193060. lajstromszámú szabadalom • Eljárás A-39079 antibiotikum S-1faktor előállítására
1 193060 2 szimultán laboratóriumi összehasonlításon-, valamint a Streptomyces spheroides és más hasonló Jajok közölt leírásával való összehasonlításon alapszik [R.E. Buchanan and N.E. Gibbons, Eds. „Bergey’s Manual of Determinative Bacteriology,” 8th ed., The Williams and Wilkins Co., Baltimore, 1974. E.B.Shirling and D. Gottlieb, "Cooperative Description of Type Cultures of Streptomyces!1 Int.J. Syst. Bacteriol. 18(4): 279-399 (1968), és H.Wallick, D.A.Harris, M.A.Reagan, M.Ruger és H.B.Woodruff, “Discovery and Antimicrobial Properties of Cathomycin, a New Antibiotic Produced by Streptomyces spheroides N. sp.,* Antibiotics Annual 1955-1966:909- 917 (1956)]. A mikroorganizmus leírása során a Streptomyces fajok leírására az Internationl Streptomyces Project (ISP) által Streptomyces fajok jellemzésére javasolt módszereket használtuk [E.B. Shirling and D. Gottlieb „Methods of Characterization of Streptomyces species!' Int.J.Syst, Bacteriol. 16, (3), 319-340 (1966)} bizonyos kiegészítő vizsgálatokkal együtt. A szénforrás hasznosítást ISP No. 9. alaptáptalajjal határozzuk meg, annyi szűréssel sterilezett szénforrást adva a táptalajhoz, hogy a végkoncentráció 1.0 tömegszázalék legyen. A lemezeket 30°C-on inkubáljuk és 14 nap múltán értékeljük. A melanoid-pigment termelő képességét (kromogenicitás) ISP No. 1. (trypton-élesztő kivonat tápleves), ISP No. 6. (pepton-élesztő kivonat-vas agar), ISP No. 7. (tirozin agar) és módosított ISP No. 7. (tirozin-mentes) táptalajokon határozzuk meg. A keményítő-hidrolízist a keményítő jódos kimutatásával ISP No. 4. (szervetlen sók keményítő-agar) lemezeken [D.J.Blazevic and G.M.Ederer, “Principles of Biochemical Tests in Diagnostic Microbiology“, John Wiley and Sons, Inc. New York, 136. oldal (1975] határozzuk meg. A morfológiai tulajdonságokat optikai fénymikroszkóppal tanulmányozzuk. Pásztázó elektron-mikroszkóppal tanulmányozzuk a spórák felszínének mintázatát. A nátrium-klorid tűrőképességét ISP No.2. agárhoz megfelelő végkoncentrációt biztosító nátrium-klorid mennyiség hozzáadásával vizsgáljuk. 1. T A szín-nevek azonosításához az ISCC-NBS Centroid Color Charts No. 2106 számú’standard mintát (U.S. Department of Commerce, National Bureau of Standards, 1958) és a 5 Color Harmony Manual (4-ik kiadás, Color Standards Department, Container Corporation of America, Illinois, 1958) kiadványokat használjuk. A diamino-pimelinsav (DAP) izomerek je- 10 lenlétét, valamint a szénhidrátok jelenlétét a sejthidroHzátumokban Becker és munkatársai valamint Lechevalier [B.Becker, M.P.Lechevalier, R.E.Gordon and H.A.Lechevalier,"Rapid Differentiaton Between Nocardia and 15 Streptomyces by Paper Chromatography of Whole Cell Hydrolysates“, Appl. Microbiol. U, 421-423 (1964), és M.P. Lechevalier, „Identification of Aerobic Antinomycetes of Clinical Importance“, J.Lab. Clin. Med., 7J, 20 934-944 (1968)] kromatográfiás módszerével állapítjuk meg. A hasonlósági koefficienseket az s=lK + nï3/[nî + n; + Nd] • íoo 25 egyenlettel határozzuk meg, ahol N^~ jelentése a pozitív hasonlóságok száma, N.T a negatív hasonlóságok száma, Nd a különbözőségek száma, lásd [W, Kurilowicz, A. Paszkiewicz, W. Woznicka, W. Kurzatkowski, „Nume- 3Q rical Taxonomy of. Streptomyces“ Polish Medical Publishers, Warsaw, (1975)]. A tenyészet jellemzői A tenyészetet bőséges lég- és vegetatív-mi- 35 céliumos növekedés jellemzi különböző táptalajokon. A spóratömeg főleg a sárga (Y) szín-sorozatba tartozik. A legjobban közelítő szín a 2ba halvány sárga [H.D.Tresner and 40 E.J.Backus., "System of Color Wheels for Streptomycete Taxonomy*, Applied Microbiology, 11, 335-338" (1956)]. Ez legjobban az lSP NŐ5. glicerin-aszparagip agaron figyelhető meg. Ez a szín nem állandó, változik. A tenyészet hátoldalán nem látható meg- 45 különböztethető színanyag. Sárgás-barna, és a pH változása nem befolyásolja. Oldódó színanyagot nem termel, kivéve, hogy az ISPNo.2. és ISP No.3. agar-táptalajokon nagyon gyen- 50 ge barna színanyag látható. A tenyészet stabil, homogén izolátum. A tenyészetről megfigyelt információkat az 1. táblázatban foglaljuk össze: á b 1 á z a t Az NRRL 15600 és a J3. spheroides NRRL 2449 tenyészetek jellemzői“ NRRL 15600 S.spheroides NRRL 2449 G: bőséges jó ISP R: 77 m.yBr 87.mY No. 2 Am: bőséges (Y) közepes (W) 1 db.p.yGN ,b fehér Sp: világos barna nincs 4
