194162. lajstromszámú szabadalom • Eljárás kolekalciferol származékok előállítására
1 194 162 2 *) ■ A hordozókoncentráció az összes teszt-tenyészetben 0,1 térfogat/lérfogat % etanol; b) * A sejtek életképessége minden tenyészetben 95% feletti érték. A kiindulási koncentráció az összes tenyészetben 2x10 * HL-60-sejt/ml. A fenti adatok azt mutatják, hogy a A33-és A - vegyületek az emberi promielocisztikus tumorsejtek burjánzását in vitro gátolják és ugyanakkor a sejtekre nem toxikusak, Ezenkívül a fenti vegyületek kis koncentrációjú (0,3 -10 x 10~® mólos) jelenlétében tenyészthető sejtek érettebb sejttípussá differenciálhatók, ami az enzim-aktivitás és sejtfunkció kifejlődésében nyilvánul meg. A A33- és A3 3-vegyületek várhatóan olyan betegségek kezelésére alkalmazhatók, amelyeket részben a rendellenes sejtburjánzás és/vagy -differenciálódás idéz elő (pl. neopláziás betegségek). A A- és A3 3-vegyületek kb. 0,10 3,0 jug/nap - előnyösen 0,25 2,0 /zg/nap - dózisban alkalmazhatók betegségek (pl. oszteoporózis, oszteodisztrófia, szteroidok által indukált oszteopénia, hipoparatirodizmus, hipofoszfatámiás rachitis és szubnormális endogén-termeit la,25-dihidroxi-kolekalciferol-szintte! jellemzett hipofoszfatámiás oszteomalázia) kezelésére. A A33- és A33-vegyületeket a fenti dózis-tartományban burjánzásos betegségek (pl. leukémia) kezelésére is felhasználhatjuk. A A23 - és A33-vegyületeket orálisan (pl. tabletta, kapszula vagy elixir) vagy steril oldatok vagy szuszpenziók alakjában szubkután úton, intramuszkulárisan, intravénásán, íntraperitoneálisan vagy helyi ütőn alkalmazhatjuk. Az egyszeri dózis kb. 0,10-3,0 /jg -előnyösen 6,25 2,0 jjg - A23- vagy A23vegyuietét tartalmazhat, gyógyászatiig alkalmas hordozóanyagokkal, vivőanyagokkal, konzerváló-, stabilizálószerekkel, kötőanyagokkal (pl. tragantgumi), excipiensekkel (pl. kalcium-foszfát), szétesést elősegítő anyagokkal (pl. kukoricakeményítő), síkosítóanyagokkal (pl. magnézium-sztearát) édesítőanyagokkal (pl. szacharóz), ízesítőszerekkel (pl. borsmenta) öszszekeverve. A gyógyászati készítmények más anyagokat is tartalmazhatnak — pl. bevonatanyagokat (pl, sellah) - a kikészítési egységek külső megjelenési formájának módosítása céljából. A A - és A23-vegyületeket továbbá tejelő kérődzőknek a tejláz kezelése céljából 100-1500 pg/nap — előnyösen 200 1000 jug/nap — dózisban adhatjuk be szokásos készítmények formájában. így pl. injekciós és/vagy helyi kezelésre alkalmas steril készítményeket olymódon állíthatunk elő, hogy a A33-és/vagy A33-vegyületet hordozóanyagban (pl. 10-20%-os vagy 80 95%-os etanol vagy propilén-glikol/víz elegyben), természetesen növényi olajban (pl. szezámolajban) vagy szintetikus zsírszerű növényi olajban (pl. etil-oleát) oldjuk vagy szuszpendáljuk. A A23- vagy A2 3-vegyületek továbbá 100-1500 f/g mennyiségben zsírsavpasztilla alakjában orálisan is adagolhatók. Eljárásunk további részletei az alábbi példákban ismertetjük análkül, hogy találmányunkat a példákra korlátoznánk. í. példa a) 2,9 g (8,22 mól) [lR(10/aSx,/3Sx/3aa,40„ 7aß)]7a dimetil-4-[l,l-dimetil-etil/-dimetil-szililojcij-a-etenil-oktahidro-lH-indén-l-etanol 100 ml vízmentes éterrel képezett oldatát 0 DC-ra hűtjük, majd argon-atmoszférában 2,76 ml (37,84 millimól) tionil-kloridot és utána 0,276 ml piridínt csepegtetünk hozzá. A reakcióelegyet 2 órán át 0 °C-on keverjük, majd 50 ml 2 n nátrium-kálium-tartarát-oldatot tdunk hozzá. Az éteres fázist elválasztjuk és a vizes réteget etil-acetáttal extraháljuk. Az egyesített szerves fázisokat 1 n sósavval, vízzel, 2 n kálium-hidrogén-karbonát-oldattal és sós vízzel mossuk, szárítjuk és bepároljuk. Az oldószert vákuumban bepároljuk és a maradékot szilikagélen történő kromatografálással és hexán/etil-acetát eleggyel végzett eluálással tisztítjuk. 