193738. lajstromszámú szabadalom • Eljárás glioxilil-spermidin előállítására
4. Glioxilil-spermidin (II) előállítása 5,55 g (16,26 mmól) N-szeril-spermidin (I)» trihidrokloridot 40 ml vízben oldunk és 3,55 g (16,58 mmól) nátrium-metaperjodátot tartalmazó 10 ml térfogatú vizes oldatot adagolunk cseppenként, keverés közben szobahőmérsékleten. 45 percen keresztül történő keverés után az oldat pH-értékét 2n sósavval pH=l értékre állítjuk, 20 percen keresztül keverjük a pH-értéket 2N nátrium-hidroxiddal 4-es értékre állítjuk,és az oldatot 500 ml CM-SephadexR-el töltött oszlopon bocsátjuk keresztül. Ezután grádiens elúciót végzünk, 2,5 liter víz és 2,5 liter 1M vizes nátrium-klorid oldat elegyével, majd az aktív frakciókat összegyűjtjük és csökkentett nyomáson szárazra pároljuk. A kapott párlási maradékot metanollal extraháljuk, és a metanolos extraktumot 500 ml SephadexR LH-20-al töltött oszlopon bocsátjuk keresztül, majd metanollal eluáljuk. Az aktív frakciókat összegyűjtjük és csökkentett nyomáson történő bepárlás után 1,583 g súlyú szirup formájú glioxilil-spermidin (II)* dihidrokloridot kapunk. Kitermelés: 33,3%. 2. példa 1. N-(4-amino-butil/borkősav-monoamid (IX) előállítása 3,225 g (150 mmól) putreszcint (VI) 75 ml tetrahidrofuránban oldunk, és az oldathoz cseppenként, részletekben 10,8 g (50 mmól) diacetil-L-borkősav-anhidrid (VIII) 50 ml tetrahidrofuránban elkészített oldatát adjuk jeges hűtés és keverés közben. Az adagolás után a keverést még 2 órán keresztül szobahőmérsékleten folytatjuk, és a reakció befejeződtével az oldószert csökkentett nyomáson eltávolítjuk. Ezután 50 ml vizet adagolunk, a reakcióelegy pH-ját 2n nátrium-hidroxiddal pH=13 értékre állítjuk, és keverést szobahőmérsékleten az acetil-csoport hidrolízisének teljessé tételének céljából 2 órán keresztül folytatjuk. A kapott reakcióelegyet 450 ml térfogatú DowexR 1x4 [OH-] gyantával töltött oszlopon bocsátjuk keresztül, majd az oszlopot 1,8 liter vízzel mossuk és az anyagot 0,5n vizes ecetsav-oldattal eluáljuk. A célvegyületet tartalmazó frakciókat összegyűjtjük és csökkentett nyomáson bepárolva kivált kristály formájában 4,03 g N- (4-amino-butil)-borkősav-monoamidot (IX) kapunk. Kitermelés: 36,6%. NMR (D20): 0 1,4-1,9 (CH2 x 2), 2,98 (CH2NHCO, t, J=8Hz), 3,26 (CH2NH, t, J=7,5Hz), 4,35 (CHOH, d, J = 2Hz), 4,49 (CHOH, d, J=2Hz) IR (KBr): v (cm-1) 3320, 2910, 2850, 1655, 1630, 1550, 1430, 1370, 1310, 1280, 1225, 1130, 1070, 980. 2. N- [4-(2-ciano-etil)-amino-butil] -borkősav-monoamid (XI) előállítása 7 Az 1. pontban leírtak szerint előállított 2,01 g (9,127 mmól) N-(4-amino-butil)-borkősav-monoamidot (IX) 40 ml vízben oldunk és ezután 1,273 ml trietil-amint, majd 0,726 ml akrilnitrilt adagolunk, a kapott keveréket 27 órán keresztül szobahőmérsékleten keverjük. A reakcióelegyet ezután csökkentett nyomáson szárazra pároljuk. Ezután a párlási maradékhoz 20 ml vizet adunk és a' kapott oldatot 300 ml térfogatú DowexR 1x4 (OH-) gyantával töltött oszlopon bocsátjuk keresztül, majd az oszlopot 1,2 liter vízzel mossuk és 0,5n vizes ecetsav-oldattal eluálunk. A célvegyületet tartalmazó frakciókat összegyűjtjük és csökkentett nyomáson bepárolva 2,235 g súlyú szirup formájú N-(4-(2-ciano-etil)-amino-butil]-borkősav-monoamidot (XI) kapunk. Kitermelés: 89,6%. NMR (DMSO-Ds): 6 1,3-1,8 (CH2x2), 2,4-3,3 NCH2x3, CH2CN), 4,20 (CHOHx2), 7,7 (CONH) IR (KBr): v (cm-1) 3390, 2930, 2230, 1650, 1630, 1540, 140Ö, 1120, 1070, 600 3. N- [4-(3-amino-propil)-amino-butil] -bor-kősav-monoamid (I) előállítása A 2. pontban, leírtak szerint előállított 2,101 g (7,688 mmól) N-[4-(2-ciano-etil)-amino-butil] -borkősav-monoamidot (XI) 50 ml metanolban oldunk, majd az oldathoz jeges hűtés és keverés közben részletekben 2,195 g (9,226 mmól) CoCI2.6H20-t és 1,746 g (46,13 mmól) nátrium-bórhidridet adunk. Az adagolás befejezése után a reakcióelegyet 3 órán keresztül szobahőmérsékleten keverjük. A reakció teljes lejátszódása után 100 ml vizet adagolunk,és a reakcióelegy pH-ját 2n sósavval pH=5,8 értékre állítjuk. A kivált fekete kristályokat kiszűrjük, és a szurletet a metanol eltávolítása céljából csökkentett nyomáson bepároljuk. A bekoncentrált oldatot 50 ml vízzel hígítjuk, majd 500 ml térfogatú CM-SephadexR C-25 (Na+) gyantával töltött oszlopon bocsátjuk át, majd az oszlopot 1,5 liter vízzel mossuk, és az anyagot grádiens elúcióval 2 liter víz és 2 liter 1M vizes nátrium-klorid-oldat elegyét használva eluáljuk. A célvegyületet tartalmazó frakciókat öszszegyűjtjük és 500 ml térfogatú DowexR 1x4 (OH-) gyantával töltött oszlopon bocsátjuk keresztül, az oszlopot 2 liter vízzel mossuk és 0,5n vizes ecetsav-oldattal eluálunk. A célvegyületet tartalmazó frakciókat összegyűjtjük és csökkentett nyomáson bepárol va vörös, szirup-formájú, 1,225 g súlyú N- [4 - (3-amino-propil) - amino-butil] -borkősav-monoamid (I)-acetátot kapunk. Kitermelés: 39,8%. NMR (D20) : 0 1,4-2,3 (CH2x3), 2,8-3,4 (NCH2x4), 4,25 CHOH, d, J=2Hz), 4,4 (CHOH, d, J=2Hz) ÍR (KBr): v (cm-1) 3400, 3040, 2950, 1640, 1400, 1120, 1070. 4. Glioxilil-spermidin (II) előállítása A 3. pontban leírtak szerint előállított 8 5 193738 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
