194273. lajstromszámú szabadalom • Eljárás tumorellenes vegyületek előállítására
1 2 8. összetétel Intravénás készítményt állítunk elő a következők szerint: 1 -(4-amino- 2-oxo-1 H-pirimidin-l-il)-2-dezoxi-2,2-difluor-ribóz 100 mg Izotóniás sóoldat 1000 ml A fentebbi alkotórész oldatát intravénásán alkalmazzuk 1 ml/perc beadási sebességgel az olyan emlősöknél, amelyek feltételezett valódi daganatok miatt ilyen kezelést szükségeinek. A találmány szerinti reprezentatív vegyületek hatását olyan sztenderd szűrési módszerekkel igazoltuk, amelyeket a szakemberek potenciális daganatellenes hatású vegyületek vizsgálatára használnak. Például ilyen szűrővizsgálati módszereket használtak a kereskedelemben kapható olyan rákgyógyszerek szűrésére, mint a Vinca alkaloidok. Lásd például Miller és munkatársai, J. Med. Chem. Vol. 20, 3, 409 (1977) és Sweeney és munkatársai, Cancer Research 38, 2886,(1978). A (II) általános képletü vegyületek citosztatíkus hatásúak, amennyiben gátolják a humán leukémiás sejtek (CCRF—CEM sejtsor) növekedését. Az I. Táblázat a (II) képlet szerinti néhány reprezentatív vegyület vizsgálatának eredményeit mutatja be. A táblázatban az 1. oszlopban a vegyület neve, a 2. oszlopban pedig az IC50 érték (az a koncentráció, amely 50%-os növekedésgátlást okoz) mcg/ml-ben, található. I. Táblázat Citotoxicitási vizsgálat A vegyület neve ICÍ0 mcg/ml 1 -(4-amino-2-oxo-1 H-pirimidin-1 -il)-2-dezoxi-2,2-difluor-ribóz 0,0039 1 -(4-amino-2-oxo-l H-pirimidin-1 -il)-2-dezoxi-2,2-difluor-ribóz 0,0057 0,0068 0,0260 0,3 1 -(2,4-díoxo-lH,3H-pirimidin-l -il)-2-dezoxi-2,2-dífluor-ribóz 5,4 l-(4-amino-5-metil-2-oxo-lH-pirimidin-l-il)-2-dezoxi-2,2-difluorribóz 0,3 béta-1 -(6-amino-9H-purin-9-il)-2- dezoxi-2,2-difluor-ribóz 0,5 alfa-1 -(6-amino-9H-purin-9-il)-2- dezoxi-2,2-difluor-ribóz 6,9 alfa-1 -(2-klór-6-amino-9H-purin-9- il)-2-dezoxi-2,2-difluor-ribóz >20,0 béta-l-(2-klór-6-amino-9H-purin-9-il)-2-dezoxi-2,2-difluor-ribóz 0,4 1 -(2,6-diamino-9H-purin-9-il-2- dezoxi-2,2-difluor-ribóz 0,075 1 -<2-amino-6 -oxo-1 H,9H-purin-9-il)-2-dezoxi-2,2-dif)uor-ribóz 0,10 1 -(2,6-dioxo-l H,3H,9H-purin-9-il)-2-dezoxi-2,2-difluor-ribóz 0,30 A (II) általános képlet szerinti vegyületek azon képességének, hogy velük' emlősök feltételezetten valódi daganatait kezeljék, az 1. példa szerinti 1<4- amino-2-oxo-l H-pirimidin-1 -il)-2-dezoxi-2,2-difluorribózt, az 5. példa szerinti l{4-amino-2-oxo-lH-pirimidin-l-il)-2-dezoxi-2,2-difluor-xilözt, valamint a 6. példa szerinti l-(6-amino-9H-purin-9-il)-2-dezoxi-2,2- difluor-ribózt olyan állatokon vizsgáltuk, amelyeken az L1210V limfoid leukémiát képviselő tumor rendszer fejlődik ki. E vegyületek hatékonyságának vizsgálatát az L 1210V leukémia ellen 1 x 106 sejt intraperitoneális befecskendezésével kezdtük. A kezelés a beoltás után 24 órával kezdődött. A kezelésre való reagálást úgy határoztuk meg, hogy tíz kezelt állat közepes túlélési időtartamát tíz kontroll állatéhoz viszonyítottuk; a kezelt állatok élettartamának a kontroll élettartamát meghaladó növekedését százalékban adja olyan egereken, amelyek e tumorral voltak fertőzve. A táblázatban az 1. oszlopban adjuk meg a vizsgált vegyület előállítási példájának számát; a 2. oszlopban a kísérletek számát; a 3. oszlopban a vegyület dózisának szintjét meg/kg-ban; a 4. oszlopban az alkalmazás módját; az 5. oszlopban az adagolás időprogramját, azaz a napokat, amelyeken az egér a vegyületet kapta; a 6. oszlopban a kezelt egerek élettartamának átlagos növekedését a kontrolihoz viszonyítva; a 7. oszlopban az összes egérhez képest a toxikus halálozást minden csoportban; a 8. oszlopban pedig a határtalan túlélők számát, azaz amelyek 45 napon túl éltek, minden csoportban. 194.273 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 10
