195504. lajstromszámú szabadalom • Eljárás izoszilibinmentes szilibinin előállítására
1 195 504 2 A találmány tárgya eljárás szilibinin és ezt a vegyületet tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására. A máriatövis, Silybum marianum (L.) Gaertn. (Carduus marianus L.) az ókortól ismert gyógynövény. Ennek a növénynek a gyümölcseiben előforduló flavolignanokból R. Münster izolált egy komponenst [R. Münster: Dissertation, München, 1966]. A vegyület kémiai szerkezetét A. Pelter és R. Hansel tisztázta [Tetrahedron Letter, London, 25, 2911—2916 (1968)]. Ismeretes, hogy a szilibin — korábbi nevén szilimarin 1 - értékes májgyógyszer [v.ö. 17 67 666 számú német szövetségi köztársaságbeli közzételi irat]. A szilibin (szilimarin I) előállítására technikai eljárást ismertet például a 19 23 082 számú német szövetségi köztársaságbeli közzétételi irat. H. Wagner, P. Diesel ésM. Seitz már 1974-ben feltételeztek a szilibinnel kapcsolatban két helyzeti izomert, a szilibint és az izoszilibint [Arzneimittelforsclumg, 24, (4) 466-471], Ezt a feltevést A. Arnone, L. Merlini és A. Zanarotti [Journal Chemical Society Chem. Comm., 16, 696—697 (1979)] pontosította és kísérletileg bizonyította. Eszerint az ismert szilibin két különböző vegyületből, az (I) képletű szilibininből és a (II) képletű izoszilibinből áll. A vegyületek szerkezeti képletéből látható, hogy a két vegyület helyzeti izomer. A két fenti vegyületet, az (I) és (II) képletű vegyületet eddig csak analitikai mennyiségekben választották szét és állították elő, és az egyes izomerek farmakológiai hatásairól semmi nem volt ismeretes. A találmány feladata eljárás kidolgozása izoszilibinmentes szilibinin, valamint szilibinin tartalmú gyógyszerkészítmények előállítására. A találmány tárgya eljárás az (I) képletű szilibinin előállítására, a Silybum marianum L. Gaertn. szárított gyümölcseinek a zsíros olajok nagy részétől préseléssel való mentesítésével, majd a még 5 —10 tömeg% maradékolajat tartalmazó préselési maradék etil-aceíáttal való alapos extrahálásával, az etil-acetát lepárlásával, az így kapott száraz maradék 2 tömeg% mennyiségének egy 95 tömegrész metanolt, 5 tömegrész vizet és 100 tömegrész petrolétert (forráspont 40—60 °C) tartalmazó oldószerelegy metanolból és vízből álló alsó fázisában való feloldásával, a pelyhes szilárd fészek centrifugálással való eltávolításával, és az előbbi oldószerelegyben a maradék többszörös, ellenáramú extrakciójával, a felső fázis és alsó fázis 1 :1 térfogataránya mellett, és ezt követően a távozó alsó fázisból, azt vákuumban szárazra párolva, barnás por alakjában izolált 70—80%-os polihidroxifenil-kromanon-keverékből (szilimarin I—IV = szilimarin csoport) oly módon, hogy a kapott barnás port 3-5- szörös tömegmennyiségű metanolban szuszpendáljuk, a kapott szuszpenziót keverés közben felforraljuk, a metanolnak körülbelül 1/3—2/3-részét csökkentett nyomáson eltávolítjuk, a koncentrátumot szobahőmérsékleten állni hagyjuk, az eközben kivált terméket kiszűrjük, 1-3- szor lehetőleg kevés hideg metanollal mossuk, szárítjuk, 40—60-szoros tömegmennyiségű etil-acetátban melegítés közben feloldjuk, visszafolyatás közben forralva aktívszénnel kezeljük, az aktívszenet kiszűrjük, a szűrletet csökkentett nyomáson eredeti térfogatának körülbelül 1/10 