194021. lajstromszámú szabadalom • Hatóanyagként 4-hidroxi -kumarin származékokat tartlmazó rodenticid készítmények és eljárás a hatóanyagok előállítására
1 194.021 2 A találmány körén kívül eső vegyületek vizsgálatával nyert összehasonlító adatok fontosak, mert alátámasztják jolyan, jellemző sajátságokra vonatkozó választásainkat, melyek behatárolják a találmány szerinti 4-hidroxi-kuinarin származékok területét. E szempontból különösen említésre méltók az la Tábláziban felsorolt (III) képletű vegyületek. la. Táblázat (111) képletű vegyületek A vegyület sorszáma R4 4 3cianofenil-(transz) 14 4-(benziI-oxi)-fenil-26 2,6-diklór-fenil-27 4’-(trifluor-metil)-bifenil-2-il-28 1,2,3,4-tetrahidro-7-naftil-29 3-fenil-l-propil-30 n-hexil-A 14 sorszámú vegyület váratlan vizsgálati eredményeket adott, mert hatékonysága sokkal csekélyebb volt, mint a hasonló szerkezetű difenacoum hatása, mely szintén nem tartalmaz para-helyzetű, eletronvonzó csoportot. Ennek oka feltehetően biológiai természetű, mivel azonban a 14 sorszámú vegyületre találmányunk nem vonatkozik, ebben az irányban feleslegesnek ítéljük a további kutatást. A vizsgálatok világosan mutatják a következő tényezők előnyeit: a tetralingyűrű 3-helyeztű R4 szubsztituensében olyan, terminális állású para-helyettesítő jelenléte, amely „lágy” elektronszívó atom vagy csoport, például trifluor-metil-csoport, olyan R4 szubsztituens jelenléte, mely két egymással para-helyzetben, előnyösen egy lineáris, alifás lánc közvetítésével kapcsolódó feniléncsoportot tartalmaz; továbbá a nagy térkitöltés hiánya az R4 szubsztituensben, amelyet orto- vagy meta-helyeztű szubsztituensek és/vagy az említett alifás lánc nem-lineáris szerkezete idézne elő. (Jelenleg úgy gondoljuk, hogy a hatás szempontjából a térbeli terjedelemnek csak egy olyan csekély növekvése megengedhető, amelyet egy kis kiterjedésű, például metilcsoport, vagy kis térfogatú, a láncon elhelyezkedő szubsztituens, vagy — mint a 16 sorszámú vegyületben - egy kis kiterjedésű, terminális meta-szubsztituens okoz.) I. hatástani vizsgálat Az alábbi 11. Táblázat bemutatja a találmány szerinti vegyületek vizsgálata során kapott olyan adatokat, amelyeket — az összehasonlító adatokkal együtt - a következő módon határoztunk meg. Előzetes vizsgálatot végeztünk abból a célból, hogy az antikoaguláns hatás erőssége szerint megbízhatóan rangsoroljuk a feltételezhetően reodentidd hatású vegyületeket. E óéira a protrombin-idő mérését alkalmaztuk. (A protrombin-idő a vér alvadási sajátságainak a mértéke) E módszer alapja AJ. Quick és munkatársai közleménye: (rA véralvadás vérzékenység és sárgaság során mutatkozó hiányának vizsgálata” (Amer. J. Med. Science 190,501 (1935). A vegyületeícet trietianol-amin és polietilénglikol 1:9 térf./térf. arányú elegyében oldottuk és sorozathigitással készítettük el az 1 ml/I kg-testsúlyra vonatkozó, megfelelő dózisokat. E dózisokat intraperitoneá- Bsan adagoltuk a vizsgálati állatoknak, befecskendezés után három nappal sziv-puntura útján vért vettünk miközben a vizsgálati állatokat (200-250 g testsúlyú, hím Wistar patkányok) halothannal altattuk. Egy adott vegyület minden egyes próbájához három patkányt használtunk és minden egyes vérmintán három prtrombin-idő meghatározást végeztünk. A protrombin-időket Quick módosított, egylépéses módszerével mértük. A protronibin-idő százalékos meghosszabbodását úgy állapítottuk meg, hogy 0% meghosszabbodásnak tekintettük a 12 másodperdg tartó nyugalmi protrombin-időt és önkényesen 100%os meghosszabbodásnak tekintettük, ha a protrombin-idő 212 másodpercre növekedett. Az eredményeket egy logaritmus-valószínűség grafikonra vittük fel, és az ED50 protrombin-időt a grafikonról olvastuk le. A vegyületek egy részének LD50 értékeit is meghatároztuk: ezek az adatok szintén a II. Táblázatban találhatók. A hím Wistar patkányokon hagyományos módon határoztuk meg az LDS0 értékeket úgy, hogy a kísérleti állatoknak szájon keresztül a vegyületek különböző dózisait adtuk és utána regressziós analízis segítségével számítottuk ki az 50%-os pusztulást okozó dózist. (Biometrics: 12 311—322). II. Táblázat A vegyület sorszáma ED50 mg/kg három nappal a befecskendőzés után) LD50 1 0,45 0,68 2 0,31 0,68 3 0,59 0,68 5 0,71 . — 6 1,80 — 7 0,54 6,8 8 0,78 — 9 0,80 — 10 0,41 1,00 11 0,27 1,00 12 0,80 — 13 0,32 0,46 15 0,47 16 0,43 17 0,37 0,82 18 0,27 0,68 19 0,90 — 20 0,23 0,32 21 0,80 — 22 0,80 — 23 0,23 24 0,47 — 25 0,46 — 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 6
