192646. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új N-alkil-peptid-aldehidek előállítására

1 192 646 2

tot (2. példa, 2. lépés) feloldunk 5 ml ionmentes víz és 15 ml etanol elegyében, hozzáadunk 0,2 g 10%-os PdIC katalizátort és hidrogénezzük. A katalizátort kiszűrjük és kétszer 10 ml ionmentes vízzel mossuk.

A szűrletet és mosó folyadékot 15-20- 102 Pa nyo- 5 máson max. 40 °C-os fürdőről 5—10 ml-re töményítjük, majd ionmentes vízzel 20 ml-re hígítjuk, és ellenőrizzük, hogy a pH 6,0-6,5 között van-e. A pH-t szükség szerint módosítjuk 0,1 n kénsavval, illetve OH- ciklusú ioncserélő gyantával (pl. AG 1x8), 10 s végül az oldatot lefagyasztjuk és liofilizáljuk. 0,85 g (80%) cím szerinti terméket kapunk.

R® =0,35-0^9

Elemzési eredmény a C2 2 H3 4 03 N6 ,H2 S04. 3(H2 O) 1 g

(566,67) képletre vonatkoztatva:

számított: C% = 46,60;H% = 7,47;N% = 14,82;

S% = 5,66;

talált : C% = 45,5; H% = 7,4; N% = 14,3;

S% = 5,2. 20

A kündulási N,N-dimetil-D-fenilalanil-L-prolin-hidrátot az alábbiak szerint állíthatjuk elő :

11,9 g (0,03 mol) benzil-oxi-karbonil-D-fenilalanil-L-prolint (1. példa, B. lépés) feloldunk 200 ml 50%-os vizes metanolban, hozzáadunk 9,7 ml (kb. ^g 0,12 mól) 37%-os vizes formaldehid-oldatot és 6 g 10%-os Pd/C katalizátort, majd hidrogénezzük. A reakció előrehaladását rétegkromatográfiával követjük az etil-acetát-piridin-ecetsav-víz (30206:11) rendszerben (a kiindulási anyag és a végtermék Rf értéke 0,95, illetve 0,45). A reakció végén a katalizátort kiszűrjük, kétszer 50 ml vizes metanollal mossuk és az egyesített oldatokat 20—25 millibár nyomáson 40 °C-os fürdőről bepároljuk. A maradékot feloldjuk 60 ml etilacetátban, hozzáadunk 0,5 ml vizet és 5—10 °C-on állni hagyjuk éjszakán át. A kivált kristályokat kiszűrjük, kétszer 15 ml 5-10 °C-os etilacetáttal mossuk és vákuum exszikkátorban szárítjuk paraffin-forgács, kénsav és kálium-hidroxid mellett. 6,5 g (67%) cím szerinti terméket kapunk. 4q

Op.: 228-229 °C. [a]^° = -159° (c=l, vízben).

Elemzési eredmény a 6H2203N2 ,H20 (308,37) képletre vonatkoztatva: számított: C% = 62,31; H% = 7,85;N% = 9,08; talált: C% = 62,5; H% = 8,0; N% = 8,95. 45

3. példa

N-Etil-D-fenilalanil-L-prolil-L-arginin-aldehid-szulfát előállítása

1. lépés: N-benzil-oxi-karbonil-N-etil-D-fenilalanil-L-prolil-Nco-benzil-oxi-karbonil-L-arginin-laktám

2,1 g (0,005 mol) N-benzil-oxi-karbonil-N-etil-D- fenilalanil-L-prolint és 2,15 g (0,0055 mol) Na-t butil-oxi-karbonil-Nco-benzil-oxi-karbonil-L-arginin-laktámot (1. példa, E. lépés) az 1. példa 1. lépésében leír módon — arányos mennyiségű reagensek és oldószerek felhasználásával — átalakítunk, illetve kondenzálunk. A reakcióelegy feldolgozásánál, az oszlopkromatográfia során azonban a frakciók anyagtartalmát 8:2 arányú benzol-tetrahidro-furán rendszerben vizsgáljuk rétegkromatográfiával. A főterméket (R.=0,4—

0,5) tisztán tartalmazó frakciókat összegyűjtjük, 15-20- 102 Pa nyomáson bepároljuk kb. 40 °C-os fürdőről, majd a maradékot diizopropü-éterrel eldörzsöljük, szűrjük, diizopropil-éterrel mossuk és vá-1 uum exszikkátorban szárítjuk kénsav és paraffin-forgács mellett. 1,9 g (54%) cím szerinti terméket kapunk.

