193797. lajstromszámú szabadalom • Eljárás és készülék entomofág fonálféreg tenyésztésére, valamint eljárás fonálféreg lárvát tartalmazó inszekticid növényvédőszer előállítására
193797 A fonálféreg in vivo módszerrel való előállítása (Poinar: Ann. Rev. Ent. 17, 1972, p. 103-122) negyedik stádiumú Galleria mallonella viszamoly lárváknak nedves szűrőpapíron, faforgácson, tőzegen, ill. perliteh stb. való fertőzéséből — amelynél a nematoda: rovar arány 10:1 — 100:1 — majd érlelés után a rovarlárva kadáverek feltárásából, szűréses és ülepítéses tisztításából áll. Végül mesterséges táptalajon is tenyésztettek Neoaplectanát, előbb hdskivonattal átitatott agarlemezen, majd burgonyatartalmú médiumon, Petri-csészében, 12 000 db/cm2 mennyiségben (McCoy és Glaser: N.J.Dept. Agric. Cir., 265, p. 1-10.). A találmány célja a nematodák tenyésztésére olcsó, egyszerű, beruházást gyakorlatilag nem igénylő és nagy termelékenységű módszer kidolgozása. A találmány azon a felismerésen alapul, hogy a Diptera légylárváknak a bábozódás előtti, föld felé irányuló vándorlása felhasználható arra, hogy abban a közegben, amelybe a légylárvák vándorlásuk során befúrják magukat, a légylárvákat megfertőzzük, ha ezt a közeget előzőleg infektív fonálféreg lárvákkal telítjük. A légylárvák alkalmazása azzal az előnnyel jár, hogy ezek — a lepkefélékkel, pl. a viaszmollyal ellentétben — nem szövik körül magukat s ezért a fonálférget tartalmazó légylárva kádeverek, akár az ezeket befogadó közeggel együtt közvetlenül, akár egyszerű fizikai módszerekkel, mint pl. szitálássál, flotálással kinyerve felhasználhatók. A légylárvák alkalmazásának további előnye, hogy mind a neoaplectanid, mint a mermithid nematodák kitenyésztésére egyaránt alkalmas. Felismertük továbbá, hogy a rovarkártevők kipusztítása után táplálék hiányában maga a fonálféreg is kipusztul. Ezért a biológiai egyensúly felborulásától nem kell tartani, ez csupán helyi és időleges annál is inkább, mert ezek a fonálféreg fajok őshonosak és természetes alkotói a talajfaunának Európában, Észak-Amerikában és Ausztráliában egyaránt. Ez a magyarázata annak, hogy az USA igen szigorú környezetvédelmi hivatala (EPA) engedélyezi fonálféreg fajok mezőgazdasági alkalmazását anélkül, hogy a növényvédőszerekkel kapcsolatban egyébként kötelező — többmillió dollár költségű — ártalmassági vizsgálatok elvégzéséhez ragaszkodna. Felismertük, hogy a légylárvák fertőzöttségének foka a legyek pozitív fototropizmusának felhasználásával ellenőrizhető: a fertőzött légylárvákból esetleg kikelt legyek fénycsapdával összegyűjthetők és megszámlálhatok. Felismertük végül, hogy az eljárás olyan készülékben üzemesíthető, amelynek egymás alatt elhelyezkedő két szintje közül a felső szint szolgál a légylárva tenyésztésére szolgáló táptalaj elhelyezésére, míg az alsó szint azt a közeget tartalmazza, amelybe a légylárvák lefelé vándorolva befúrják magukat és amely fertőzve van a fonálféreggel. Az alsó 3 3 szint kialakítható szállítószalagként, miáltal a fonálféreg kitenyésztése folyamatossá tehető. A találmány szerinti eljárás lényege tehát, hogy táptalajt Diptera légylárvákkal, ezt megelőzően pedig szükség szerint Xenorhabdis ssp. szimbionta baktériummal oltunk be. A táptalaj alatti szinten infektív nematoda fonálféreg lárvákkal telített közeget helyezünk el. Ennek a légylárvákkal való telítődése, a légylárvák megfertőződése, a fertőzőttségi fok ellenőrzése és a légylárvák elpusztulása után az infektív fonálféreg lárvákat tartalmazó légylárva tetemeket a közegtől ismert módon elválasztjuk. A légylárvák fertőzöttségi fokát a kikelt legyek fénycsapdában való összegyűjtésével és számlálásával ellenőrizzük. A találmány szerinti készülék lényege, hogy perforált tálcatartóján a légylárvák táptalaját tartalmazó tálcák és a tálcatartó alatt infektív fonálféreg lárvákkal fertőzött közeget tartalmazó közegtartó van. A közegtartó lehet végtelenített szállítószalag. Inszekticid talajjavító szert olymódon állítunk elő, hogy fonálféreg lárvákat tartalmazó légylárva tetemeket 30-120-szoros mennyiségű tőzeggel keverünk össze. Insze'kticid permetezőszer előállításához 0,1% olajtartalmú vizes emulzióba literenként 1,5-3 ezer db fonálféreg lárvát keverünk. A találmány szerinti eljárás példaképpeni foganatosítási módját a készülék példaképpeni kiviteli alakjainak működésével kapcsolatban ismertetjük a Neoaplectana fonálféregnek Diptera lárvákon való szaporítására vonatkozólag. A mellékelt rajzon: az 1. ábra a szakaszos működésű készülék függőleges metszetét, a 2. ábra az előbbi készülék felülnézetét nyitott fedőlappal a 3. ábra a folyamatos működésű készülék függőleges metszetét ábrázolja. Neoaplectana bibionis fonálférget szaporítunk a Diptera fajhoz tartozó Sarcophaga bullata húslégy lárváiban. Ehhez önmagában ismert módon, zárt ciklusú húslégy törzstenyészetet tartunk fenn, amely a tenyészállomány fenntartását szolgálja. A tenyészállományból nyert légylárva, nyű ivadékot a találmány szerinti készülékben neveljük tovább. A találmány szerinti 1 készülék (1., 2 ábra) felül a nyitható 2 fedőlappal van lezárva, míg alul a tölcsér alakú 3 feneke van; a 3 fenék rézsűszöge legalább 45°. Az 1 készülékben helyezkedik el a 4 tálcatartó, amely előnyösen 2,5-3 mm nyílású szitaszövet, Haneman rács, vagy perforált lemez. A 3 fenék alsó nyílását az 5 közegtartó zárja le. Az 5 közegtartó lehet tálca vagy egyéb tartály. A 4 tálcatartón helyezkedik el a négy db 6 tálca; ezekben a légylárvák és ezek táptalaja van. Az 5 közegtartó tartalmazza azt a közeget, amelyben a légylárvák bebábozódás előtt 4 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65