193151. lajstromszámú szabadalom • Eljárás gangliozid-származékok és ilyen hatóanyagokat tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
5 193151 6 boxiláí-csoportjait ioncsere útján karboxilát-sóvá alakítjuk; b2) az így sóvá alakított gangliozidot, illetőleg gangliozid-elegyet valamely nemvizes szerves oldószerben oldjuk, és b3) az oldott gangliozidsót, illetőleg gangliozidsó-elegyet legalább egy molekulán belüli észterkötés kialakításáig valamely laktonképző reagenssel reagáltatjuk. A találmány szerinti eljárással előállított gangliozid belső észter-származékot, célszerűen acetonnal történő lecsapás útján különítjük el a reakcióelegyből. 5 A találmány szerinti eljárás fent ismertetett két változatának műveletsorát az alábbi folyamat-vázlat szemlélteti: 10 Állati szövet /pl. marha-agyvelő/ extrakció gangliozid karboxilát/C00-/ csoportokkal a/ kezelés ioncserélő /pl. sztirol-tipusu gyantával/ gangliozid szabad C00H csoportokkal kezelés laktonképző reagenssel gangliozid belső észter /oldatban/ lecsapás acetonnal gangliozid belső észter /elkülönítve/ b/ kezelés ioncserélő /pl. tere. só alakban levő/ gyantával gangliozidsó /pl. tere.bázissal/ kezelés laktonképző reagenssel gangliozid belső észter /oldatban/ lecsapás acetonnal gangliozid belső észter /elkülönítve/ Megjegyzés: A laktonképző reagenssel való reagáltatás mindkét eljárás-változatban nem-vizes szerves oldószerben, vízmentes közegben kerül lefolytatásra. A találmány szerinti eljárásban kiindulási anyagként alkalmazott gangliozid vegyieteket emlősök, különösen előnyösen szarvasmarhák agyszövetéből vonjuk ki. A gangliozidok belső észter-származékainak a találmány szerinti előállítási módját az alábbi példákban részletesen szemléltetjük. 1 1. példa S/.arvasmarha-agyvelöböl extrakcióval előállított gangliozid-keverékből 5 g mennyiséget 50 ml dimetil-szulfoxidban oldunk. Az oldathoz 4 g vízmentes, sztirol-tipusú ioncserélő gyantát (szulfonsav, H+ alakban, 50— 100-as szitafinomságnak megfelelő méretű szemcsék) adunk és a keveréket szobahőmérsékleten 30 percig keverjük. Az ioncserélő gyantával végzett kezelés eredményeként a 4 gangliozid valamennyi karboxilát-csoportja 45 karbcxilátcsoporttá alakul át. A karboxilátcsoportok tökéletes átalakulásáról megfelelő fizikai analitikai módszerrel, például atomabszorpciós vizsgálattal győződhetünk meg. Az ioncserélő gyantát azután vákuum alkai- 50 mazásával kiszűrjük a reakcióelegyből, a szőriéiként kapott oldathoz 1,5 g diciklohexil-karbodiimidet adunk és az elegyet 1 órán át állni hagyjuk. A kivált diciklohexil-karbamidot szűrjük, és a szűrletből 100 ml aceton 55 hozzáadásával kicsapjuk a gangliozid belső észter-származékát. Ilyen módon 4,6 g (90—95%) terméket kapunk. A belső észter-származék jelenlétét infravörös spektroszkópiával és vékonyrétegkro- 6q matográfiával igazoljuk. Infravörös spektroszkópia: kálium-bromid pasztillával végezzük, az észter laktonkötése 1750 cm-'-nél ad sávot. Vékonyrétegkromatográfia: a vizsgálatot g5 szilikagél réteget tartalmazó lemezeken végezzük, a futtató oldószerelegy kloroform,
