195504. lajstromszámú szabadalom • Eljárás izoszilibinmentes szilibinin előállítására
1 195 504 2 károsodásban szenvedő betegeken, klórpromazin előírásával, ugyancsak a szilibinin pozitív hatását mutatták. Más kísérletek például aklorokvin vagy aszparagináz májkárosító hatásainak meggátlását célozzák. A foglalkozással kapcsolatos májkárosodásoknál valamennyi kezelés alatt álló betegnél jelentősen javíthatók voltak a kórosan megnövekedett laboratóriumi leletek, függetlenül a mindenkori kiváltó októl vagy az esetleges egyéb betegségektől. Fentiekből adódóan elég bizonyíték van arra, hogy a szilibinin krónikus-gyulladásos máj betegségeknél és májzsugorodásnál is jelentős javulásokat idéz elő. így például felvettünk betegeket májzsugorodással egy hosszú ideig folytatott tanulmány keretében, egy tetszőleges, kettős vakkísérlethez, amelynél a szilibinint egy placeboszer ellenében vizsgáltuk. A terápiás eredmények kiértékeléséhez a kritérium mindenekelőtt a túlélés ideje volt. Ennél a szilibinin jelentősen felülmúlta a placebokczelést. Hatásösszehasonlítás szilibinin, izoszilibinin és szilibin (szilibinin/izoszilibin keverék) között, falloidin- és prazeodim-intoxikációs modellben egéren, intravénás beadás után A szilibinin, izoszilibinin és szilibin mint N-metihglukaminsók antihepatotoxikus hatását 50 és 100 mg/kg-í dózisokban, a szilibininre vonatkoztatva, egér falloidin- és prazeodim-mérgezési modelljében, intravénás beadás után vizsgáltuk. A kísérleti anyag beadását 1 órával a falloidin beadása előtt, illetve 1 órával a prazeodim beadása előtt és 6, 24 és 48 órával a prazeodim beadása után végeztük. A falloidin-mérgezésnél a túlélési arányt értékeltük ki és a prazeodim-mérgezésnél különböző szérum- és májparamétereket, 72 órával a mérgezés után. A falloidin-mérgezésnél a túlélési arány szilibinin beadása után mindkét dózisnál 100% volt, a többi anyagokkal a túlélési arány nem múlta felül a kezeletlen, károsodott kontroll állatok 40%-os túlélési arányát. Az izoszilibin a prazeodim-mérgezés kezelésénél toxikusnak bizonyult, így a 100 nrg/kg-1 dózist két részdózisra kellett felosztani. Az izoszilibinmentes szilibinin fizikai állandói a következők: a) 1H—NMR (piridin-ds: 100 MHz) ő (ppm) 3,79 s 3H OCH3 3,8-4,2 m 1H CH2OH 4,25-4,40 m 1H 2'H 5,05 d (J = 11 Hz) 1H 3H 5,39 d (J = 8 Hz) 1H 3'H 5,48 d(J = 11 Hz) 1H 2H 6,41 d (J = 2 Hz) 1H 6H 6,51 d (J = 2 Hz) 1H8H 7,1-7,6 6H arom. H b) ,3C-NMR (piridin-ds: 25, 18 MHz) C atom 5 (ppm) 4 198,43 7 168,85 5 165,06 9 163,75 16 159,89 17 148,82 4' 145,05 5 10 15 20 C atom 3' 1' 14 6' 19 2' 5' 18 15 10 6 8 2 12 13 3 11 20 5 (ppm) 144,71 131,33 128,45 123.83 121.83 117,50 117,15 116,62 112,11 101,61 97,56 96,27 84,31 79,97 77,13 73,36 61,48 55,99 O Op.: 165-168 °C; 180 °C-tól bomlik, d) UV: Xmax = 288 nm; log e = 4,34 0 IR(KBr): 3450 cm-1 (OH) 1635 cm-1 (C = 0) 25 1510 cm-1 SZABADALMI IGÉNYPONTOK 30 1. Eljárás az (I) képletű, izoszilibinmentes szilibinin előállítására a Silybum marianumsL. Gaertn. szárított gyümölcseiből barnás por alakjában izolált 70—80%-os polihidroxi-fenil-kromanon-keverékből, azzal jellemezve, hogy a barnás port tömegére vonatkoztatva 3—5-szörös 35 tömegmennyiségű metanolban szuszpendáljuk, a kapott szuszpenziót keverés közben felforraljuk, a metanolnak !/3—2/3-részéb csökkentett nyomáson eltávolítjuk, a 1 oncentrátumot- szobahőmérsékleten állni hagyjuk, majd a kivált terméket kiszűrjük, 1—3-szor kevés hideg 40 Me‘anollal mossuk, szárítjuk, 40—60-szoros tömegmennyiségű etil-acetátban melegítés közben feloldjuk, \ isszafolyatás közben aktívszénnel kezeljük, az aktívszenet kiszűrjük, a szűrletet csökkentett nyomáson eredeti térfogatának 1/10 részére koncentráljuk, a kon- 45 (entrátumhoz erélyes keverés melleit a konccntrátum 1/10 térfogatának megfelelő mennyiségű metanolt adunk, az elegy et szobahőmérsékleten állni hagyjuk, a '"kivált terméket alaposan keverjük, leszívatjuk, a leszívatott terméket 1—3-szor keverés etil-acetáttal mossuk és ^0 vákuumban szárítjuk. (Elsőbbsége: 1984. 11. 22.) 2. Eljárás az (I) képletű, izoszilibinmentes szilibinin előállítására a Silybum marianumsL. Gaertn. szárított gyümölcseiből barnás por alakjában izolált 70-80%-os 05 polihidroxi-fenil-kromanon-keverékből, azzal jellemezve, hogy — a barnás por 1 tömegrész mennyiségét — ami a lovábbiakban a mennyiségek vonatkoztatási alapja — 0,7—1,5 tömegrész, vízzel telített etil-acetátban szuszom pendáljuk, és az így kapott szuszpenziót 1—2 napig állni hagyjuk, majd a csapadékot leszívatjuk, majd — a kapott csapadékot 0,07—0,15 tömegrész hideg vízzel telített etil-acetáttal mossuk és 30—50 °C-on vákuumban szárítjuk, majd — ezt a terméket 30-50 tömegrész, vízmentes etil-4
