192940. lajstromszámú szabadalom • Eljárás vinkrisztin előállítására
3 192940 4 A találmány tárgya új eljárás az (I) képletű vinkrÍBztin előállítására. Ismert, hogy a vinkrÍBztin citosztatikuB hatású vegyület és mint ilyen daganatellenes gyógyszerkészítmények hatóanyaga. A vinkrisztin előállítására több módszer ismert. Időrendben első a növényi extrakció volt /lásd például a 3 205 220 sz. amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírást/. Ezen eljárás hátránya, hogy a drogban található igen sok haBonló-Bzerkezetű alkaloidtól nehézkes és bonyolult az elválasztás, tisztítás. Az utóbbi időszakban a félBzintetikus - utak kerültek előtérbe. így az extrakciÓB úton előállított vinblaBztinból például N-dezmetil-vinblaBztint készítettek, majd ezt formilezéBBel vinkrisztinné alakították (164 958 sz. magyar szabadalmi leírás). Az eljárással kapott vinkrisztin nem volt kielégítő minőségű és további tisztításra szorult. A 165 599 sz. magyar szabadalmi leírás olyan eljárást ismertet, amelyben a (III) képletű vinblasztint krómsavval vagy annak valamely Bójával oxidálták. Az aránylag bonyolult technológiai műveletsor, a többszöri kromatográfiás tisztítás dacára sem hozta meg a kívánt eredményt, a termék tisztasága és a kitermelés mértéke (55-59%) szempontjából. A 2 049 677 sz. nagy-britanniai szabadalmi leírás (178 706 sz. magyar szabadalmi leírás) szerint eljárva a kitermelést sikerült közegváltoztatáBsal kis mértékben emelni, továbbá a reakcióelegy anyalúgját is feldolgozták. Kellő minőségű végterméket azonban csak többszöri átkrislályosítással tudtak előállítani. A 79 785 sz. európai szabadalmi bejelentés olyan eljárást ismertet, ahol nátrium-bikromáttal végzik az oxidációt. Itt ugyan N- dezmetil-vinblaBztin nem keletkezett, viszont az eljárással előállított vinkrisztin 10-30% nem azonosított mellékterméket tartalmazott. Összefoglalva tehát az eddig ismert vinblasztin oxidációs módszerekkel mindig képződött melléktermék, melytől nem volt könnyű megszabadulni. A találmány célja olyan eljárás kidolgozása, mellyel egy lépésben, kifogástalan tisztaságú vinkrisztin kapható. A találmány azon a felismerésen alapul, hogy a vinblasztin oxidációjakor kapott ciklo-vinkrisztin (melyet a 190 219 számú magyar szabadalmi leírás ismertet) egyszerűen, kitűnő termeléssel vinkrisztinné alakítható. Az így kapott vinkrisztin tisztasága teljes mértékben megfelel a gyógyszerkéBZÍtés követelményeinek. A találmány tehát eljárás az (I) képletű vinkrisztin előállítására oly módon, hogy a (II) általános képletű - ahol a képletben R jelentése for mil-csoport-ciklo-vink risztint alkálifém-bór-hidriddel reagáltatjuk, majd a kapott terméket a reakcióelegyből elválasztjuk. A találmány egy előnyös kivitelezési módja szerint a reakciót róvidszénláncú alkán-karbonsavban, kívánt esetben szerves oldószer jelenlétében +5°C és 30"C közötti hőmérsékleten végezzük. A találmány szerinti eljárásban kiindulási anyagként használt ciklo-vinkrisztint-a 190 219 sz. magyar szabadalmi leírásban ismertetett módon eljárva-vinblasztin oxidációjával állíthatjuk elő. A reakció terméke a ciklo-vinblaBztin, melyet extrakciós és bepárlásos módszerrel elkülönítünk, majd szükség esetén oszlopkromatográfiás módszerrel tisztítunk, és savaddíciós sóvá, előnyösen szulfátsóvá (kénsavas etanol hozzáadása pH 4-ig) alakítunk. A ciklovinblasztin-sót különböző oxidációs módszerekkel alakíthatjuk ciklovinkrisztinné. Az átalakulás kb. 20 perc alatt lezajlik. Ezután a reakcióelegy pH értékét 8-10 közöttire állítjuk be ügyelve arra, hogy a hőmérséklet a pH állítás közben ne emelkedjék, majd a reakcióelegyet kb. 10°C-ra hagyjuk felmelegedni. A kapott terméket extrakciót. követő bepárlással izoláljuk, és szükség esetén oszlopkromatográfiás módszerrel tisztítjuk, s végül kívánt esetben savaddíciós sóvá alakítjuk. A találmány szerinti eljárás értelmében ezután a ,11 általános képletű-ahol R jelentése formil-csoport - ciklo-vinkrisztint vinkrisztinné redukáljuk. A redukciót valamely alkáli-fém-bórhidriddel alkalmas szerves oldószerben, célszerűen valamely róvidszénláncú a ifás karbonsavban végezzük. A reakciót előnyösen szobahőmérsékleten hajtjuk végre, majd a terméket a redukálószer fölöslegének eHávolitása után extrakciós és bepárlásos módszerrel izoláljuk. A találmány szerinti eljárás legfőbb előnye, hogy nagytisztaságú vinkrisztint kaphatunk ilyen úton. További előny az, hogy az eljárás használható abban az esetben is, amikor bizonyos oxidációs reakcióban, vagy kromatográfiás úton olyan vinkrisztint kapunk, mely több-kevesebb ciklovinkrisztint ttu-talmaz. Az ilyen esetben elvégzett alkáli iém-bór-hidrides reakció révén kifogástalan •'■ïnkriBztin nyerhető. A találmány szerinti eljárással kapott vinkrisztin gyógyszerkészítésben közvetlenül felhasználható. 1. példa Vinkrisztin 53 mg (0.06 mmol) ciklovinkrisztin 5 ml absz. jégecetben készült oldatéhoz szobahőmérsékleten, részletekben, nátrium-bórhidridet adagolunk feleslegben (40 mg). A reakció lefutását vékonyrétegkromatográfiásan követjük (Merck Kieselgel 6OF25«, Rf kiindulási E.nyagiterniék). A reakció végpontján (~2-3 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 3