részére koncentráljuk, a koncentrátumhoz erélyes keverés mellett annyi metanolt adunk, amennyi a koncentrátum térfogatának körülbelül 1/10 része, az elegyet néhány órán át szobahőmérsékleten állni hagyjuk, a 2 kivált terméket intenzív keverővei felkeverjük, leszívatjuk, a leszívatott terméket 1—3-szor kevés etil-acetáttal mossuk és vákuumban szárítjuk. lzoszilibinmentes szilibinint a találmány szerint úgy is előállíthatunk, hogy — a kapott barnás por 1 tömegrész mennyiségét — ami a továbbiakban a mennyiségek vonatkoztatási alapja - 0,7—1,5 tömegrész vízzel telített etil-acetátban szuszpendáljuk; és az így kapott szuszpenziót 1—2 napig állni hagyjuk, a csapadékot leszívatjuk, majd — a kapott csapadékot 0,07—0,15 tömegrész hideg, vízzel telített etil-acetáttal mossuk és 30—50 °C-on ’ ákuumban szárítjuk majd — ezt a terméket 30—50 tömegrész száraz (vízmentes) etil-acetátban a forrás hőmérsékletén feloldjuk, 0,2— 0,4 tömegrész aktívszénnel 2 órán át visszafolyatás közben forralva kezeljük, szűrjük és a szűrletet 30— 50 °C-on a feloldáshoz használt oldószer térfogatának 1/12-ed részére bepároljuk, majd — a koncentrátumhoz 0,5—0,8 tömegrész vízzel telített etil-acetátot adunk, a kivált szilibinint 5—10 óra núlva kiszűrjük, és — a szilibinint 0,9-1,8 tömegrész technikai ctil-acetátban szuszpendáljuk, újra megszűrjük, vákuumban 30-50 °C-on előszárítjuk, az előszárított terméket megőrüljük és 30-50 °C-on ismét vákuumban megszánt] uk. Az első műveletben kiindulási anyagként alkalmazott barnás por, illetve nyers szilimarin a szilimarin 1—IV keveréke (19 23 082 számú német szövetségi köztársasági szabadalmi leírás). A nyers szilimarint vízzel telített eti'-acetáttal kezelve, lényegileg elkülönítjük a szilimarin II-IV termékek főrészét (a szilibinin a szilimarin I), a nyers szilimarinban lévő 20—30% kísérő anyagot, valamint az izoszilibin egy részét. Ily módon a második műveletben a nyers szilimarin minőségétől függően a nyers szilibinint 80—85 % kitermeléssel (a nyers szilimarin szilibinin tartalmára számítva) és 80—84%-os tartalommal kapjuk. A nyers szilibinin — amint azt a szakirodalom ismerteti — az izoszilibin és szilibinin körülbelül 1 :4 arányú ke «'éréké. A harmadik és negyedik műveletekben elkülönítjük a szilibinintől az izoszilibinin fő részét, valamint a többi fent említett komponenst. Ennek az elválasztási eljárásnak különleges előnye, hogy csak egyetlen oldószert használunk, vagyis az etilacetátot, de különböző víztartalmakkal. Emellett lényeges, hogy a harmadik műveletben vízmentes etil-acetátot és a negyedik műveletben vízzel telített etil-acetátot alkalmazzunk. A találmány szerinti eljárással a szilibinint 79—85% kitermeléssel (a nyers szilibinin szilibinin tartalmára számítva) és 96—98% szilibinin tartalommal krpjuk. A találmány szerinti eljárás egy kiváltképpen előnyös kiviteli módja szerint úgy járunk el, hogy: — 1 tömegrész barnás port 0,9 tömegrész, vízzel telített etil-acetátban szuszpendálunk, a szuszpenziót 48 órán át szobahőmérsékleten állni hagyjuk, és a kapott csapadékot leszívatjuk, — a csapadékot 0,09 rész hideg, vízzel telített etil-acetáttal mossuk és 48 órán át 40 °C-on vákuumban szárítjuk, — a kapott terméket 36 tömegrész száraz etil-acetátban 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
