193237. lajstromszámú szabadalom • Eljárás poliéter tipusú antibiotikumok előállítására

193237

ton elegy közötti grádienssel eluáljuk. 25 mles frakciókat veszünk le. Az 54-64. sz. frakciót összegyűjtjük, vákuumban bepároljuk, a maradékot etil-acetátban oldjuk és egymásután 1 n sósavval, vízzel, telített nátrium-karbonát-oldattal és vízzel mossuk, nátrium-szulfát felett szárítjuk és vákuumban bepároljuk. A maradékot n-hexánból kristályosítva az X-14889A antibiotikumot nyerjük.

Op.: 149— 150°C; [a]f=+29,3° (c=l,.metanol), -(-16,7° (c=l, kloroform).

Mikroajialízis: C33H60O8 képletre (584,84) számított: C%=67,77; H%=10,34;

talált: C%=67,78; H%=10,50.

A szerkezetet l3C NMR segítségével igazoljuk. (X-14889A antibiotikum=dekarboxi X-14889B antibiotikum).

Az X-14889A antibiotikum in vitro gram pozitív mikroorganizmusokkal szemben hatásos; minimális gátlási koncentráció =6,25— 1,57 mcg/ml.

4. példa

Az X-14889B antibiotikum -nátrium-sójának izolálása tank fermentációnál nyert fermentléből

Az X-14889A antibiotikum izolálásánál használttal (54-64. frakció, lásd 3. példa) azonos oszlopról levett és egyesített 124-200. sz. frakciót a 3. példában leírt módon dolgozzuk fel. Hexán hozzáadása mellett végzett dietil1 -éteres kristályosítás után az X-14889B antibiotikum nátrium-sóját hemihidrát alakjában kapjuk.

Op.: 139—140°C; [a]„5=5,9° (c=l, metanol), 7,4° (c=l, kloroform).

Mikroanalízis: C34H59O10Na • 1/2 H20 képletre (659,84)

számított: C%=61,89; H%=9,17;

Na%=3,48; H20%=1,37; talált: C%=61,92; H%=9,27;

Na % =3,55; H20%=1,71.

Az X-14889B antibiotikum szerkezetét a tallium-só röntgen-analízisével határozzuk meg (az X-14889B antibiotikum az ismert Lysocellin antibiotikum izomerje). Az X-14889B antibiotikum nátrium-sója gram-pozitív mikro-7

organizmusokkal szemben hatásos; minimális gátlási koncentráció = 6,25—0,09 mcg/ml.

5. példa

5 Az X-14889C antibiotikum nátrium-sójának izolálása

Az X-14889A és -B antibiotikum izolálásánál felhasználttal (lásd 3. és 4. példa) azonos oszlopról levett és összegyűjtött 251—300.

10 frakcióból a 3. példában ismertetett eljárással izoláljuk az X-14889C antibiotikum nátrium-sóját. Az X-14889C antibiotikum nátrium-sóját hexán hozzáadása mellett dietil-éterből kristályosítjuk és monohidrát alakjában nyer-15 jük.

Op.: 139—141°C; [a]35 =19,3° (c=l, kloroform).

Mikroanalízis: C33H57O,0NarH2O képletre (654,82)

20 számított: C%=60,53; H%=9,08;

Na%=3,51; HaO%=2,75;

talált: C%=60,99, 61,24; H%=9,16,

8,79; Na%=3,68;

H20%=2,00.

25 A szerkezetet röntgen krisztallográfiai

úton határozzuk meg (az X-14889C antibiotikum a Lysocellin alacsonyabb homológja).

6. példa

30 Az X-14889D antibiotikum izolálása

Az X-14889C antibiotikum anyalúgját metilén-kloridban szuszpendált 30 g szilikagéllel (Davison fok 62) töltött oszlopon újrakromatografáljuk és 400 ml metilén-kloriddal,

35 majd 400 ml 1:1 arányú dietiléter-hexán elegygyel eluáljuk. A kapott X-14889D antibiotikum (anhidro X-14889A antibiotikum) 117°C-on olvad.

Mikroanalízis: C33H5807 képletre (566,82)

40 s«ámított: C%=69,93; H%=10,31;

talált: C%=69,60, 69,87;

H%=10,36, 10,28.

A szerkezetet röntgen krisztallográfiás mérésekkel határozzuk meg.

45 Az új X-14889A, C és D antibiotikum különböző organizmusokkal szemben kifejtett antimikcóbás hatását az alábbi táblázattal igazoljuk.

8

*In vitro Minimális gátlási koncentráció tmcg/ml)

Mikroorganizmus

X-14889A

X-14889C

X-14889D

G(+,) coccusok Streptococcus faecium ATCC 8043

1,57

0,08

125

Staphylococcus aureus ATCC 6538P

6,25

5

125

Micrococcus luteus ATCC 9341

6,25

5

G(+) pálcikák Bacillus megaterium ATCC 8011

6,25

2,5

1000

Bacillus sp. E ATCC 27359

3,13

0,63

7,9

Bacillus subtilis ATCC 558 6

3,13

1,25

1000