192456. lajstromszámú szabadalom • Eljárás L-lizin előállítására
1 192 456 2 szerekkel a hőmérséklet és a pH-érték mérésére és szabályozására. A fermentációs közeg összetétele a következő (g/1): 50%-os cukortartalmú melasz 250,0 (ami 5%-os redukálóanyagtartalomnak felel meg) kukoricalekvár (50%-os szárazanyag-tartalommal) 40,0 (NH4)2S04' 25,0 KHoP04 5,0 KoHP04 5,0 A tenyésztést 30—33 °C hőmérsékleten, 7,0— 7,8 pH-érték és a teljes telítettség 20%-ának megfelelő p02-érték mellett végezzük. Addig fermentáljuk a tenyészlét, míg cukorkoncentrációja 0,5%-ra nem csökken. 55 óra alatt a fermentációs közegben 44,8 g/1 L-lizin termelődik (L-lizin-monohidrokloridra átszámítva). A cukorátalakulási tényező 0,36, az L-lizin-szintézis átlagos sebessége 0,81 g/1 óránként. 4. példa L-lizin-termelőként a Brevibacterium sp. E— 531 törzset alkalmazzuk. A frissen átoltott kultúrát 0,5 kRad/perc dóziserősségű és 0,5 kRad összdózisú sugárzásnak vetjük alá. A tenyésztést lombikban, az 1. példában leírtak szerint végezzük, a következő tápközeg alkalmazásával: 50%-os cukortartalmú melasz (ami 12,5%-os redukálóanyagtartalomnak felel meg) takarmányélesztő-hidrolizátum (fehérje—vitamin-koncentrátum 250,0 20%-os szárazanyag-tartalommal) 40,0 (NH4)2S04 25,0 kh2po4 5,0 k2hpo4 5,0 CaC03 10,0 55 órás fermentálás után a cukorkoncentráció 0,5%-ra csökken, és 48 g/1 L-lizin keletkezett (L-lizin-monohidrokloridra átszé: íítva). A cukorátalakítási tényező 0,38, a L-lizinszintézis átlagos sebessége óránként t' 37 g/1. 5. példa L-lizin-termelőként a Brevibacterium sp. E— 531 törzset alkalmazzuk. A frissen átoltott kultúrát 1,0 kRad/perc dóziserősségű és 1 kRad összdózisú sugárzásnak vetjük alá. Az inokulumot két lépcsőben tenyésztjük Az első lépcsőben az inokulumot rázólombik' jr a 3. példához hasonlóan a következő összetételű tápközegber állítjuk /lő: 50%-os cukortartalmú melasz 200,C (ami 10%-os redukálóanyagtartalomnak felel meg) takarmány élesztő-hidrolizátum (fehérje—vitamin-koncentrátum 20%-os szárazanyag-tartalommal) 40,0 (NH4)2S04 20,0 kh2po4 5,0 k2hpo4 5,0 CaC03 10,0 A második lépcsőben az inokulumot 5000 1 térfogatú oltófermentorban (amely 3000 1 tápközeget tartalmaz) a következő összetételű tápközegben tenyésztjük: (g/1) 50%-os cukortartalmú melasz 200,0 (ami 10%-os redukálószertartalomnak felel meg) takarmányéi esztő-hidrolizátum (fehérje—vitamin-koncentrátum 20%-os szárazanyag-tartalommal) 40,0 (NH4)2S04 20,0 KH2P04 5,0 K2HP04 4,0 A tápközeget az inokulum részére 1,2-105 Pa túlnyomáson 60 percig sterilizáljuk, majd lehűtjük és a tápközeg pH-értékét 25%-os vizes ammónium-hidroxid-oldat hozzáadásával 7,0— 7,2-re állítjuk be. A tápközeget a rázólombikból származó 2—3 1 inokulummal (0,1% a tápközeg térfogatra vonatkoztatva) beoltjuk. Az inokulumot 20—24 órán át 30—33 °C hőmérsékleten, 7,0—7,8 pH-érték és a teljes telítettség 20%-ának megfelelő p02-érték mellett tenyésztjük. A fermentációt ezután 50 000 literes fermentorban végezzük, amely az alábbi összetételű tápközeget tartalmazza 35 000 liter mennyiségben: 50%-os cukortartalmú melasz 250,0 (ami 12,5%-os redukálóanyagtartalomnak felel meg) takarmányélesztő-hidrolizátum (fehérje—vitamin-koncentrátum 20%-os szárazanyag-tartalommal) 40,0 ammónium-szulfát 25,0 kh2po4 5,0 K2HP04 5,0 szilikonolaj 1,0 A tápközeget folyamatos üzemű berendezésben 1,2-105 Pa nyomáson sterilizáljuk, majd 30—33 °C-ra lehűtjük és a pH-értéket 25%-os vizes ammónium-hidroxid-oldat hozzáadásával 7,0—7,2-re állítjuk be. A tápközeget 2800 1 inokulummal (8% a tápközegtérfogatra vonatkoztatva) beoltjuk. A fermentálást 30—33 °C hőmérsékleten, 7,0— 7,8 pH-érték és a teljes telítettség 20%-ának megfelelő p02-érték mellett végezzük 55 órán át. A fermentálás végén az L-lizin 52,7 g/1 mennyiségben dúsult fel a fermentlében (L-lizin-monohidrokloridra átszámítva). A cukorkonverzió 0,42, az L-lizin átlagos képződési sebessége 0,96 g/1 óránként. C. példa (összehasonlító példa) Az 1. példa szerint járunk el, de besugárzást nem alkalmazunk. 48 óra fermentálás alatt a cukorszint 0,5%-ra csökken. Az L-lizin bioszin’■ézisének átlagos sebessége 0,5 g/1 óránként. 5 10 15 20 25 30 33 40 45 50 60 65 4