R* =0,75-0,85.

2. lépés: N-benzil-oxi-karbonil-N-etil-D-fenilala-nil-L-prolil-Nco-benzil-oxi-karbonil-L- arginin-aldehid

1,4 g (0,002 mol) N-benzil-oxi-karbonil-N-etil-D- fenilalanil-L-prolil-Nco-benzil-oxi-karbonil-L-argininlaktámot (3. példa, 1. lépés) az 1. példa 2. lépésében k írt módon — arányos mennyiségű reagensek és oldószerek felhasználásával — átalakítunk. 1,15 g (72%) cím szerinti terméket kapunk, mely az elemanalizis szerűit tartalmaz 1 mól ciklohexánt.

R* =0,55-0,65.

Elemzési eredmény a C3ÍH4607N6 .CeHj 2 (782,95) képletre vonatkoztatva:

számított : C% = 67,49 ; H% = 7,47; N% = 10,73 ; talált: C% = 67,6; H% = 7,5; N%=10,5.

3. lépés: N-etil-D-fenilalanil-L-prolil-L-arginin-al-dehid-szulfát

0,78 g (0,001 mol) N-benzil-oxi-karbonil-N-etil- Dfenilalanil-L-prolü-Nco-benzil-oxi-karbonil-L-arginin-aldehidet (3. példa, 2. lépés) az 1. példa 3. lépésében leírt módon — arányos mennyiségű reagensek és oldószerek felhasználásával — átalakítunk. 0,75 g (70%) cím szerinti terméket kapunk.

Rj =0,4-0,5.

Elemzési eredmény a C22H3403N6.5/6 (H2S04).

3.5 (H2 O) (575,27) képletre vonatkoztatva: számított : C% = 45,93 ; H% = 7,48 ; N% = 14,61 ;

S% = 4,64;

talált: C% = 46,1; H% = 7,6; N% = 14,2;

S% = 4,6.

A kiindulási N-benzil-oxi-karbonil-N-etil-D-fenilalanil-L-prolint az alábbi módon állíthatjuk elő :

A. lépés:N-etil-D-fenilalanin

8,25 g (0,05 mol) D-fenilalanint feloldunk 100 ml 20%-os vizes etanolban, hozzáadunk 5,65 ml (0,1 mól) acetaldehidet és 2 g 10%-os Pd/C katalizátort, majd két napon át hidrogénezzük. A katalizátort kiszűrjük, 60 ml 2 n sósavval mossuk, és a vizes oldatokat 4 n nátrium-hidroxiddal pH= 7-re állítjuk. A kivá’t anyagot kiszűrjük, háromszor 20 ml vízzel mossuk, és vákuum exszikkátorban szárítjuk vízmentes katcium-klorid mellett.

4,85 g (50%) cím szerinti terméket kapunk.

[a.TM —53°(c=l,0,l n nátrium-hidroxidban).

Elemzési eredmény a C, !H1502N (193,24) képletre vonatkoztatva:

számított : C% = 68,37; H% = 7,82; N% = 7,25; tál ílt : C% = 68,5; H% = 7,65; N% = 7,2.

B. lépés: N-benzil-oxi-karbonil-N-etil-D-fenilalanin

2.5 g (0,015 mol) N-etil-D-fenilalanint (3. példa, A. lépés) feloldunk 22,5 ml 2 n nátrium-hidroxidban, hozzáadunk 10 ml dioxánt, majd 5-10 °C-ra történő hmés után 2,5 ml (kb. 0,017 mól) benzil-oxi-karbonil kloridot és 3 órán át keverjük hűtés közben. A reakcióelegyet 40 ml vízzel hígítjuk és 30 ml dietil-éter petroléter 1:1 arányú elegyével kirázzuk. Három fázisú rendszert kapunk. Az alsó két fázist ismét kirázzul 30 ml dieti-éterrel, majd az egyesített dietil-éteres

8