195179. lajstromszámú szabadalom • Eljárás benzoesav-származékok és hatóanyagként e vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
195179 6 le, egy sav, például sósav, p-toluolszulfonsav, stb. jelenlétében, szobahőmérséklet körüli hőmérsékleten, 30 perc és 5 óra közötti reakcióidő alatt. Ha R5’ jelentése benzil-oxi-metil- vagy fenacilcsoport, a védőcsoportot katalitikus redukálással távolítjuk el, például palládiumkatalizátor jelenlétében, szobahőmérséklet körüli hőmérsékleten, a reakcióidő 1 —10 óra lehet. Ha R5’ jelentése terc-butilvagy tritil-csoport, a reakciót sav — például sósav, trifluor-ecetsav, hangyasav, p-toluolszulfonsav, stb. — jelenlétében játszatjuk le, jeges hűtés hőmérséklete és közel 50°C közötti hőmérsékleten, közel 1—5 óra alatt. A fenti eljárásokkal előállított (I) általános képletű vegyületeket a reakcióelegyből elválasztjuk, és ismert módon — például átkristályosítással, kromatográfiásan, stb. — tisztítjuk. A kiindulási vegyületek és végtermékek sói előnyösen a gyógyászatilag elfogadható sók, például alkálifémsók — így nátriumvagy káliumsók-, és a szerves vagy szervetlen savakkal — így hidrogén-kloriddal, kénsavval, foszforsavval, fumársavval, maleinsavval vagy oxálsavval — képzett sók. Az R2 helyén karboxilcsoportot tartalmazó (II) általános képletű kiindulási vegyületeket a 80 371 közzétételi számú európai szabadalmi leírásban ismertetett eljárással, vagy azzal analóg módon állíthatjuk elő. Azok az (I) általános képletű vegyületek, amelyek képletében R2 jelentése karboxilcsoport vagy (IX) általános képletű csoport — továbbiakban ezeket (L) általános képletű vegyületeknek nevezzük —, az anafilaxis lassan reagáló anyagát (SRS-A) jelentős mértékben antagonizálják, az SRS-A a hörgő- és egyéb simaizmok összehúzódását kiváltó kémiai mediátorok egy csoportját alkotja. Az SRS-A a szervezetben különféle ingerekre — például immunreakciók hatására — képződik, és a hörgőgörcs hatékony mediátorának tekintik azonnali allergia — például allergiás asztma — esetén.- Az SRS-A leukotrién C-ből (LTC), leukotrién D-ből (LTD), stb. áll, és ismert, hogy az LTD és LTC emberi hörgőizmokra kifejtett aktivitása közel azonos, és az LTD izomösszehúzó hatása nagyobb, mint az LTC-é, tengerimalac ileum esetén [S. E. Dahlen és munkatársai: Nature 288, 484 (1980); R. A. Lewis és munkatársai: Biochemical and Biophysical Research Communications 96, 271 (1980)]. A hatóanyagok SRS-A-t antagonizáló hatását tengerimalac ileumon lehet vizsgálni [R. A. Appleton és 5 munkatársai: Journal of Medical Chemistri 20, 371 (1977)], és mivel az SRS-A az LTC, LTD, stb. elegye, és ezek aránya bizonytalan, az antagonista hatás vizsgálatát célszerű szintetikus SRS-A-val végezni. Az (I) általános képletű vegyületek SPS-A-t antagonizáló hatását szintetikus LTD4-et használva végeztük, az alább ismertetett módon, és azt tapasztaltuk, hogy a szintetikus leukotrién D4 (LTD4) intravénás injektálásával kiváltott hörgőösszehúzódást tengerimalacban bizonyos (T) általános képletű vegyületek a kontroll A vegyülethez képest nagyobb mértékben gátolták, ha a fenti vegyületeket az L.TD4 adagolást megelőzően orálisan adtuk a tengerimalacoknak. Farmakológiai hatás vizsgálata 1) SRS-A-t antagonizáló hatás vizsgálata A vizsgálatot közel 400 g-os tengerimalacokon végezzük (Hartley-törzs, hím és nőstény vegyesen), az állatokat 6—10 tagú csoportokra osztjuk, és az LTD4-gyel kiváltott hörgőösszehúzódást Konzett-Rössler-módszerrel [Konzett H. és Rössler R.: Naunyn- Schmiedebergs Archiv für Experimentelle Pathologie und Pharmacologie 195, 71—74 (1940)]. A tengerimalacokat uretános altatás alatt (1,5 g/kg, intraperitoneálisan) hányát fekve rögzítjük, és a légcsövet bemetszszük, és mesterséges lélegeztető készülékkel kötjük össze (Rodent Respirator Model 680, Harvard Apparatus Company, Amerikai Egyesült Államok), kanül segítségével. A fenti légcső-kanülből elágazó csövet Bronchospasm Transducer-hez (Model 7020, Ugobasil Biological Research Apparatus, Olaszország) kötjük. 4—7 ml levegő/lélegzés, 70 légzés/ /perc és 10 cmHsO tüdőt terhelő nyomás mellett Rectigraph-8S-sel (San-ei Sokki Co. LTD., Japán) feljegyezzük az átáramló levegő térfogatát, transzduktor segítségével. 1 mg/kg intravénás gallamin-trietjodid beadása után 10 pg/kg dózisban fiziológiás sóoldatban oldott LTD4-et adagolunk intravénásán az állatba, és a kiváltott hörgőösszehúzódást 15 percen át feljegyezzük. A vizsgálandó vegyületeket 5 %-os gumiarábikumoldatban szuszpendálva, vagy vízben oldva orálisan adagoljuk, 0,2 ml/ÍOOg testtömeg dózistérfogatban, az LTD4 beadása előtt 1 órával. Az LTD4-et a nyaki vénába illesztett kanülön át adagoljuk, fiziológiás sóoldatban oldva, az oldatot —70 °C-on tárolt, 1 mg/ml koncentrációjú metanolos LTD4- törzsoldatból készítjük. Az eredményeket az 1. táblázatban ismertetjük 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 5
