193053. lajstromszámú szabadalom • Eljárás limfotoxin és limfotoxin-mRNS előállítására
1 193053 2 xint vagy limfotoxin-mRNS-t ismert módszerekkel izoláljuk. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás azzal jellemezve, hogy Herpes vírus saimiri-vel transzformáit sejtvonalat alkalmazunk. 3. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti eljárás azzal jellemezve, hogy a tápoldathoz fetális borjúszérumot adunk 10% koncentrációig. 4. Az 1-3. igénypontok bármelyike szerinti eljárás azzal jellemezve, hogy a tápoldathoz a termelés stimulálása végett alacsony molekulasúlyú daganatkeltő anyagokat adunk, előnyösen diterpéneket, elsősorban Daphnan-, Ingelan- és Tiglian-típusúakat. 5. Az 1-4. igénypontok bármelyike szerinti eljárás azzal jellemezve, hogy a limfotoxin termelés stimulálására az inkubáció folyamán daganatkeltő anyagként égy forbolésztert vagy mezereint alkalmazunk 1-1000 ng/ml, előnyösen 10-100 ng/ml koncentrációban. 6. Az 1-4. igénypontok bármelyike szerinti eljárás azzal jellemezve,- hogy a limfotoxinmRNS termelés stimulálására az inkubáció folyamán daganatkeltő anyagként egy forbolésztert vagy mezereint alkalmazunk 1-1000 ng/ml, előnyösen 10-100 ng/ml koncentrációban. 7. Az 1-5. igénypontok bármelyike szerinti eljárás azzal jellemezve, hogy a sejteket — szérumtartalmú tápoldatban való elszaporítás után — átvisszük szérummentes tápoldatba. 8. Az 1-5. igénypontok, valamint a 7. igénypont bármelyike szerinti eljárás azzal jellemezve, hogy a tenyészetek felülúszójából a limfotoxint 1-7 nap múlva, előnyösen 2-4 nap múlva választjuk el. 9. Az 1-5. igénypontok, valamint a 7. vagy 8. igénypontok bármelyike szerinti eljárás azzal jellemezve, hogy a limfotoxint kontrollált pórusú üvegdarával töltött oszlopon dúsítjuk. 10. Az 1-4. igénypontok, valamint a 6. igénypont szerinti eljárás azzal jellemezve, hogy a sejteket fetális borjúszérumot tartalmazó tápoldatban inkubáljuk és a sejtekből a limfotoxin-mRNS-t legalább 3-8 óra múlva, előnyösen 6-24 óra múlva izoláljuk. 5 10 15 20
