193039. lajstromszámú szabadalom • Eljárás az A-21978C ciklusos peptid N-szubsztituált származékainak előállítására
29 193039 30-hidroxid-oldatta 1 6,0-ra állítjuk be. A keveré két Et20-val (6 x 200 ml) mossuk, majd liofi-. lizáljuk. A nyers származékot fordított fázisú HPLC- vel tisztítjuk a következőképpen: a körülbelül 6 ml H20/Me0H/CH3CN/piridin/HOAc (55:15:30:2:2) elegyben oldott mintát 83 x 1,27 cm-es LP-l/C,g töltetet tartalmazó rozsdamentes acéloszlopba injektáljuk. A kívánt frakciókat UV abszorpció (280 nm) útján és antimikrobiális aktivitásuk alapján lokalizáljuk. E frakciókat egyesítve és liofilizálva 951 mg Nrrp-Cbz-Nffrn-t-BOC-A-21978C mag-származékot kapunk. B. A t-BOC csoport eltávolítása A t-BOC csoportot úgy távolítjuk el, hogy a köztiterméket 50 mg/ml koncentrációban trifluor-ecetsav/anizol/trietil-szilán (10:1:1) elegyben oldva -10°C-on 3 percig keverjük. Az elegy bepárlása után olajat kapunk, melyet 2 x 25 ml Et20-val eldörzsölve 520 mg nyers NTrp-Cbz-A-21978C mag képződik. C. Nr,p-Cbz-A-21978C mag acilezése Az N7yp-Cbz-A-21978C magot a tríklór-fenil aktív észter-eljárással acilezzük. Nrrp-Cbz-A-21978C-t (520 mg) adunk 1-hidroxi-benzotriazol (7 mg) és lauroil-triklór-fenol aktív észter (123 mg) piridinnel (150 rnt) készült oldatához. 20 óráig 60°C-on keverjük, majd a reakcióelegy bepárlása után kapott maradékot Et20-val (3 x 25 ml) eldörzsölve Nr^-Cbz-Nom-lauroil-A-21978C magot (550 mg) kapunk. 30. példa Schiff-bázisok és redukált Schiff-bázisok előállítása Több reakciót hajtunk végre az alábbiak szerint: A-21978C magot (40 mg) vízben (2 ml) oldunk. Az oldat pH-ját 4-pől 9-re állítjuk be In nátrium-hidroxidoldat segítségével. Az oldat alikvotjait (0,5 ml) a következő aldehidekkel (5 pl) elegyítjük: 1) heptaldehid 2) oktil-aldehid 3) decil-aldehid 4) undecil-aldehid metanolban (4 ml). A reakcióelegyet éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük. A képződött Schiff-bázisokat NaBH3CN-dal (2,5 mg per reakció) redukáljuk 5 percig szobahőmérsékleten. A reakcióelegyeket szilikagél TLC-vel vizsgáljuk CH3CN/H20 (7:3) oldószerrendszert használva, és Staphylococcus aureus-szal szembeni próbát alkalmazva. A Schiff-bázisok e próbában nem hatásosak S.aureus-szal szemben, feltehetően a próba körülményei között bekövetkező instabilitásuk következtében. Mindegyik redukált elegyben két faktor keletkezik. E vegyületek aktivak S. aureus-szal szemben és a TLC rendszerben hasonló elmozdulást mutatnak, ami arra utal, hogy a következőkben felsorolt 1 általános képletű vegvületek képződnek (minden esetben R1 — = H): 5 10 15 20 25 30 Schiff-bázisok és redukált Schiff-bázisok előállítása A21978C reakciója a.z alábbi aldehidekkel : Termék Hatás S.------------------------------------------- aureus-szal 2- szemben”' R R r/ heptaldehid CH, (CH^)S CH= H nem 0,4 CH,(CH*.)e -H igen 0,05 CHS ( CH2 . CH= CH3 ( CH2 )5 CH= nem 0,4 CH, (CH Je -CH4(CH,)€ -igen 0,72 oktil-aldehid CH,(CH2)6 ch= H nem 0,4 CHí (CH^)t-H igen 0,59 CH3 (CHJ6CH= CH,(CHjfe CH = nem 0,44 CHs(CHt)7-CH, (CH, )., -igen 0,72 decil-aldehid CH,(CHZ)8 C.H= H nem 0,44 ch,( ch*)9 -H igen 0,69 CHj (CHz)8 ch= CH, (CH z)s C= nem 0,51 ch,( chj9 -ch5(cg2)9 -igen 0,73 undecil-aldehid CH3 (CHt)g CH = H nem 0,47 ch, ( ch2)10 -H igen 0,69 CH%(CH2)9 ch= CR-, (CH, )$ CH= nem 0,53 ch,( ch,)10 -igen 0,73 16 a- E próbában a Schiff-bázisok aktivitásának hiánya a kísérleti körülmények közötti instabilitásukat tükrözheti *- szilikagél TLC, CH3CN/H20 (7:3) rendszer
