195480. lajstromszámú szabadalom • Eljárás fenil nonatetraénsav-származékok és azokat tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
szerint a 2/ l-deccniI/-l-/hidroxi-metil/-bcnzol /E/- és l'Z;'-izoliterjeinek keverékévé alakítunk. A kapott keveréket szilikagélcn történő kromatografálással tiszta /E/- és /Z/-alkoholokra választjuk szét. A fenti izomereket az 1. példában leírt módon trifenil-foszfin-hidrobromiddal reagáltatjuk. A cím szerinti foszfoniumsókat kapjuk. 36. példa /A1 ] -E/-9-[2-/l -decenil/-fenil ]-3.7 -dinietíl-2,4,6,8--nonetetraénsav /E/-[[2-/l-decenil/-fenil]-meti!]-trifenil-foszfonium-bromidot a 3. példában leírt módon /all-E/-9-[-2-/deceniI/-fenil]-3,7-dimetil-2,4,6,8-nonatetraénsav-etilészterré alakítunk. A terméket az 5. példa szerinti eljárással bázissal hidrolizáljuk és a nyers savat acetonitrilből kristályosítjuk. A kapott cím szerinti vegyidet 105— 107 °C-on olvad. 37. példa /E,E,E,E,Z/-9-[2-/l-decenilHenil]-3,7-dimetil-2,4,6,8-nonatetraénsav A cím szerinti vegyületet /Z/-[[2-/l-decenil/-fenil]-metil -trifenil-foszfonium-bromidból a 36. példa szerinti eljárással állítjuk elő. Az etil-észter hidrolízise és a nyers sav éteres kristályosítása után 103—105 °C-on olvadó tiszta cím szerinti vegyületet kapunk. A következő példákban az /all-E/-9-[2-/noniI-oxi/-fenil]-3,7-dimetil-2,4,6,8-nonatetraénsav (a továbbiakban „A-vegyület”) gyulladásgátló hatását határozzuk meg állatkísérletekben gyulladás-modelleken és bizonyos arthritis adjuváns krónikus modelleken. Valamennyi kísérletben az A-vegyületet és az összes többi retonoid vegyületet 0,05 % galluszsav-propilészter antioxidánst tartalmazó, arachis-olajjal képzett kompozíció formájában alkalmazzuk. Az alábbi dózistérfogatokat alkalmazzuk: 5 ml/kg patkányon és 10 ml/kg egéren. A kontroli-állatok azonos térfogatú, azonban teszt-vegyületet nem tartalmazó arachis-olajhordozóanyagot kapnak. 38. példa A-vegyület hatása metilezett szarvasmarha szérum albumin (MBSA) késleltetett hiperszenzibilitására Állat: E 33 altörzshöz tartozó hím és nőstény MFI egerek. Induló súly kb. 25 g. Anyagok: metilezett szarvasmarha szérum albumin (MBSA, sigma). Freund-féle teljes adjuváns (Difco). Módszer: 10—10 egérből álló csoport állatait a 0. napon szenzitizáljuk oly módon, hogy két abdominális helyre az MBSA és Freund-féle teljes adjuváns víz-az-olajban emulzióját (0,05 ml) fecskendezzük intradermálisan. A 9. napon az egerek egyik mancsába 20 pl 1%-os MBSA-oldatot és ellenoldali mancsába 20 pl vizet fecskendezünk. A mancsok térfogatát 24 óra múlva higanykiszorításos pletizmográfiával meghatározzuk. Minden kezelt csopportban összehasonlítjuk az MBSA-kezelt mancs térfogatnövekedését a vízzel kezelt mancstérfogatnövekedésévcl. A hordozó és a retinoid adagolását a 0. napon kezdjük el és a 9. napon fejezzük be. térfogatnövekedésével. A hordozó és a retinoid adagolását a 0. napon kezdjük el és a 9. napon fejezzük be. Eredmények: az eredményeket a II. táblázatban foglaljuk össze. II. táblázat A-vegyület hatása MB A késleltetett hiperszenzitilitási tesztben 26 Kezelés Dózis mg/ kg’1 Mancstérfogat ff-OS növekedése %-os csökkenés (arachisolajos kontrolihoz) Átlagos testsúlyváltozás (g) Arachisolaj Etretinát 10 109+11 59 ±9XX 46 M 3,8 F 0,2 M -0.8 A-vegyület 10 102 ±12ns 6 F -0,2 M 3,3 A-vegyület 30 50±7xxx 54 F -0,2 M 2,8 A-vegyület 100 40 ±5XXX 63 F 0,5 M 3,3 Valamennyi csoport F -0.2 4 Ihm és 6 nőstény egeret tártálmáz (külön ketrecekben tartva). A teszt-vegyületet orálisan 10 ml/kg dózistérfogatban adagoljuk (10 dózis), xx = p ^0,01 xxx = p <0,001 ns = nem szignifikáns a hordozós kontrollal a Student-féle kétfarkas „t” teszttel összehasonlítva. 39. példa A-vegyület hatása kifejlődő adjuváns arthritisre, patkányon Állat: AHH/R nősténypatkányok (PVG variáns), induló súly 110—140 g. Anyagok: adjuváns az injekcióhoz. Hővel elölt M. tuberculosis (humán törzsek C, DT és PN) folyékony páráimnál készített, 5 mg/ ml koncentrációjú homogenizált szuszpenziója. Módszer: a patkányokat véletlen kiválasztás alapján ötös csoportokra osztjuk és minden patkány jobb hátsó talpába szubplantáris injekció segítségével 0,1 ml arthritis adjuváns szuszpenziót fecskendezünk. A teszt-vegyületet minden reggel intubálással az adjuváns injekció beadásának napjától kezdődően adagoljuk. Két kontrollcsoportot alkalmazunk (3-3 normál patkány) és ezeket teszt-vegyületet nem tartalmazó hordozóval kezeljük. A dozirozást naponta végezzük a kísérlet befejezéséig (a 15. nap), kivéve az első hét végét (5. és 6. nap). Egyes kezelt csoportokban referens anyagként standard retinoidot alkalmazunk. 95 480 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 14
