193507. lajstromszámú szabadalom • Eljárás interferonszerű polipeptidek előállítására
193507 a humán interferonéval azonos aktivitása adhat alapot annak feltételezésére, hogy ezeket a szekvenciákat, illetőleg molekulákat eredményesen lehet felhasználni arra, hogy a jelen találmány szerinti módon további, a humán interferonnak megfelelő szekvenciákat választhassunk ki, vagy olyan rekombináns DNS molekulákat állíthassunk elő, amelyek a humán ß-interferon immunológiai vagy biológiai aktivitásával rendelkező termékek expresszióját teszik lehetővé. A fentiek alapján tehát megállapítható hogy humán ß-interferonnak a rekombináns DNS-technikával történő előállítása egészen más problémát képez, mint amilyennel a fentebb leírt eljárások foglalkoztak. Itt ugyanis arról van szó, hogy egy olyan, ismeretlen szerkezetű DNS-szekvenciát keli találni, amely megfelelő gazdában a humán ß-interferon expresszióját kódolja és ezt DNS szekvenciák igen bonyolult elegyéből kell kiválasztani abból a célból, hogy a kiválasztott szekvencia alkalmazható legyen humán ß-interferon termelésére. Emellett az említett szekvencia megtalálásának és elkülönítésének a problémáját még súlyosbítja az a körülmény, hogy a kívánt DNS szekvencia csak rendkívül kis koncentrációban lehet jelen az említett bonyolult elegyben és nem áll rendelkezésre hatásos módszer az elegyben jelenlevő nagyszámú DNS-szekvencia gyors elemzésére abból a célból, hogy kiválaszthassuk és elkülöníthessük a kívánt szekvenciát. A jelen találmány megoldja ezeket a fentebb említett problémákat a humán ß-interferonnak valamely alkalmas gazdában történő expresszióját kódoló DNS-szekvencia megtalálása és elkülönítése tekintetében és ezáltal lehetővé teszi olyan DNS-szekvenciák, illetőleg olyan rekombináns DNS molekula előállítását, amelynek segítségével valamely gazdát arra lehet késztetni, hogy a humán fibroblaszt interferon immunológiai vagy biológiai aktivitását mutató polipeptidet termeljen. A jelen találmány segítségével tehát lehetővé válik a humán ß-interferon immunológiai vagy biológiai aktivitását mutató polipeptidek termelése és ezeknek vírusellenes, tumorellenes, illetőleg rákellenes szerekként való felhasználása. A találmány ezeknek a polipeptideknek eddig nem lehetséges menynyiségekben való előállítását teszi lehetővé és eddig nem ismert módszereket nyújt erre a célra. Amint ez az alábbi leírásokból ki fog tűnni, a találmány szerinti DNS-szekvenciák és rekombináns DNS molekulák képesek a humán ß-interferon immunológiai és biológiai aktivitását mutató polipeptidek valamely alkalmas gazdában történő termelésének az irányítására. Az ilyen DNS-szekvenciáknak és rekombináns DNS molekuláknak valamely alkalmas gazdában történő replikációja lehetővé teszi az ilyen polipeptideket kódoló gé- 6 9 nek nagy mennyiségekben történő előállítását is. Az ilyen polipeptidek és gének molekulaszerkezete és tulajdonságai könnyen meghatározhatók. Ezek a polipeptidek és gének vagy közvetlenül abban az állapotban, amint a gazda-szervezetben termelődtek, vagy pedig megfelelő származék-képzés vagy módosítás után felhasználhatók egyrészt maguknak e termékeknek a tökéletesített termelésre, valamint felhasználhatók vírusellenes, tumorellenes, illetőleg rákellenes szerekként vagy vírusellenes, tumorellenes és rákellenes gyógyászati módszereknek és az immun-modulációnak az eszközeiként. A találmány szerinti eljárás abban különbözik a fentiekben ismertetett korábbi eljárásoktól, hogy a találmány szerinti eljárás a korábbi eljárásokkal ellentétben magában foglalja olyan DNS-szekvenciák és rekombináns DNS molekulák előállítását és kiválasztását, amelyek legalább egyfajta, a humán ß-interferon immunológiai vagy biológiai aktivitását mutató polipeptid termelését kódolják. A fentiekből tehát kitűnik, hogy a találmány alapvető célkitűzése az, hogy olyan DNS-szekvencia előállítását tegye lehetővé, amelyet az jellemez, hogy a humán ß-interferon immunológiai vagy biológiai aktivitását mutató polipeptidek termelését kódolja; ez a szekvencia az alább felsorolt DNS-betétek valamelyike lehet: G-pHFIF-1, G-pHFIF-3, G-pHFIF-6, G-pHFIF-7, G-pPla-HFIF-67-12, G-pPla-HFIF-67-12A19, G-pPla-HFIF-67-8, G-pPla-HFIF-67-12A279T, G-pPla-HFIF-67-12A218Ml, G-pPla-HFIF-67-12AMl, G-pPla-HFIF-67- 12A19BX-2, valamint olyan DNS-szekvenciák, amelyek hibridizálnak a fenti DNS-betétek valamelyikére, valamint oly DNS-szekvenciák, amelyek oly kodon-szekvenciákat tartalmaznak, amelyek valamely hasonló immunológiai vagy biológiai aktivitást mutató polipeptidet kódolnak expresszió útján. A találmány szerinti szekvenciákat az jellemzi, hogy lehetővé teszik humán ß-interferonnak és humán ß-interíeronhoz hasonló polipeptideknek gazda-szervezetekben való termelését. A találmány közelebbi szemléltetésére szolgálnak a csatolt rajzok is, amelyeket az alábbiakban ismertetünk: Az 1. ábra vázlatosan szemlélteti a találmány szerinti eljárás egyik megvalósítási módját oly rekombináns DNS molekulák keverékének az előállítására, amelyek némelyikében a találmány szerinti polipeptideket kódoló DNS-szekvenciák foglalnak helyet. A 2. ábra vázlatosan szemlélteti a jelen találmány szerinti szűrési eljárást a kezdeti klón kiválasztására. 10 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
