195328. lajstromszámú szabadalom • Enzimmel kapcsolt és egyéb szerológiai reakciók kiértékelésére alkalmas fotométer
1 HU 195 328 B 2 A találmány enzimmel kapcsolt és egyéb szerológiai reakciók kiértékelésére alkalmas fotométer, amelynek mérőfeje, elisalemeze és az elisalemezt mozgató mechanizmusa, továbbá tápegysége és fényforrása van. A nagyérzékenységű szerológiai reakciók, különösen az enzimmel kapcsolt immunszorbens meghatározások (elisa - enzyme-linked immunosorbent assay) elterjedése szükségessé tette vertikális sugármenetű fotométerek kifejlesztését és alkalmazását. A nagyszámú, de kis térfogatú (50-200 pl) minták előkészítése és fotometrálása tégla alakú müanyaglemez segítségével történik, amelyben mindkét irányban szorosan vájulatok vannak a minták befogadására. Az úgynevezett Takátsy-féle lemezben nyolc sorban 12- 12 vájulat, azaz 96 vájulat van. Ez tulajdonképpen a fotométer küvetta szerepét is betölti. A vájulatokban lévő folyadékmintákat a fotométer alulról vertikálisan átvilágítja, és a mintákban kifejlődő színreakció mértékét a fénysugár útjába helyezett színszűrő, fényérzékelő, amely lehet fotodióda vagy fotocella, és megfelelő elektronika segítségével mérik. Az átvilágítást és az érzékelést úgy kell megoldani, hogy a fénysugár a vájulatok falát ne érintse, nehogy a folyadék-műanyag határfelületen keletkező fényszóródás és visszaverődés fotometrális pontatlanságokat okozzon. Ezt a feltételt az ismert berendezések a vájulatok peremébe beilleszkedő rugós kónuszos kiképzésű központosító fejjel biztosítják, amely a színszűrőt és a fotoérzékelőt is magába foglalja. Abból kifolyólag, hogy a műanyaglemez vastagsága, azaz magassága különböző, a központosító fejet magassági irányban állítani kell tudni. A központosító fejet minden egyes vájulatba be kell engedni, illetve a műanyaglemez továbbmozgatásakor fel kell emelni, majd a következő vájulatba újra be kell emelni, mert csak így tudja ellátni központosító funkcióját. Ez viszont bonyolult mechanizmust igényel, ami még a berendezést drágítja is, és alkalmazását is nehezebbé teszi. Magának a műanyag lemeznek a továbbítása, azaz mindig a következő vájulatnak a mérőfej alá juttatása többnyire kézzel vagy bonyolult, XY tengely mentén mozgató mechanizmussal történik. Ez is nagymértékben drágítja a berendezést és nehezebbé teszi alkalmazását Hátrány továbbá, hogy az elisalemezt, amely 96 vájulattal rendelkezik, akkor is el kell dobni, ha a vá julatoknak csak kis részét használták fel A 4305723 sz. US szabadalmi leírásból ismeretes olyan fotometrikus abszorpcióméter, amelynél köralakú tárcsán süllyesztve hagyományos négyszög keresztmetszetű üvegküvetták vannak elhelyezve, és a mérő fénysugár vízszintesen a tárcsa sugárirányában halad át a küvettán. Afogaskerekes hajtómű az álló tárcsában folymatosan forgatja a fotométert Az fly módon kapott, mért értéknek csak a közép szakasza használható fel, azaz amikor az egész fénysugár csak a mérendő mintán halad keresztül. Ezért a kapott hullámalakú jelnek csak a hullám csúcsából kivágott ún „ablak” részét kell bonyolult elektronikával kiértékelni. A tárcsában süllyesztetten elhelyezkedő küvettákat pedig minden mérés között ki kell mosni, ami nagyon nehéz feladat. Maguk a küvetták igen drágák. A találmány célja a felsorolt hiányosságok kiküszöbölése és egyszerű, könnyen kezelhető fotométer kialakítása, enzimmel kapcsolt és egyéb szerológiai reakciók kiértékelésére. A találmány tehát enzimmel kapcsolt és egyéb szerológiai reakciók kiértékelésére alkalmas fotométer, amelynek mérőfeje, elisalemeze és elisalemezt léptetve mozgató mechanizmusa, továbbá tápegysége és fényforrása van. A találmány lényege, hogy az elisalemez a fotométerhez oldhatóan kapcsolt köralakú tárcsa, a tárcsán azonos sugárban körben egyenletesen elosztott, mintákat befogadó vájulatokkal, továbbá, hogy az elisalemezt léptetve mozgató mechanizmus az elisa tárcsát a vájulatok osztásának megfelelő ütemben léptetve forgató és pozicionáló f orgatómechanizmus, amelynek az elisatárcsát vele együtt forgóan felvevő forgótengelye, a forgatótengelyre ékelt és az elisatárcsa vájulatai számához igazított számú, körben elrendezett csapokkal ellátott kilincskereke és a kilincskerék csapjait léptető meghajtott, továbbító reteszelőkereke van. A találmánynál előnyösen a fényforrás és a tápegység külön házban van elrendezve, míg a fotométer elektronikája mérőfejjel egybeépítve a házhoz rögzített külön egységben van elrendezve. Természetesen találmányunk esetén is előnyös, ha a mérőfej külön egységben magassági irányban állíthatóan és beállított helyzetben rögzíthetően van elrendezve. A találmány szerinti fotométer igen egyszerű kialakítású, gyors működésű, a mintaváltás közben nincs szükség a mérőfej emelésére, illetve süllyesztésére, legfeljebb egyszer magassági irányú beállítására. Előnye továbbá, hogy a fotoértékelő által gerjesztett rendkívül kis áramok az elektronikus rendszerbe hozzávezető kábelek nélkül közvetlenül juttathatók, amivel nagy zajmentességet és stabilitást sikerült elérnünk A köralakú elisalemez további előnyei: a) ha a minták korpuszkuláris elemeket (pl vörösvértestek baktériumok egyéb sejtek) tartalmaznak a lemezek oszlopban egymásra helyezve egyszerű kilendülőfejes centrifugában centrifugálhatok Ilyenkor a sejtek a vájulatok egyik sarkába gyűlnek és a felülúszó a lemez közepén keresztül fotometrálható. b) A kerek lemezben a 37 °C-os hőmérsékleten a szögletes lemezeknél megfigyelt úgynevezett „széli hatás”, azaz az éleken és csúcsokon fellépő egyenetlen hőátadásból eredő eltérő reakciókészség elmarad. A találmányt részletesen a kiviteli példány kapcsán a rajz alapján ismertetjük amelyen a találmány szerinti fotométer kiviteli példányának részben metszett elvi oldalnézete látható. A fotométer egymással kapcsolatban álló két részből áll, nem ábrázolt fényforrást és tápegységet magába foglaló 21 házból, valamint a házhoz rögzített 22 egységből A 22 egységen magassági irányban menet segítségével állítható és beállított helyzetében 23 el-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 2
