193928. lajstromszámú szabadalom • Eljárás bbm-1675 jelű daganatellenes hatású antibiotikumok és ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
193928 vegyületben található exometiléncsoport hiánya volt megállapítható. Ezen túlmenőleg az' -OCH3 csoportok egyike magasabb szinten (delta: 3,50 ppm) jelentkezik az (V) vegyületben. Ezek az eredmények egy 5 19 OCH3 csoport jelenlétét jelzik a (II) vegyületben, amely hidrogénezés során 10 OCH3 csoporttá redukálódott az (V) vegyületben. A (II) vegyületet 1,5 n metanolos sósav oldat- 15 tál 80°C-on 3 órán át melegítve, és a hidrolizátumot szilikagél oszlopon kromatografálva enyhén bázikus terméket nyerünk (VI) vegyület, M+: m/z 211 ). Az IR-spektrum és a fiziko-kémiai tulajdonságok azt mutatták, hogy a 20 (VI) vegyület egy NH2-csoportot tartalmaz. A (VI) vegyület összehasonlító IR és NMR vizsgálatokkal, amelyek egy hiteles mintával történtek, metil-4,5-dimetoxi-antranilátként volt azonosítható. Mindezekből eredően a (II)- 25-(VI) vegyületek szerkezetét az 1. képletsorban bemutatottak szerint határoztuk meg. Az (I) vegyület 0,05 n KOH-CH3OH oldattal 55°C-on kezelve egy új kromofor részre (VII) vegyület, Cl5H2lN07, M+: m/z 327) és 30 egy cukorra ((VIII) vegyület) hasad. A (VII) vegyület NMR spektrumában egy C-CH3 szinglet és két -OCH3 csoport (magas fekvésű) lelhető fel két alacsony fekvésű OCH3 csoport és két olyan aromás proton mellett, amelye- 35 két általában a (II), (V) és (VI) vegyületeknél figyelhetünk meg. A (VII) vegyület további hidrolízise 1,5 n metanolos sósav oldattal a (VI) vegyületet eredményezte, amely azonos volt azzal, amelyet korábban a (II) 40 vegyületből nyertünk. A (VI) vegyület eltávolítása után a hidrolizátumot 2,4-dinitro-fenil-hidrazinnal kezeltük, amelytől sárga szilárd anyag csapódott ki, amely a piroszőlősav 2,4-dinitro-fenil-hidrazonjaként volt azonosít- 45 ható. Ezek szerint a (VII) vegyület metil-4,5- -dimetoxi-N-(2’2’-dimetoxi-propionil) -antranilát. A (VIII) vegyület nem mutatott molekulaion csúcsot, de a tömegspektrumában m/z 131- nél megjelent az M-OCH3 csúcs jó egyezésben a C7Hi4Ó4 összegképlettel. Az NMR-spektrum azt mutatta, hogy a (Vili) vegyület 2,6-didezoxi-hexopiranóz szerkezetű. A feltételezést az (I) vegyület l3C mágneses rezonancia spektruma is alátámasztotta, amelyben egy -Ó-CH3 csoport, egy -CH2- csoport, három -O-CHCcsoport és egy anomer szénatom van azon a 15 szén szignálon kívül, amelyek a (VII) vegyületnek tulajdoníthatók. A cukor C3 protonja alacsony szinten (delta: 5,39 ppm, oktett) jelent meg felfedve azt, hogy a cukor Q-OH csoportja a (VII) vegyület karboxil-csoportjával van észterezve. Fentebbieket a 2. képletsor szemlélteti. Az (I) vegyület molekulasúlya (457) a teljes BBM-1675 Aj molekula egyharmadának felel meg (javasolt összegképlet C57H72N4032; kalcinált molekulasúly: 1324). A BBM-1675 A, feltételezett részleges szerkezetét az (la) képlet szemlélteti. A 495,231 sz. USA törzsbejelentésünk benyújtását követően azt találtuk, hogy a fentebb leírt BBM-1675 A, és A2 komponensek a 2. példa szerint előállítva valójában nem teljesen tiszták, és e vegyületek meghatározására alkalmazott némely jellemző adat pontatlan. Olyan pótlólagos kromatográfiás tisztítási eljárások segítségével, amelyeket részletesebben a későbbi 3. és 6. példában írunk le, sikerült a BBM-1675 A, és A2 vegyületeket tisztább alakban előállítani, és az alábbiak szerint leírtán tökéletesen jellemezni. Ugyancsak felülvizsgáltuk az A3 és A4 komponensek elemi összetételi adatait, ami e vegyületekben kén jelenlétét is mutatta, és e két komponensre a magasnyomású folyadékkromatográfia retenciós értékeit is meghatároztuk. A BBM-1675 komponensek felülvizsgált fiziko-kémiai tulajdonságai az alábbiak. BBM-1675 A, Leírás: fehértől világos sárgáig terjedő színű kristályok; olvadáspont: 156—158°C. 20 Elemi analízis: 1. Analízis C: 51,60% R: 6,31% N: 5,31% S: 8,47% 0.(különbség): 28,31% 2. Analízis C: 52,74% H: 5,99% N: 3,94% S: 9,71% 0 (különbség): 27,62% Átlag C: 52,17% H: 6,15% N: 4,63% S: 9,09% 0 (különbség): 27,96%.
