193505. lajstromszámú szabadalom • Eljárás rákellenes 2-amino-4-hidroxi-kinazolin-származékok előállítására
193505 desztilláltuk benzollal), desztilláltuk és 3 A-ös molekulaszita felett tároltuk. A petrol-éter forráspontja 60—80°C. Az oldószereket rotációs bepárlóval, 35°C-ot még nem haladó fürdőhőmérsékleten távolítottuk el. A reakciók lefolyását és a termékek homogenitását kovasavgélen vékonyréteg-kromatografálással (DC Alufolien, Merck) ellenőriztük a következő futtatóelegyekkel (tf. arány): A = kloroform, metanol és ecetsav 95:5:3; B = benzol, piridin és ecetsav 20:2:1; C = etil-acetát és metilén-klorid 2:4; D = etil-acetát és heptán 4:1; E = kloroform és metanol 5:1; F = metanol, tömény ammónium-hidroxid és ecetsav 5:2:1. A foltokat ninhidrinnel és klór-tolidin reagenssel tettük láthatóvá. A kromatográfiás elválasztásokhoz Merck-féle 60 jelű szilícium-dioxidot használtunk gravitációs oszlopokban. Az olvadáspontokat Boetius készülékben határoztuk meg és nem korrigáltak. Az 'H-NMR-spektrumokat (DMSO-d6, 22°C, belső standard HMDS), illetve az infravörös (ÍR) spektrumokat 100 MHz-n Tesla BS 567 (Csehszlovákia) készülékkel, illetve Specord 75 (Zeiss, NDK) készülékkel határoztuk meg. A nagyteljesítményű folyadék kromatográfiás vizsgálatokat Bondapack C18 oszlopon, 5—15% acetonitrillel, 10 percig, 0,1 n nátrium-acetátban (pH=7) végeztük. A vegyületeket az A, és A2 reakcióvázlatokon feltüntetett arab számokkal jelöljük. (Glu=gl utam i lesöpört, tBu=terc-butilcsoport, Z = benzil-oxi-karbonil-csoport, pAB=p-amino-benzoil-csoport). 29 Tri (tere-but il) - N- (N -benziloxi-karbonil-L- gamma-glutamil ) -,L-glutamát (la) Tetra (terc-butil) - Ni-N- (N-benziloxi-karbo-nil-L-gamma-glutamil) -L-gamma-glutamil] - -L-glutamát (lb)~ ~ 16,87 g (50 mmól) terc-butil-N-benziloxi-karbonil-alfa-glutamát [K.Pawelczak, L. Krzyzanowski, B. Rzeszotarska: Org. Prep. Proc. Int. 17, 416—19 (1985)] és 5,50 ml (50 mmól) N-metil-morfolin 50 ml tetrahidrofuránnal készült —20°C-os oldatához keverés közben 6,46 ml (50 mmól) klór-hangyasav-izobutil-észtert adunk, majd 10 perc múlva hozzáadjuk 14,76 g (50 mmól) di(terc-butil)-glutamát-hidroklorid 50 ml tetrahidrofuránnal készült és 5,50 ml (50 mmól) N-metil-morfolint tartalmazó elegyét vagy az (la) vegyület hidrogenolízisével kapott (2a) vegyület 50 ml tetrahidrofuránnal készült oldatát. További 10 percig—20°C-on keverjük. Szobahőmérsékletre való melegítés után az N-metil-morfolin-hidrokloridot kiszűrjük és a szüredéket szárazra bepároljuk. A nyers olajat dietil-éter és petrol-éter elegyéből kristályosítjuk. A kitermelést és a fizikai állandókat a 4. táblázatban adjuk meg. 16 Az (la) és ( 1 b) vegyül etek hidrogenollzise (2a) es (2b) vegyűletekké. Az (la) vagy (lb) védett peptid 15 mmólnyi mennyiségének 50 ml metanollal készült oldatához 10%-os palládiumszenet (a peptid tömegének 20%-át) adunk, majd az oldaton egy óra hosszat hidrogéngázt vezetünk keresztül. Szűrés és az oldószer eltávolítása után olajat kapunk, amelyet a következő reakcióhoz közvetlenül felhasználunk. Tri (terc-butil)-N-{N- [p-(benziloxi-karbonil-amino) -benzoil] -L-gamma-glutamil)-L-glutamát (3aT Tetra(terc-butil)-N-fN- [N-(p- (benziloxi-karbonil-amino) -benzoil) -L-gamma-glutamil [ -L-gamma-glutamill-L-glutamát (3dT A (2a) vagy (2b) vegyület 15 mmól-nyi mennyiségének és 1,65 ml (15 mmól) N-metil-morfolinnak 15 ml dioxánnal készült, vízfürdőn kevert oldatához 4,35 g (15 mmól) p- (benzil-oxi-karbonil-amino) -benzoil-klóridot [L.Krzyzanowski, B. Rzeszotarska; Org. Prep. Proc. Int. 17, 83—86 (1985)] adunk. Az elegyet 20 percig keverjük, az N-metil-morfolin-hidro-kloridot kiszűrjük és a szüredéket szárazra bepároljuk. A kapott olajat etil-acetátban oldjuk. A nyers terméket petrol-éterrel leválasztjuk, szűrjük és 50 ml dietil-éterrel háromszor mossuk. A kapott terméket etil-acetát és petrol-éter elegyéből kristályosítjuk. A kitermelést és a fizikai állandókat a 4 táblázatban adjuk meg. A (3a) és (3b) vegyületek hidrogenolízise (4a) és (4b) vegyűletekké. A (3a) vagy (3b) védett peptid 10 mmólnyi mennyiségének 80 ml metanollal készült oldatához 10%-os palládiumszenet adunk (a peptid tömegének 20%-át), majd 30 percig hidrogéngázt vezetünk az oldatba. Szűrés és az oldószer eltávolítása után olajat kapunk, amelyet a következő reakcióhoz közvetlenül felhasználunk. Tri (terc-butil) -N-(N- [4- ( (prop-2-inil) -amino) -benzoill -L-gamma-glutamil}-L-glutamát (5a) Tetra (terc-butil) -N- [N-(N- [4- ( (prop-2-inil) - -amino) -benzoil | -L-gamma-glutamil|-L-garn7 ma-glutamill-L-glutamát (5b) 10 mmól (4a) vagy (4b) vegyületnek 15 ml dimetil-formamiddal készült oldatához 1,22 ml (11 mmól) 2,6-dimetil-piridint és 1,2 ml (11 mmól) prop-2-inil-bromidot adunk. 70 órás (5a), illetve 120 órás (5b) keverés után (vékonyrétegen a C eleggyel követve) hozzáadunk 50 ml etil-acetátot, a szervesréteget 120 ml vízzel, a vizes réteget 60 ml etil-acetáttal ötször mossuk, majd az egyesített etil-acetátos kivonatokat 200 ml nátrium-klorid oldattal kétszer mossuk.,A szerves fázist nátrium-szulfáton szárítjuk, majd a bepárlás után kapott maradékot kovasavgél oszlopon (95.5 cm) kromatografáljuk, és a C (5a) vagy B (5b) oldószereleggyel eluálurk. Az (5a) vegyületet etil-acetátból kristályosítjuk. A kitermelést és a fizikai állandókat a 4—6. táblázatokban ismertetjük. 30 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
