193992. lajstromszámú szabadalom • Eljárás helyettesített 3,4-diamino-1,2,5-tiadiazol-származékok és ilyen hatóanyagot tartalmazó gyogyászati készítmények előállítására
193992 Az érzéstelenítést 25—30 mg/kg i.v. 5-eti 1 -5- ( 1 - metií-butiI) -2-tio-barbitursav-nátriumsóval (Sodium Pentothal, Abbott) vezettük be és metoxi-fluránnal (1,1 -difluor- 2,2-diklór-etil-metil-éter; Pit man-Moore) tartottuk fenn tovább. A kardnyúlványtól a köldökig terjedő középvonali linea alba bemetszéssel biztosítottuk a gyomor jó hozzáférhetőségét és a könnyű zárást. A gyomrot előrehúztuk, a nagygörbületet több ponton kifeszítettük és csiptetőket helyeztünk el a választott bemetszési vonal mentén. A gyomor főrészéből olyan módon képeztünk tasakot, hogy igazi falisejt-gyomornedvet kapjunk. A gyomor főrészének kb. 30%-át reszekáltuk. A kanült könnyű, biológiailag ismert anyagból, mint nejlonból „Delrin“-ből vagy sebészeti rozsdamentes acélból készítettük. DeVits és Harkins [J. Appl. Physiol., 14, 138 (1959)] szerinti méretekben és bekötésekkel. A műtét után a kutyákat antibiotikummal és fájdalomcsillapító szerrel kezeltük és 2-3 hónapig gyógyulni hagytuk őket. Ezután a következő módon végeztük a kísérleteket: A kutyákat minden egyes kísérlet előtt éjjelen át (18 óra hosszat) koplaltattuk, korlátozás nélkül ivóvíz-ellátással. Ezután felkötő-hevederbe helyeztük az állatokat és a saphena vénába kanült vezettünk be a vizsgálandó szerek beadása céljából. Egy Harvard-féle infúziós szivattyú segítségével 100 pg/kg/óra hisztamin-bázist és 0,25mg/ /kg/óra klórfeniramin-maleátot — 1 - (p-klór- fenil) -1 - (2-pi rid il) -3- ( dimetil-amino) -propán-maleátot — adtunk be az állatoknak folytonos infúzió útján, 6 ml/óra térfogatban. Az infúziót 90 percig folytattuk, hogy a kutyák a gyomorsav-kiválasztás szempontjából állandó állapotba kerüljenek. Ezután a vizsgálandó vegyületet vagy (a kontroll-állatoknál) közönséges sóoldatot adtunk be, a szekretagóg (kiválasztást ingerlő) szerrel egyidejűleg, 0,5 ml/kg térfogatban, 30 másodperc alatt. A szekretagóg szer infúzióját ezután folytattuk és 4,5 óra hosszat 15 percenként gyomornedvmintákat vettünk. Minden egyes minta térfogatát 0,5 ml pontossággal mértük, a titrálható aciditást pedig 1 ml mintának 0,2 n nátrium-hidroxid-otdattal 7,0 pH-értékre történő titrálásával határoztuk meg, teljesen automatikus „Metrohm“ titrálókészü lék segítségével. A titrálható savkiválasztást mikroekvivalensekben számítottuk ki, a milliliterben számított térfogatnak a mikroekvivalens/ml-ben számított savkoncentrációval való szorzása útján. A vizsgálandó vegyület intravénás beadása után kapott aktivitás-csúcsértékeket a kontrolihoz viszonyított %-os inhibició-értékben fejeztük ki. Az adag/reakció görbéket legalább három adag-szint alkalmazásával szerkesztettük meg, mindegyik adag-szinten legalább három kutyával kapott 9 6 e-edmény alapján. Az EDSo-értékeket, a hatásossági arányokat és (zárójelben megadva) a 95%-os konfidencia-limiteket D-. J. Finney („ Probit Analysis“ 3. kiadás, University Press, Chambridge, Anglia, 1971., 4. fejezet) módszere szerinti probit-analízis útján határoztuk meg. A kapott eredményeket az alábbi 2. táblázatban foglaltuk össze. 2. táblázat Gyomorsav-kiválasztás elleni aktivitás, hisztaminnal stimulált Heidenhain-kutyakon 10 Vegyület ED so i.v. x/ /jjmól/kg/ Viszonylagos hatékonyság /cimetidin= = 1,0/ cimetidin -, 1 a leírás peldaja szerinti vegyü-2,6 /2,0-3,5/ 1,0 let 0,082 /0,055- 0,12/ 32 X / / ED5o=az az intravénás adag, amely az aktivitás-csúcsérték idején, vagyis 30 perccel az adag beadása után, 50%-os inhibiciót okoz. A 2. táblázatban bemutatott eredmények mellett, a példa szerinti vegyület gyomorsav-kiválasztási aktivitása a kísérletben alkalmazott intravénás beadás esetén, kutyán, a cimetidinhez viszonyítva időben huzamosabban tartó hatást mutat. A találmány szerinti új vegyületek előállítási eljárását közelebbről az alábbi példa szemlélteti, megjegyzendő azonban, hogy a találmány köre semmilyen szempontból sincs e konkrét példa tartalmára korlátozva A példában megadott hőmérséklet-értékek mindenkor Celsius-fokokban értendők. Példa 3-Amino-4-|2- [ (2-guanidino-tiazol-4-il) --metil-tio]-etil-amino}-l,2,5-tíadiazol--ciklohexil-szulfamátsó A) N-{2- [(2-Guanidino-tiazol-4-i!)-metil-tio] -étil)-etán-diimid-diamid-trihidroklorid 5,25 g (13,7 mmól) 3-amino-4-{2-[ (2-guani(fino-tiazol-4-il) - metil-tio] -etil-amino)-1,2,5-tiadiazol-l-oxid — amelyet a 2 067 987 sz. közzétett nagy-britanniai szabadalmi bejelentés leírása szerint állítottunk elő — 105 ml metanollal készített szuszpenziójához 80 ml tömény sósavat adunk, amikor is azonnal sárga oldatot kapunk. Ezt az oldatot szobahőmérsékleten 4,25 óra hosszat kever5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
