195425. lajstromszámú szabadalom • Eljárás szomatotropint tartalmazó nyújtott hatású injekciós készítmény előállítására
5 195 425 6 2. vizsgálat A vizsgálatban 3 3 állatból állt a kísérleti, illetve a kontroll csoport. A teheneket úgy tartottuk cs tápláltuk, ahogyan azt az 1. vizsgálatnál leírtuk, ugyancsak a fentiek szerint határoztuk meg a vérplazma szomatoíropin szintjét is. 7,3 g, az 5. példa szerint elkészített készítmény befecskendezését követően 29 napig végeztük a vizsgálatot. Az alábbi eredményhez jutottunk: szomatotropin konc. nap kontroll (nrg/ml) kezelt 0. 5 6 2. 9 225 4. 7 106 6. 10 81 8. 20 50 10. 17 49 12. 14 47 14. 15 38 16. 13 34 18. 8 25 20. 18 31 22. 10 17 24. 6 21 29. 7 17 Ebben az esetben feltüntettük a kontroll állatoknál nyert értékeket is, mert a vérük szomatotropinszintje, amint az az adatokból látható, erősen ingadozott. 3. vizsgálat Lényegében az 1. vizsgálatot ismételtük meg, azzal a különbséggel, hogy a csoportok csak három állatból álltak. Kontroll csoport nem volt, de a kezelés előtt mintákat vettünk, és ezek analízisének eredményei adták a kontroll értékeket. Az egyes csoportokat az 1„ 2., illetve 3. példa szerint előállított készítményekkel kezeltük, mindegyik állatba 4,9 g készítményt fecskendezve a 0. napon. A vérminták borjú szomatotropin az alábbi táblázatban foglaljuk össze: koncentrációját szomatotropin konc. (ng/ml) nap . példa 2. példa 3. példa készítménye készítménye készítménye-5. 2,9 3,6 3,3-2. 2,3 1,2 1,6 1. 43 56 42 2, 42 82 53 3. 64 106 81 4. 74 109 76 5. 104 156 93 9. 182 181 172 12. 141 112 124 16. 89 65 82 19. 71 49 64 23. 47 30 42 26. 40 22 30 A fenti kísérletek a beadagolt borjú szomatotropin kiváló, 28 napos elnyújtott felszabadulását szemlélteik. Nyilvánvaló, hogy a 28 naponkénti vagy még ritkább injektálás, amit a találmány szerinti készítmény ■ehetővé tesz, kényelmes és gazdaságos, és e készítmény a borjú szomatotropin bejuttatásának kiváló módját biztosítja. Az alábbi példák az elmondottak részletesebb szemléltetését szolgálják; kizárólag szemléltető célzatúak, így a találmány oltalmi körét semmi módon nem korlátozzák. 1. példa 1800 g szezámolajat 100 °C hőmérséklet körülire melegítünk, és hozzáadunk 200 g tisztított, fehér méhviaszt. A keveréket ezen a hőmérsékleten kevertetjiik, amíg a viasz fel nem oldódik az olajban. A keveréket állandó enyhe keverés mellett lehűtjük 22 °C hőmérsékletre. Az olaj-viasz keveréket Ultra-Turrax homogenizátorban homogenizáljuk, amíg az „sima" és krémszerű nem lesz és viszkozitása csökken. A fenti olaj-viasz keverék 13,16 grammjához 22 °C hőmérsékleten, enyhe keverés mellett hozzáadunk 2,83 g borjú szomatotropint, amit a 0095361 számú európai szabadalmi leírás szerint módosított Escherichia coli-val állítottunk elő. A szomatotropin készítmény teljesen tiszta volt, az oldott anyag optikai sűrűségmérése alapján 75*4 összfehérjét tartalmazott, melynek 95%-a a kizárásos kromatográfiás adatok szerint monomer borjú szomatotropin és azzal rokon anyag volt. Az így előállított készítmény 12,6/í borjú szomatotropint és azzal rokon anyagot tartalmazott. .7.-70. példa Az alábbi példákban szereplő készítményeket lényegében az 1. példában leírtak szerint állítjuk elő. A készítményeket az alábbi táblázatban soroljuk fel: példa hordozó szomatotropin % 2. szezámolaj/fehér méhviasz, 95:5 12,4 3. földimogyoró-olaj/sárga méhviasz, 90:10 12,6 4. földimogyoró-olaj/sárga méhviasz, 99:1 12,6 5. földimogyorsó-olaj/sárga méhviasz, 99:1 12,6 6. földimogyoró-olaj/sárga méhviasz, 99:1 10,9 7. földimogyoró-olaj/sárga méhviasz, 90:10 12,6 8. szilikonolaj fpoli-dimetil-sziloxán), gyógyászati minőségű, 350 cs/szilikonviasz (sztearoxi-trimetil-szilán-sztearilalkohol), 90*40 12,6 9. ugyanaz, mint a 8. példában, de a szilikonolaj élelmiszer minőségű 12,6 10. szilikonolaj (polifenil-metil-sziloxán kopolimer, 22,5 cs)|szilikonviasz (sztearoxi-trimetil-szilán-sztearilalkohol), 90+1 0 12,6 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 4