2,9 g tiszta [lR-(lß/Rx/-3aa,4ß, 7a0)]-l-/4-klór-l-metil-2-butenil/--4-[/I,l-dimetil-etil/-dimetil-szililoxi]-7a-metil-oktahidro-lH-indént kapunk, alacsony olvadáspontú szilárd anyag alakjában. Kitermelés: 95%. b) 2,9 g (7,81 millimól), az a) bekezdés szerint előállított allil-szerkezetű klorid és 130 ml hexametílfoszforsavtriamid oldatához 10,1 g (61,52 millimól) benzol-szulfinsav-nátriumsót adunk, majd a reakcióelegyet argon-atmoszférában szobahőmérsékleten 24 órán át keverjük. Ezután 130 ml jegesvizet adunk hozzá és 30 perces keverés után etil-acetáttal extraháljuk. Az egyesített extraktumokat vízzel mossuk, szárítjuk és szárazra pároljuk. A maradékot szilikagélen történő kromatografálással és hexán/etil-acetát eleggyel végzett eluálással tisztítjuk. 3,5 g [1R-( lß/Rx/-3aa,4ß,7aß)]-1 -[/4-fenil-szulfonil/-l -metil-2- -butenil]-4-{/l,l-dimetil-etil/-dimeti1-szililoxi]7a-metil-oktahidro-lll-indént kapunk, alacsony olvadáspontú szilárd anyag alakjában. Kitermelés: 94%. c) 0,628 ml (4,48 millimól) diizopropil-amin 10 ml vízmentes tetrahidrofuránnal képezett oldatát 0 °C-ra hűtjük és argon-atmoszférában 2,70 ml (4,32 millimól) 1,6 mólos hexános n-butil-litium-oldatot csepegtetünk hozzá. Az elegyet 15 percen át 0 °C-on keverjük, majd a kapott oldatot -78 °C-ra hű tjük és 17 ml vízmenetes tetrahidrofuránnal hígítjuk. Ezután 1,25 g (2,62 millimól), az lb) példa szerint előállított szulfon 16 ml tetrahidrofuránnal képezett oldatát csepegtetjük hozzá és a reakcióelegyet 30 percen^át -78 °C-on keverjük. Az oldaton a sárga szín eltűnéséig hexafluor-acetont fuvatunk keresztül. A reakcióelegyet 5 percen át keverjük, majd 2 n nátrium-kálium-tartarát-oldat és 2 n kálium-hidrogén-karbonát-oldat 1:1 arányú elegyének hozzáadásával (30 ml) lehűtjük, utána szobahőmérsékletre hagyjuk felmelegedni és metilén-kloriddal extraháljuk. A szerves extraktumokat sós vízzel mossuk, szárítjuk és szárazra pároljuk. A maradékot szilikagélen történő kromatografálással és hexán/etil-acetát eleggyel végzett eluálással tisztijük. 1,23 g [lR-(lß/Rx/,3aor,4ß,7aß)]-l-/6,6,6-trifluor-5-hidroxi-5-triluormetil-4-fenilszulfonil-l-metil-2-hexeni!/-4-[/l,l-dimetil-etil/-dimetil-szililoxi]-7a-metil-oktahidro-lH-indént kapunk, színtelen olaj alakjában. Kitermelés: 72%. d) 1,23 g (1,91 millirinól), az le) példa szerint előállított szulfon (epimer keverék alakjában) 40 ml metanollal és 40 ml tetrahidrofuránnal képzett oldatához előbb 23 g dikálium-hidrogén-foszfátot, majd -20 °C-ra való hűtés után 24 g 6%-os nátrium-amalgámot adunk. A kapott elegyet 15 percen át keverjük, majd 60 ml sós vizet adunk hozzá. A szobahőmérsékletre felmelegedett elegyet etil-acetáttal extra. háljuk. A szerves extraktumokat sósvízzel mossuk, szárítjuk és szárazra pároljuk. A maradékot , szilikagélen történő kromatografálással és hexán/etil-acetát eleggyel végzett eluálással tisztítjuk. A terméket 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 5
