195112. lajstromszámú szabadalom • Eljárás ondó termékenyítőképességének fokozására
195112 GABA bármiféle hatást gyakorolna a hasnyálmirigy működésére. Felismerésünk alapján tehát a találmány eljárás ondó termékenyítőképességének fokozására adalékanyagokkal való kezeléssel, amely abban áll, hogy adalékanyagként gamma-amino-vajsavat használunk. A találmány szerinti eljárás egy előnyös kiviteli módja szerint úgy járunk el, hogy a frissen nyert ejakulátumót 0,1±0,01 mM gamma-amino-vajsavat tartalmazó hígítóval 1:2 és 2:1 arány határérték között, előnyösen 1:1 arányban hígítjuk, majd felhasználás előtt 1±0,1 mM gamma-amino-vajsavat tartalmazó hígítóval ismét 1:2 és 2:1 közötti térfogatarányban hígítjuk. A hígítóban cukorként glükózt, laktózt, fruktózt, viszkozitásfokozóanyagként tojássárgáját, kazeint, antibiotikumként szemicillint, streptomycint, pufferanyagként trinátrium-citrátot, nátrium-hidrogén-karbonátot alkalmazunk. A találmány szerinti eljárás megvalósítását úgy is elvégezhetjük, hogy a már ismert hígítószerekből indulunk ki. A gyakorlatban általában az alábbi hfgítószereket alkalmazzák: 1. Kijevi hígító Tartalmaz 60,0 g d-glükóz-monohidrátot 3.7 g trinátrium-citrátot 3.7 g dinátrium-EDTA-t 1,2 g NaHC03-ot 1000 ml-re oldva desztillált vízben és a mikrobiológiai stabilitás biztosítására 500 000 NE penicillint és 500 mg streptomicint. A hígítóval 1:1 arányban hígítottuk a spermát és 15—20°C-on 2—4 napig tartható el a minta termékenyítésre alkalmas állapotban, vagyis ekkora a spermiumok motilitása a friss ejacuiatum negyedrésze alá csökken. 2. Szerdzsak-féie hígító összetétele: 50,0 g glükóz 3.0 g trinátrium-citrát 1.0 g etiléndiamin-tetraecetsav trinátrium só 50.0 ml tojássárgája 1000 ml-re oldva desztillált vízben 80 000 NE oxitetraciklin-t tartalmaz még a mikrobiológiai stabilitás biztosítására. Alkalmazható 1:2 és 1:7 térfogatarányok közötti hígításra. A hígított sperma lassan 5— 10°C közé hűtendő és ilyen körülmények között 3 napos eltartás lehetséges. 3. Beltshille-F 3 hígító összetétele: 40,0 g laktóz 20.0 g kazein 20.0 g TRIS (kémiai név: tris--hidroxi-aminometán) 10.0 g citromsav-monohidrát 5.0 g fruktóz 1000.0 ml-re oldva desztillált vízzel, mely 1 millió NE penicillint és 1 g streptomicint tartalmaz. 1:1 térfogatarányú hígí3 tás és 15°C-on történő eltartás esetén 3 napig használható maximálisan a hígítóval kezelt sperma. A példaként bemutatott három összetételből kitűnik, hogy a szintetikus hígítók valamilyen cukrot (glükóz, laktóz, fruktóz), citromsav-sókat, vagy más pufferelő anyagokat (NaHC03, TRIS) ezenkívül viszkozitás-fokozó anyagot (tojássárgája, kazein), valamint a mikrobiológiai stabilitást biztosító antibiotikumokat (penicillin, streptomicin) tartalmaznak. Nem tartalmaznak semmiféle olyan speciális adalék-anyagot, amely a spermiumok motilitását volna hivatott fokozni. A találmány szerinti eljárásban a fenti hígítókat GABA-val egészítjük ki. A frissen nyert ejaculátumot megfelelő GABA koncentrációt (0,1 ±0,01 mM) tartalmazó hígítóval 1:1 arányban hígítva, 24 órás eltartás után fokozott motilitás érhető el. Még sokkal kedvezőbbek az eredmények, ha a felhasználás előtt, a GABA tartalmú hígítóval eltartott spermát ismételten hígítjuk 1:1 térfogatarányban 1±0,1 mM GABA-t tartalmazó szintetikus spermahígítóval. Találmányunk szerinti eljárás előnyeit az alábbiakban foglaljuk össze: 1. Az eljárás révén biztosítható a sperma megbízható tartósítása, ami haszonállatok esetében rendkívül jelentős hasznot hozhat. A mesterséges insemináláshoz használt sperma ára rendkívül magas, tartós eltartása például sertésnél nem megoldott, ezért egy adott megtermékenyítő állomás, csak szűk körzet ellátását vállalhatja. Az eltarthatóság megnyújtása lehetőséget ad nagyobb mértékű centralizálásra. 2. Eljárásunk segítségével az ejakulátum még 24 órás eltartást követően is mutatja a teljes kezdeti motilitást. Ez lehetőséget nyújt a költséges sperma takarékos felhasználására. Hasonló körülmények között a GABA-t nem tartalmazó hígítóval csak 40%-a marad meg a kezdeti motilitásnak, vagyis 2,5-szer annyi sperma szükséges azonos termékenyítési eredményhez. Jelentős, hogy például a sertésnél a mesterséges megtermékenyítés és az ejaculátum nyerése között minimum 24 óra telik el a szállítás következtében. Ezalatt az idő alatt már a sperma 60%-ot veszít termékenyítő képességéből a hagyományos hígítók alkalmazásakor, eljárásunk segítségével a veszteség teljes mértékben elkerülhető. 3. Sokat fia 1 ló haszonállatoknál (sertés, nyúl) eljárásunk lehetőséget biztosíthat az alomszám növelésére is azáltal, hogy tartósan megőrzi a sperma megtermékenyítő képességét, növeli valamennyi pete megtermékenyülésének esélyét. 4. A human spermiumok motilitásának fokozása GABA-val lehetőséget kínál a mesterséges inseminálásra olyan férfi sterilitásában is, ahol a spermiumok csökkent motilitása miatt a természetes coitus út-4 3 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
