192165. lajstromszámú szabadalom • Eljárás BBM-1644 jelű antibiotikum előállítására
1 192165 2 9. táblázat BBM-1644 hatása P388 leukémiában Kezelési rend Anyag (napok sorszáma) Dózis, IP mg/kg/ ínj. MST napok Hatás MST T/CX AWC g 6. nap Túlélők 5(30) nap Neokar- 1., 4., 7 1,6 8,0 89-4,8 6/6 zino-0,8 10,5 117-4,3 6/6 sztatin 0,4 15,5 172-3,2 6/6 0,2 15,0 167-2,5 6/6 0,1 13,5 150-1,2 6/6 0,05 12,0 133-1,7 6/6 BBM-1644 1. 2,56 9,0 100-4/6 1,28 14,0 156-4,1 6/6 0,64 14,5 161-4,9 6/6 0,32 16,5 183-4,8 6/6 0,16 14,0 156-4,1 6/6 0,08 12,0 133-2,8 6/6 0,04 10,5 117-2,7 6/6 0,02 11,0 122-2,5 6/6 I., 4., 7. 1,28 23,5 261-3,3 6/6 0,64 19,0 211 ~3,5 6/6 0,32 18,5 206-4,3 6/6 0,16 14,5 161-3,8 6/6 0,08 12,0 133-3,3 6/6 0,04 12,0 133-2,9 6/6 0,02 10,0 111-2,5 6/6 0,01 10,0 111-1,9 6/6 QD 1 - 9 0,64 8,0 89-5,2 6/6 0,32 10,0 111-4,2 6/6 0,16 19,0 211-4,3 6/6 0,08 18,0 200-4,2 6/6 0,04 15,5 172-3,5 6/6 0,02 13,0 144-3,3 6/6 0,01 12,0 133-2,2 6/6 0,005 11,0 122-U 6/6 Kontroli 10’ sóoldat 8,0--10/10 106 sóoldat 9,0--0,3 20/20 105 sóoldat 11,0--10/10 10* sóoldat 14,0-10/10 Tumor inokulum: 106 aszcitesz sejt, i.p. (plusz titrálás) Gazdaállat : CDF, nőstény egér Toxicitás: <4/6 egér él az 5.napon Értékelés: MST = átlagos túlélési idő Hatás: T/CX - ^lt csoport MSJ x 1(W kontroll csoport MST Kritérium: a T/CX à 125értéket tekintjük szignifikáns tumorgátló aktivitásnak AWC = átlagos tömegváltozás („average animal weight change”) D = nap QD = naponta A BBM-1644 akut toxicitását egéren (dd Y törzs) határozzuk meg a vegyidet egyszeri i.p. alkalmazásával; az LD50 dózis 5,8 mg/kg. Mint a fentiekből látható, a BBM-1644 hatásos baktériumellenes hatást fejt ki Gram+ és saválló baktériumokkal szemben és így emlősök és más állatok baktériumok okozta fertőző betegségeinek gyógyászati kezelésére használható. Ezenfelül - egyéb baktériumellenes anyagokhoz hasonlóan - a megszokott módon alkalmazható, például orvosi és fogászati felszerelések fertőtlenítésére. A lizogén sejtekben való profán-indukció és egérnél a P388 leukémiával szemben mutatott jelentős tumorgátló hatásosság azt jelzi, hogy a BBM-1644 emlősöknél a daganatnövekedés gátlására is használható. Ezért a találmány szerint eljárással előállított vegyület alkalmas baktériumos fertőzés vagy rossz- 5 indulatú daganat által megtámadott gazdaállat gyógyászati kezelésére, mely szerint a gazdaállatnak a BBM-1644 vagy e vegyület hatóanyagként tartalmazó gyógyszerkészítmény hatásos baktériumellenes vagy tumorgátló dózisát alkalmazzuk. 10 A találmány körébe tartozik olyan gyógyszerkészítmények előállítása, melyek a BBM-1644 hatásos baktériumellenes vagy tumorgátló mennyiségét tartalmazzák közömbös, gyógyszerészetileg elfogadható hordozóval vagy hígítóval együtt. E ké- 15 szítmények parenterális adagolásra alkalmas bármilyen gyógyszerformában előállíthatok. A parenterálisan alkalmazandó, találmány szerinti készítmények közé steril vizes vagy nem-vizes oldatok, szuszpenziók vagy emulziók tartoznak. 20 Steril szilárd készítmények is előállíthatok, melyeket közvetlenül a felhasználás előtt steril vízben, fiziológiás konyhasóoldatban vagy más stril, injekció készítésére alkalmas közegben feloldunk. Nyilvánvaló, hogy a BBM-1644 antibiotikum 25 adott esetben előnyösen részesített mennyiségei változnak az illető készítmény összeállításától, az alkalmazás módjától és a szóban forgó kezelendő gazdaszervezettől és betegségtől függően. A szakembernek a szer hatását befolyásoló számos ténye- 30 zőt kell figyelembe vennie, például a kort, testtömeget nemet, étrendet, az alkalmazás idejét és útját, a kiválasztás sebességét, a gazdaszervezet állapotát, szer-kombinációkat, reagálási érzékenységet és a betegség súlyosságát. Az alkalmazás folyamatosan 35 vagy megszakításokkal történhet a maximális tolerált dózistartományon belül. Az adott körülményekhez a szakember az optimális alkalmazási ütemet szokásos dózismeghatározási próbák segítségével állapíthatja meg a fenti irányvonalak figye- 40 lem bevételével. A következő példák a találmány ismertetésére szolgálnak, a találmány körének korlátozása nélkül. A DEAE-cellulóz dietil-amino-etil-cellulóz ioncserélő. A sephadex G-50 gélszűrő (Pharmacia 45 Fine Chemicals, Inc.). A DEAE-sephadex A-50 dietil-amino-etil-funkciós csoportokat tartalmazó anioncserélő gél (Pharmacia Fine Chemicals, Inc.). A SephadexR a Pharmacia Fine Chemicals, Inc. védjegyzett termékei. 50 1. példa BBM-1644 fermentálása 55 Actinomadura sp. H710-49 jól fejlett tenyészetét tartalmazó ferde agart használunk 1% mannitot, 2% peptont és 1% élesztőkivonatot tartalmazó vegetatív tápközeg (100 ml, 500 ml-es Erlenmeyerlombikban) beoltására. Sterilezés előtt a pH-t 7,2- 60 re állítjuk be. A tápközeget forgó rázógépen (250 ford/min) 32 °C-on 72 óráig inkubáljuk és a tenyészet 5 ml-ét a fenti vegetatív tápközeggel azonos összetételű második vegetatív tápközegbe (100 ml) visszük át. Az első vegetatív tápközeghez használt 65 körülmények között tenyésztjük. A kapott tenyé-7
