192452. lajstromszámú szabadalom • Eljárás heteropoliszacharidok előállítására
1 192 452 2 Izolátum NCIB 11 883 °C inkubálás 30° Indol — 7 H2S (TSI) — 7 Ölom-acetáitos papír gyenge + 7 MR — 7 VP __ 7 Arg Thornley — 7 CM3, növekedés °C-on (léginkubátorok, kivéve 4 °C-on) 5° _ 30° + 37° + CM1 (vízfürdő) 41° gyenge + 45°---5 IC 15 20 CM3, pH beállítása, növekedés pH-n 3 5 3 7,2 3 8 3 9 3 10 3 25 30 Szaporodás NaCl-ban 2% 2% 4% 5% 3 + 3 + 3 + 35 CaCl2-6H20 0,01 g Ionmentes víz 1 liter pH 6,8 Ezt az alaptáptalajt használtuk a szénforrás hasznosításának vizsgálatánál. PD ásványi a laptáp + 0,1% sterilre szűrt glüköz (P.D.G.) Szűri zselatin Oxoid No2 . .táptalaj 2,5% Zselatin (Difco) 12,0% Zselatinlemezek Oxoid CM3 tápagar 2,8% Zselatin 1,0% Tejes lemezek Sovány tej (Difco) külön sterilezve 3 % Pepton (Difco) 0,1% Marhahúskivonat Lalb-Lemco 0,1% NaCl 0,5% Agar 1,5% pH 7,4 autoklávban történő sterilezés előtt. Növekedés só jelenlétében 2, 3, 4 és 5% NaCl tartalmú alaptáptalajt készítünk Hayward és Hodgkiss (1961) eljárása szerint. A tenyészeteket inkubáljuk. Növekedési faktor vizsgálata Üvegben desztillált vízzel készített PDG táptalajt egyenes drótszállal beoltva három tenyészetet készítünk. Ha körülbelül 4 nap alatt megfelelő növekedést észleltünk, az azt jelentette, hogy nincs abszolút növekedési faktor igény. Szénforrás hasznosítása 0,1% sterilre szűrt kizárólagosan használt génforrást tartalmazó PD táptalajt beoltunk, és a tenyészetet 14 napig inkubáljuk. 3-ketolaktóz-termelés (De Ley-módszer) * 1 2 Irodalmi hivatkozások: 1. Bergey’s Manual of Determinative Bacteriology, 8th edn. (1974). (R. E. Buchanan and N. E. Gibbons, eds.). Baltimore: Williams and Wilkins. 2. Cowan, S. J. and Steel, K. J. (1974). Manual for the Identification of Medical Bacteria Cambridge University Press. A kiválasztott táptalajok és módszerek CM1 Oxoid CM1 táptalaj; CM3 Oxoid CM3 tápagar; CM55 Oxoid CM55 véres agar; mindhárom az Oxoid Ltd., Wade Rd., Basingstoke, Hants, Nagy-Britannia terméke. Pallérom és Doudoroff 1972 módosított ásványi alaptáp (PD) (A. Rév. Phytopathol 10, 73) Na2HP04 • 12HaO 6,0 g KH2P04 2,4 g NH4C1 1,0 g MgS04-7H20 0,5 g FeCl3-6H20 0,01 g Savtermelés szénhidrátból 40 Hayward és Hodgkiss (1961) oxidációs-fermentációs táptalaját (O-F) 1% sterilre szűrt szénforrással egészítjük ki. A csöveket beoltjuk és 14 napig inkubáljuk. A National Collection of Industrial Bacteria 45 arra a következtetésre jutott, hogy az NCIB 11 883 a patogenitástól függően A. radiobacter vagy A. tumefaciens törzsnek tekinthető. Az izolátum atípusos, mivel nincs 3-ketolaktóz termelés. 50 A találmányt a továbbiakban példákkal világítjuk meg. 1. példa Az NCIB 11 883 sarjadzó baktérium 55 poliszacharid termelése A poliszacharid termelés kimutatása az aktív szaporodási szakaszban történik. Táptalaj-összetétel g/1 60 (A) (NH4)2 • S04 0,75 g kh2po4 0,75 g (B) MgS04 • 7H20 0,4 g FeS04 1 mol/l-es oldat 0,05 ml CaCl2 • 2H20 0,012 ml 65 IPP nyomelem oldat 2,5 ml 5
