolin termékéhez képest kisebb. Az étolaj előállításánál keletkező növényi nyersfoszfatidok, foszfatidil-kolin melleit, foszfatidil-etanol-amint és mono-, di- és triglicerideket (olaj), valamint foszfatidil-inozidot és más foszfortartalmú glicerinésztert, illetve anyagokat, így peptideket, aminosavakat, sztearint, sztearinsavésztert, Bzabad zsírsavakat és szénhidrát-származékokat tartalmaznak. A nyersfoszfatidokban lévő klsérőanyagok elkülönítésére már több eljárást ismertettek. Ezeknél általában első lépésként a növényi nyersfoszfatidot acetonban olajmentesítik (lásd 1 053 299 számú német szövetségi kőztárBaságbeli közzétételi irat, 3 268 335 számú amerikai szabadalmi leírás, 1 047 597 számú német szövetségi köztársaságbeli közzétételi irat) és második lépésben etanollal extrahálják (lásd 2 724 649 számú amerikai szabadalmi leírás). A harmadik lépésben az etanoloB foszfatid-frakciót OBzlop-kromatográfiának vetik alá, amelynek hőmérséklete nem nagyobb mint 35 ®C (lásd 3 031 478 számú amerikai szabadalmi leírás). Az acetonos olajtalanításnál kis mennyiségben acetonsorba tartozó termékek, így mezitil-oxid, diaceton-alkohol és foron keletkeznek többek között. Ezeknek a mérgező éB sajátos szaguk miatt zavaró hatású anyagoknak az eltávolítása nagy ráfordítást igényel, sőt, részben nem is valósítható meg. Ezenkívül az acetonos olajmentesítés a peroxidok mennyiségének emelkedésével jár együtt, amelyeknek hátrányos fiziológiai hatásai közismertek. A növényi nyersfoszfatidok alkoholos extrahálása olaj tartalmú foszfatid-frakcióhoz vezet (lásd 2 718 797 számú német szövetségi kóztársaságbeli nyilvánosságrahozatali irat, 1 492 952 számú német szövetségi köztársaságbeli szabadalmi leírás, 1 692 568 számú német szövetségi köztársaságbeli közzétételi irat), amelyből szobahőmérsékleten végzett kromatografálás után olajtartalmú, foszfatidil-elanol-amintól mentes foszfatidil-kolin nyerhető. Saját szabadalmi bejelentésünk (P 3 023 814.3) szerinti megoldás alapján sikerült kis mennyiségű víz hozzáadáséval az olajat leválasztani éB nagytisztaságú, olajmentes foszfatidil-kolint kapni. Összességében azonban ez a vizes olajmentesítéB, olajmentes foszfatidil-kolin kinyerésénél háromlépcBŐs folyamatot (extrahálás, kromatografálés, olajmentesítés) igényelt, melyet súlyosbított az, hogy vizes etanol oldatokat kellett feldolgozni. Mindezen eljárásoknál az a cél, hogy a foszfatidil-kolin kísérőanyagainak teljes mennyiségét elkülönítsék. Az eljárások egyike sem irányítható úgy, hogy a foszfatidil-kolin termékek teljesen meghatározott, előzetesen megválasztott, olaj éa/vagy foszfatidil-etanol-amin mennyiséget tartalmazzanak. További hátránya az ezideig ismert eljárások üzemi méretekben való alkalmazásának az a körülmény, hogy a felhasznált adszorpcióé anyag, nevezetesen a bázikus alumíniumoxid, a kromatografálás után szennyezéseket, különösen foszfatidil-etanol-amint tartalmaz és emiatt el kell dobni. További hátrány származik abból, hogy kromatografálás Borán lizofoszfatidil-kolin keletkezik [O. Rengkonen, J. Lipid. Res., 3, 181-3. (1962), D. van Damme et. al., Int. Symp. Chromatogr. - Electroforesis, 5 th. 1968 (Pub. 1969), 268-78.]. A kovasavgéles kromatografálásnak eddig csak analitikai és preparativ jelentősége volt. így pl. foszfatidokat hexánoldatban a kovasavgél nem adszorbeált (lásd 77 012 202 számú japán szabadalmi leírás, 3 869 482 számú amerikai szabadalmi leírás), míg alkoholos oldatból visszatartotta (H. Richter et al., Pharmazie 1977. 32 (3), 164]. A különböző magatartás lipofil, polimolekulás foszfatid-micellék keletkezésével magyarázható meg hexán esetében, míg alkoholos oldatban a jelenlévő foszfatidok molekulárisak. A kromalografálást itt is szobahőmérsékleten végzik. A foszfatidok szétválasztása és szelektív deszorbeáltatása alkoholos foszfatidoldetok esetében alkohol/ammónium-hidroxid (49 093 400 számú japán szabadalmi leírás) vagy kloroform/metanol keverék alkalmazásával (C. H. Lea et al., Biochem. J., 60, 353-63. (1965)], illetve kloroform/metanol/viz keverékkel (79 916 számú német demokratikus köztársaságbeli szabadalmi leírás) történhet. Ennek az eljárásmódnak eddig nem volt műszaki jelentősége, mert eluálószerként mindig mérgező anyagok keverékét - így ammónium-hidroxid vagy kloroform - kellett használni, melyeknek visszanyerése és eltávolítása a lecitinből nagyon költséges. A kereskedelmi forgalomban kapható foszfatidil-kolin-nyerstermékek, különösen a szójabab-foszfatidokból származók, alkoholos extrahálésBal nyert termékek, amelyek alkoholban oldódnak és foszfatidil-etanol-amint tartalmaznak föszennyezésként. Vannak azonban olyan foszfatidil-kolin-nyerstermékek is, amelyek, mint leírják, csak az egyiket vagy b másikat tartalmazzák a két fószennyezés közül. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 3
