195245. lajstromszámú szabadalom • Eljárás és berendezés sejthalmazból meghatározott biológiai sejtek kiválasztására, a kiválasztott sejtek legalább egy tulajdonságának megfigyelésére
195245 az egyes sejtek egyedi teszteléséhez és/vagy vizsgálatához a szükséges feltételek megteremtése igen nagy jelentőségű a különböző biológiai feltételek, állapotok diagnosztizálása és egyéb felhasználások szempontjából. A nagyobb együttesből kiválasztott egyedi sejtek vizsgálata és tesztelése kiküszöböli azokat a hibákat, amelyek jelenleg számos diagnosztikai módszerre jellemzőek, mivel ezek eredményeit csak közelítőleg megbízható statisztikai kritériumok alapján értékelik. A találmány elé kitűzött feladatot a javaslat szerint olyan módszer kidolgozásával oldjuk meg, amely a következő lépések sorozatát tartalmazza: előre meghatározott tulajdonságú sejtek egy csoportjának kiválasztása sejtek nagyobb együtteséből, és minden egyes kiválasztott sejt megfogása egy jól meghatározott helyen. A találmány szerinti eljárásban a következő lépések közül egy vagy több alkalmazása igen előnyös lehetőségeket teremt: minden kiválasztott sejten egy meghatározott tesztvizsgálat elvégzése, majd ezt követően annak meghatározása, hogy a sejtek közül melyek mutatják a teszt eredményének elfogadott különleges tulajdonságot és így kiválasztott részcsoport meghatározása: minden sejt elhelyezkedésének rögzítése a részcsoportban; minden sejten egy vagy több tesztvizsgálat elvégzése és minden fesztvizsgálat befejezését követően minden egyes sejt tulajdonságainak ellenőrzése rögzített elhelyezkedésük szerint; a részcsoportba nem tartozó sejtek elválasztása. A jelen találmány szerint új berendezést is kidolgoztunk, amely sejtek befogadására alkalmas nyílások mátrixát tartalmazó hordozóeszközzel van ellátva, ahol a mátrixban minden nyílás elhelyezkedése, vagyis címe rögzített és ismeretes. A nyílások a hordozóeszköz fenékoldala és fedőoldala között meghatározott keresztmetszettel vannak kialakítva. Konfigurációjuk olyan, hogy amikor a sejtek egy nagyobb csoportja a hordozó fedőoldala fölé kerül, csak azok a sejtek választódnak ki és helyezkedhetnek el a nyílásokban, amelyek méretei egy meghatározott tartományba esnek. A kiválasztandó sejteknek megfelelő mérettartománynál kisebb sejtek a nyíláson átesnek, míg a nagyobbak nem tudnak abba belejutni. Ha a hordozóeszközt megfelelő anyaggal átmossuk, csak a kiválasztott sejtek jutnak be a nyílásokba mégpedig minden nyílásba, amelynek jól meghatározott helyzete a továbbiakban címként szerepel, egy-egy sejt kerül. A hordozóeszköz nyílásaiban elhelyezkedő sejteken ezt követően el lehet végezni a biológiai tesztvizsgálatokat és sejtről-sejtre meg lehet határozni a vizsgálat eredményeként 3 kialakult tulajdonságokat, amivel megállapítható, hogy mely sejtek tartoznak valamely olyan előre meghatározott részcsoportba, ahol egy-egy tulajdonság vagy egy-egy mérhető paraméter azonos. Miután a sejtek egy részcsoportját azonosítottuk, ebben a részcsoportban mindegyik sejt meghatározott címen érhető el és a részcsoportba tartozó összes sejt címe ismeretes. Bár egy adott minta összes sejtjén el lehet végezni egy vagy több tesztvizsgálatot, lehetséges a vizsgálat eredményét csak egy adott részcsoportra értékelni, ha a részcsoportba tartozó egyes sejtek már ismert sejtek címének megfelelően mérőeszközt vagy diagnosztikai készüléket alkalmazunk. A találmány szerinti eljárás és berendezés leglényegesebb kiviteli alakjait és jellemzőit a következő példák alapján ismertetjük részletesen, amikor is a csatolt rajzra hivatkozunk, ahol az IA. ábra a találmány szerinti berendezésben alkalmazott hordozóeszköz perspektivikus képe, az IB. ábra a hordozóeszköz nyílásaiban a sejtek elhelyezkedése, az IC. ábra a hordozóeszköz nyílásának keresztmetszete, a 2A. ábra olyan tartóeszköz vázlata, amelyben több hordozóeszköz helyezhető el számos vizsgálat egyidejű elvégzéséhez, a 2B. ábra a 2A. ábra szerinti tartóeszköz keresztmetszete, a 2C. ábra a 2A. ábra szerinti tartóeszköz felülnézete, a 2D. ábra a 2A. ábra szerinti tartóeszközben a sejtek elhelyezkedése címzés szerint, a 3A. ábra a 2A., 2D. ábrákon látható tartóeszköz keresztmetszetének kinagyított részlete, a 3B. ábra a 3A. ábra szerinti keresztmetszet egy részlete, a 4. ábra egy hordozóeszközön kialakított sejtpopuláció vizsgálatához sejtek egyedi letapogatására szolgáló optikai elemzőkészülék egy lehetséges kiviteli alakjában a sugármenetek vázlata, az 5. ábra az optikai elemzőkészülék egy másik előnyös kiviteli alakjának vázlata, a 6A. ábra a 2A....2D. ábrán bemutatott tartóeszköz egy előnyös kiviteli alakja perspektivikus nézetben, a 6B. ábra a 6A. ábra szerinti tartóeszkőzhöz kialakított mikroszkóp egy részlete keresztmetszetben, a 6C. ábra a 6A. ábra szerinti tartóeszköz A jelű részlete perspektivikus nézetben, részbeni kimetszéssel, a 7A. ábra elemzőrendszer fenékoldalán kialakított átfolyáskamra egy kiviteli alapjának keresztmetszete vizsgálat előtti állapotban, a 4 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 3
