195514. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a primicin (triamicin ?) antibiotikum-komplex feltárására

1

2

195 514

Aj = 0,05 /ig/llll A3= 0,03 jLíg/inl Bi=0,2 nglml

Az Aj és A3 komponenseknél aktívabbnak mutatkozott az A,A3 komponens kettős, 0,02 jug/ml érté- 5 kével.

A triamicin-komplex jellemzői

Az 1. példában ismertetett 3. minta jellemzői: biológiai aktivitás: 0,05 jzg/ml, 10

oldhatóság: vízben 5 mg%/50 °C;

n-butanol :etanol : víz = 25 :25 :50 oldószerelegybcn 600 mg%/50°C;

Op.: 175—180 °C, bomlás közben;

[a]“ = + 14° 15

c = 0,6 n-butanol : etanol : víz = 25 :25 :50 oldószerelegyben.

Elemanalízis:

talált: C = 56,27; H = 9,14%; N = 3,56%; S = 1,9%;

hamu: 0; 20

egyenértéksúly: 1864 (HCI04 tritrálással, hangyasavasjégecetben (1 :3); spektrumok :

UV = Xmax 206 nm (metanol);

■IR = «W (KBr): 3400, 1140, 1720 sh, 1480, 25

1460 sh, 1425, 1395, 1320,

1220 sh, 1190,1140 és 1090 cin“ ' ; ,3C—NMR-spektrum: 2/a és 2/b ábra.

VKR-ás összetétel: 1. ábra és I. táblázat.

Antibiotikus spektrum (polirezisztens törzsekre): 30

II. táblázat.

III. táblázat

A 3. Triainicin-(primicin) minta Aj főkomponensének

azonosítható 13C— NMR kémiai eltolódásai 35

174.6 d COO (C—1)

157.8 s NHCNH2NHj+

144.4 s C—16

13.5 s C—32

127.8 d C—33 40

122.9 d C—17

104.1 d C-r

85.5 d 81.3 d

77.9 d

77.7 d

76.6 d

75.1 d

74.2 d

70.5 d

70.2 d (2C)

69.8 d

66.8 d 64.1 d (2C)

63.7 d-CI I

—C-CH-O-45

50

55

III. táblázat (folytatás)

61.9 t

C-5'

48,9 d

C—2

33.1 d

€-4

1 7.5 q

16.2 q

15.3 q-CH

14.0 q 1 1.0 q

9.9 q

A CHj jelek egy részét, valamint a C—34 és C—36 dublettekct fedik a DMSO-d6, az oldószer jelei. Azonosítható Cll2 jelek: 46.1; 44.9; 43.9; 35.2; 35.0; 33.1; 31.8; 29.3; 25.3; 24.4; 22.2; 21.7; valamennyi triple«.

SZABADALMI IGÉNYPONTOK

1. Eljárás a Thermopolyspora galeriensis sugárgombafaj MNG 00181 törzse által termelt primicin (triamicin) antibiotikum-komplex szétválasztására À), A3 és főkomponensekre, valamint 10 minor komponensre, azzal jellemezve, hogy a fermentléből kinyert nyers-, félkészvagy kész-termékből valamely 1—4 szénatomos alkohollal, vagy 1—4 szénatomos alkoholok keverékével 0,5— 1,0%-os oldatot készítünk, ezt vékonyréteg-kromatográfiás hordozóra felvisszük, majd 1—4 szénatomszámú szerves sav és/vagy klórozott szénhidrogén és/vagy 1-4 széiuitomszáimi alifás alkohol és/vagy viz tartalmú kombinált oldószerrendszerben többszörösen futtatjuk, majd az egyes komponenseket indikáljuk.

2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy vékonyréteg-kromatográfiás hordozóként Kieselgélt alkalmazunk.

3. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy vékonyréteg-kromatográfiás futtatószerként kloroform : metanol : hangyasav : víz = 50 :35 :14 :1 térfogatarányú oldószerrendszert alkalmazunk.

4. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy Vékonyréteg-kromatográfiás futtatószerként kloroform : metanol :jégecet : víz = 45 :30:15 :20 térfogatarányú oldószerrendszer alsó fázisát alkalmazzuk.

5. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy indikálásra bioautografikus (Bacillus subtilis)-, var ilin-kénsavas vagy Sakaguchi-módszert alkalmazunk.

Kiadja az Országos Találmányi Hivatal A kiadásért felel: Himer Zoltán osztályvezető Megjelent a Műszaki Könyvkiadó gondozásában

6

COPYLUX Nyomdaipari és Sokszorosító Kisszövetkezet