193648. lajstromszámú szabadalom • Eljárás furil-oxazolil-ecetsav származékok és az ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
193648 2. Kísérlet (Vérlemezke aggregáció gátlásának mérése) 250—300 g testsúlyú hím SD-patkányok hasi aortájából dietil-éterrel való altatás után vért veszünk. A vérminták 9 térfogategységnyi mennyiségét 1 térfogategységnyi vizes, 3,8 vegyes %-os trinátrium-citrát-oldattal elegyítjük, és az elegyet 500 g gyorsulással 5 percig centrifugáljuk, így felülúszó oldatként vérlemezkékben gazdag plazmát kapunk. Az alsó réteget 1000 g gyorsulással 10 percig tovább centrifugáljuk, és így felülúszó oldatként vérlemezkékben szegény plazmát kapunk. A vérlemezkékben gazdag plazmát olyan mértékben hígítjuk vérlemezkékben szegény plazmával, hogy mm3-enként 8— 9 A vérlemezkék aggregációjának %-os gát- = 1 -lása A fent leírt módon kiszámított %-os gátlás alapján a vizsgált vegyületeknek a vérlemezkék aggregációjára gyakorolt gátló hatását mínusz (—)-jellel jelöljük, ha a vizsgált vegyület 10%-nál kisebb mértékben gátolta a vérlemezkék aggregációját, és plusz 10 x 105 vérlemezke koncentrációt kapjunk. Ezután 200 pl hígított plazma és 25 pl, a vizsgált vegyületet 100 pg/ml koncentrációban tartalmazó oldat elegyét beleöntjük egy 5 SIENCO-aggregométer (Sienco Inc., Morrison, Colo. T5P-247-D modell) üvegcellájába. Az elegyet 2 percig 37°C hőmérsékleten, percenkénti 1100-as fordulatszámon keverjük, majd hozzáadunk 25 pl kollagén-oldatot (ame- 10 lyet Holmsen módszerével: Biochim. Biophys. Acta, 186, 254 (1969)) állítunk elő, és a verlemezkék aggregációjának %-os gátlását a vérlemezkék aggregációjának Born módszerével [Nature, 194, 927 (1969)] becsült mérté- 15 kéből, az alábbi képlet segítségével számítjuk ki: A vérlemezkék aggregációjának becsült értéke a kezelt plazmában ____________________ x 100 A vérlemezkék aggregációjának becsült értéke a kontroll plazmában ( + )-jellel jelöltük, ha a vizsgált vegyület 10%-nál nagyobb mértékben gátolta a vérlemezkék aggregációját. 30 Az eredményeket a II. táblázatban mutatjuk be. 10 II. Táblázat Vizsgált vegyület Vérlemezke aggregáció gátlás 2-[2-(4-klór-fenil)-5-(2-fu+ ril)-oxazol-4-il] -ecetsav 2-[2-(4-fluor-fenil)-5-(2- +-furil)-oxazol-4-il] -ecetsav--etil-észter 2-[2-(4-klór-fenil)-5-(2- +-furil)-oxazol-4-il] -ecetsav-etil-észt er 2-i2-(4-klór-fenil)-5-(3-fu+ ril)-oxazol-4-il] -ecetsav-etil-észter 2-[2-(4-fluor-fenil)-5-(3- +-furil)-oxazol-4-il] -ecetsav-etil-eszter 2- [2-(4-klór-fenil)-5-(3-furil)~ +-oxazol-4-il] -ecetsav 2- [2—(4—fluor-fenil)-5-(3-furil)+-oxazol-4-il] -ecetsav Clofibrate (kontroll) 6
