195247. lajstromszámú szabadalom • Eljárás herpesz vírusokra fajlagos immunológiai anyagok előállítására és kimutatásukra
1 195247 2 A találmány tárgya eljárás antitestek, pontosabban olyan antitestek előállítására, amelyek egyedi, több irányban fajlagos immunreaktivitást mutatnak az 1. és 2. típusú Herpes simplex vírus D-glikoproteinjeit (HSVgD—-I és gD—2) és szerkezetileg rokon anyagokat illetően. A közelmúltban jelentős kutatási erőfeszítés irányult a Herpes simplex vírus glikoproteinek izolálására és jellemzésére, amelyek a virion burkolat szerkezeti komponenseit alkotják, és amelyek valószínűleg fontos szerepet játszanak a virális fertőzés beindításában. Az erre a kutatásra alapozott legjelentősebb előrehaladás a HSVD-glikoprotein új készítményeinek felfedezése, amely a jelen bejelentők munkája; ezek, amikor vakcina kompozíciók aktív immungénjeként alkalmazzák, jelentős védelmet váltanak ki a HSV fertőzés ellen; a jelen találmány megalkotói továbbá felfedeztek immunológiailag jelentős olyan polipeptidet is, amelyek a HSV gD-ben jelenlevő folyamatos aminosavszekvencia másolatai vagy lényegében annak felelnek meg (WO 83/02897 közzétételi számú Nemzetközi Szabadalmi Bejelentés). A HSV gD—1 és gD—2 jellemzésére folyó kutatásban jelentős segítséget nyújtottak a rekombináns DNS technikák alkalmazása útján nyert eredmények, amely technikák a gD—1 és gD—2 polipeptid szekvenciák részét vagy egészét kódoló DNS szekvenciák mikrobiológiai gazdaszervezetekben (pl. baktériumokban, élesztőkben és emlős-sejt tenyészetekben) való klónozására és kifejeződésére vonatkoztak. A fehérjéket kódoló gének DNS szekvencia-elemzése ezek elsődleges szerkezeti elrendezésének (aminosav-szekven- 5 cia) előrejelzését eredményezték. Watson és munkatársai pl. [Science, 218, 318—384 (1982)] a gD—1-hez nyújtanak előrejelzett szekvenciát, beleértve egy „vezető“ területet, és egy olyan területet, amelyet „érett“ fe- 10 hérje területnek jelölnek. Hasonló rekombináns módszerek lehetővé tették a gD—2 szekvencia előrejelzését, és ennek összehasonlítását gD—1 -el. Watson egy másik ismertetése [Gene, 26, 307—312 (1983)] általános in- 15 formációt nyújt az „érett“ HSVgD—1 és gD—2 DNS szekvenciaelemzés alapján előrejelzett elsődleges szerkezeti elrendezése (aminosav-szekvencia ), összehasonlítására, ez az információ az alábbi I. Táblázatban 20 látható. Az említett Táblázatban és a továbbiak folyamán a következő egyes és hármas betű „kódok“-at alkalmazzuk az egyes aminosav-gyökök jelölésére: A = Alá = Alanin; C = 25 = Cys = Cisztein; D = Asp = aszparagín-sav; E = Glu = Glutaminsav; F = Phe = = Fenilalanin; G = Gly = glicin; H = His = = hisztídin; I = Ile == Izoleucin; K = Lys = = Fizin; L = Leu = Leucin; M = Met = Me- 30 tionin; N = Asn = Aszparagin; P = Pro = = Prolin; Q = Gin = Glutamin; R = Arg = = Arginin; S = Ser = Szerin; T = Thr = = Treonin; V = Val = Valin; W = Trp - = Triptofán; és Y = Tyr = Tirozin. 1. TÁBLÁZAT 1 gD—1 KYALADASLKMADPNRFRGKDLPVLDQLTDPPGVRRVYHI 40 gD—2-------------------P-----------------------N--------------------K----------gD—1 QAGLPDPFQPPSLPITVYYAVLERACRSVLLNAPSEAPQI 80 gD—2 —PS—E-----------1--------------------------H----------------------------gD— 1 VRGASEDVRKQPYNLTIAWFRMGGNCAIPITVMEYTECSY 120 gD—2-----------DEA---------HT--------------Y--------D--------------—P— gD—1 NKSLGACPIRTQPRWNYYDSFSAVSEDNLGFLMHAPAFET 160 gD—1 AGTYLRLVKINDWTEITQFILEHRAKGSCKYALPLRIPPS 200 gD—2-------------------------------------------RA--------------------------------A gD—1 ACLSPQAYQQGVTVDSIGMLPRFIPENQPTVAVYSLKIAG 240 gD —2--------TSK-----------------------------------------------------L---------------gD—1 WHGPKAPYTSTLLPPELSETPNATQPELAPEDPEDSALLE 280 gD—2-------------P---------------------— D—T-----------------V-------------gD—1 DPVGTVAPQIPPNWHIPSIQDAATPYHPPATPNNMGLIAG 320 gD—2-----A--------SS--------------V H—A----A—S—P--------1— 319 gD-«l AVGGSLLAALVICGIVYWMHRRTRKAPKRIRLHPIREDDQ 360 gD—2 —LA-----T-----------G-----AF—VR-----AOM-----L-----D-----A 359 gD—1 PSSHQPLFY 369 gD—2 —P------------368 2
