192955. lajstromszámú szabadalom • Eljárás alkoxi-benzoil-csoporttal acilezett A- 21978C ciklusos peptid-származékok előállítására
5 192955 6 pepiidet a fermentlébôl ismert módon különítjük el. Az enzimatikus dezacilezéssel kapott ciklusos peptidek és sóik a (3) általános képlettel írhatók le, ahol R’ és R° egymástól függetlenül hidrogénatomot vagy amino-védőcsoportot jelent. Az A-21 978C komplex vagy az A-21 978C komplex egyes C», Ci, C2, Ca C4 és C5 faktorának acilrészét eltávolítva (3) általános képletű vegyületet kapunk, ahol R° és R* hidrogénatomot jelent. A dezacilezett molekula az A-21 978C antibiotikum faktorok mindegyikében meglévő közös ciklusos peptid. Kényelmi okból e vegyületet A-21 978C magnak fogjuk nevezni. E vegyület a (4) képlettel is leírható, melyben „3MG" L-treo-3-metil-glutaminsavat jelent. A (3) általános képletű vegyületeket, melyekben R° ëB R’ hidrogénatomtól eltérő jelentésű, a megfelelően blokkolt antibiotikus A-21 978C Co, Ci, Ci, Cj, C4 és C5 faktorok dezacilezésével állítjuk elő. Kényelmi okokból itt e vegyületeket védett A-21 978C magoknak fogjuk nevezni. E védett vegyületek hasznos köztiterroékek egyes 1 általános képletű peptidek előállításához, azaz olyan vegyületekéhez, melyekben R' alkoxi-karbonil csoportot jelent. A (3) általános képletű mag előállításának módszerénél előnyben részesített dezacilező enzimet, az A. utahesis NRRL 12 052-t a „Nothern Regional Research Center, Agricultural Research Culture Collection (NRRL), U. S. Department of Agriculture, 1815 North University St., Peoria, Illinois 61 604, U.S.A.” bocsátja a nyilvánosság rendelkezésére NRRL 12 052 nyilvántartási számmal. Az itt leírt, 1. preparálás az A-21 978C mag fermentációs előállítását ismerteti, melynek során szubsztrátként A-21 978C komplexet és mikroorganizmusként Acíinoplanes uta hensis NRRL 12 052-t használunk. A (3) általános képletű A-21 978C mag előállítására használható egyéb Aciinoplanaceae tenyészetek a nyilvánosság részére a Nothern Regional Research Laboratory-ből férhetók hozzá, a következő nyilvántartási számokon: Acíinoplanes missouriensis NRRL 12 053 Actínoplanes sp. NRRL 8122 Actinoplenea ap. NRRL 12 065 Streptosporangium roseuw var. hollandensia NRRL 12 064. Az Actinoplanaceae családon belül valamely adott mikroorganizmus törzs dezacilező hatásosságát a következő eljárással határozzuk meg. Alkalmas táptalajt beoltunk a mikroorganizmussal. A tenyészetet rotációs rázógépen mintegy 28 aC-on 2-3 napig inkubáljuk. Ezután a szubsztrát antibiotikumok egyikét hozzáadjuk a tenyészethez, a fermentációs közeg pH-jét körülbelül 6,5 értéken tartva. A tenyészet aktivitását Micrococcus luteus próbával mutatjuk ki. Az anlibiotikus aktivitás csökkenése azt jelenti, hogy a mikroorganizmus termeli a dezacilezéshez szükséges enzimet. Ezt azonban a következő módszerek valamelyikével kell igazolni: 1) HP1 .C-elemzés az ép mag jelenlétének kimutatására, vagy 2) alkalmas oldalláncc.al (például lauroíl-, n-dekanoil- vagy n-dodekanoilcsoport) való újraacilezés az aktivitás helyreállítása céljából. A találmány tárgyát egy A-21 978C mag (3) általános képletű vegyület acilezése útján kapott 1 általános képlettel leírható új vegyületek - ahol R és R1 jelentése a fenti - előállítása képezi. A szakember előtt érthető módon a szubsztituált benzoilcsoport, a -C- funkció Ó és az OR2 funkció a benzolgyűrűn egymáshoz képest orto-, méta- vagy para-orientáltságú lehet. E csoportoknál előnyös a para-orientáció. Az „alkil” csoport megjelölés egyenes vagy elágazó szénhidrogénláncokra vonatkozik. Az „amino-védőcsoport” meghatározás olyan ismert amino-védócsoportot jelöl, amely összeegyeztethető az A-21 978C molekula más funkciós csoportjaival. Előnyösek azok az a nino-védőceoportok, amelyek az utólag acih zeit vegyületből könnyen eltávolithatók. Alkalmas védőcsoportokra példák találhatók a következő munkában: »Protective Groups in Organic Synthesis", Theodora W. Green; John kiley and Sons, New York, 1981, 7. fejezet. I ülönösen előnyös aminovédőcsoport a terc-butoxi-karbonil- és a benzil-oxi-karbonilc soport. Az R2 szubsztituens jelentése számára a találmány szerint előnyben részesített, jellemző 8-12 szénatomos alkilcsoporiok a következők: (a) —(CHjlnCIL csoport, ahol n jelentése 7-14 közötti egész szám; és CHs (b) -(CH2)rÓH(CH2)sCH3 csoport, ahol r és s egymástól függetlenül 0-12 közötti egész számot jelent, azzal a kikötéssel, hogy r+s nem lehet nagyobb 12-nél és kevesebb 5-nél. Az 1 általános képletű vegyületeket úgy állítjuk elő, hogy egy 3 általános képletű vegyületet acilezünk, amidkötés létrehozására alkalmas ismert eljárások segítségével. Az acilezés általában úgy történik, hogy a kiválasztott vegyületet a kívánt acilcsoportnak (R) megfelelő szubsztituált benzoesav (5 általános képlet) reakcióképes származékával reagáltatjuk (az 5 általános képletben X és R2 a fentebb megadott jelentésű). Jellemző 5 általános képletű vegyületek a következők: p-(n-oktil-oxi)-benzoesav, p~ -(n-decil-oxi)-benzoesav. A »reakcióképes származék" megjelölés olyan származékra vonatkozik, amely az aci-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 4
