192107. lajstromszámú szabadalom • Eljárás enkefolináz-gátló hatású szubsztituált depeptidek előállítására
i 192.107 2 A dózisformákat előnyösen úgy állítjuk elő, hogy az aktív dipeptidhez gyögyászatilag elfogadható és kompatibilis hordozót vagy segédanyagot, kötőanyagot, konzerválószereket, stabilízátorokat és ízesítő anyagokat adhatunk. A dózisformákat úgy állítjuk elő, hogy a hatóanyagot 5—100 mg/kg tartományban tudjuk adagolni, az ilyen dózisok Beadása 3—8 óránként történik. A fentebb leírt készítményekhez jellegzetes, gyógyászatilag elfogadható hordozók a következők: cukrok, így tejcukor, szacharóz, mannit és szorbit, keményítők, így például kukoricakeményítő, tápióka keményítő' és burgonyákéményítő, cellulóz és származékai, így nátrium-karboxi-metil-cellulóz, etil-cellulóz és metil-cellulóz, kalcium-foszfátok, így dikalcium-foszfát és trikalcium-foszfát, nátrium-szulfát, kalciumszulfát, polivinil-pirrolidon, polivinil-alkohol, sztearinsav, alícálifö 1 dfém-sztearátok, így magnézium-sztearát és kalcium-sztearát, sztearinsav,növényi olajok, így földimogyoróolaj, gyapot magolaj, szezámolaj, olívaolaj és kukoricaolaj, kationos és anionos felületaktív anyagok, etilénglikol polimerek, béta-ciklodextrin, zsíralkoholok és szilárd gabona hidrolizátumok. 1. példa N-(l-karboxi-3 -fenil- po pil)-L-3-(3-tienü)-a Janii-L-a lan in a) N-tri(terc-butoxi-karbonil)-L-3-{3 ’-tienilj-alanin 2,0 g (11,68 mmól) L-3<3’-tienilj-alanint (Chemical Dynamics Inc.) 1,6 ml trietü-aminban szuszpendálunk és 2,6 g di(terc-butil)-dikarbonátot 22 ml dimetU-formamid és 22 ml metanol (amelyet előzőleg mo lekül asz itán szárítunk) elegyében oldunk. A dimetil-formamidos és metanolos oldatot keverés közben a szusz penzió hoz adjuk és a keverést 24 órán át szobahőmérsékleten folytatjuk. A kapott homogén oldatot 330 ml vízzel hígítjuk és duomsawal savanyítjuk. A kapott oldatot ‘4. 80 ml etil-acetáttal extraháljuk, az extraktumot vízzel, majd telített nátrium-klorid oldattal mossuk és vízmentes magnézium -szulfáton szárítjuk. Az oldatot bepurolva 3,2 g dm szerinti vegyületet kapunk. b) N-tri(terc-butoxi-karbonil)-L-3-(3’-tienil)-«lanil- L-alanin-etil-észter A 3,2 g (11,68 mmól) a) lépésben előállított terméket 1,8 g - alanin-etil-észter-hidrokloriddal (Sigma Chemicals) és 3,3 g hidroxi-benztriazollal együtt 20 ml dimetil-forniamidban és 20 ml trietil-amii\ban szuszpendáljuk szobahőmérsékleten. Ezután 2,5 g N(N,N-dimetil-anáno-propil)'N’-etil-karbodiimid-hidro- Idoridot és 2 ml trietil-amint adunk a szuszpenzióhoz és a kapott elegyet éjszakán át kevertük. 300 ml vízzel hígítjuk a reakcióelegyet, majd 4.60 ml etil-acetáttal extraháljuk. Az egyesített extraktumokat 70 ml n nátrium-hidrogén-karbonát oldattal, 2.30 ml n citromsavval, 2.70 ml vízzel és 70 ml telített nátrium- Idorid oldattal mossuk. A kapott extraktumot vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk és az oldószert bepárolva 5,1 g dm szerinti terméket kapunk. c) N-tri(terc-butoxi-karbonil)-L-3-(3’-tienil)-alanil- L-alanin 4,4 g (11,8 mmól) b) szerint kapott terméket 30 ml metanolban oldunk. Az oldathoz 30 ml vizet,majd 1,1 g (14,2 mmól) nátrium-hidroxidot adunk 50s%-os vizes oldat formájában. A reakció elegyet szobahőmérsékleten keverjük és 1 óra elteltével kovasavgél vékonyrétegen metanol-kloroform-ecetsav 5950,5 térfogatarányú elegyét használva vizsgáljuk, hogy tartalmaz-e még kiindulási anyagot. A keverést folytatjuk és a reakcióelegyet a fenti módon vizsgáljuk, míg a reakció teljessé válik és már nem tartalmaz az elegy kiindulási anyagot. Ezután a reakcióelegyet bepároljuk csökkentett nyomáson és a maradékot 30 ml vízzel keverjük: a kapott vizes olatot 230 ml metilénkloriddal mossuk és megasavanyítjuk, amikor gumiszerű anyag válik ki. Ezt a kiválást etil-acetáttal extraháljuk és az extraktumot vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk,majd az etil-acetátot eltávolítva 5,8 g dm szerinti terméket kapunk. d) L-3-(3’-tienil)-alanil-L-alanin-trifluor-acetát A c) lépésben kapott 5,8 g anyagot 15 m] metilénkloriddal oldjuk keverés közben. 15 ml trifluor-ecetsavat adunk hozzá és az elegyet 2 óra hosszat keverjük szobahőmérsékleten. A reakdó lefutását kovasavgél vékonyrétegen, metilén-klorid:metanol:ecetsav 95: 5:0,5 térfogatarányúelegyéthasználva, kromatográfiásan követjük. Amikor már a rétegen a reakcióelegyben kiindulási anyag nem mutatható ki, az elegyet bepároljuk és a gumiszerű maradékot benzolban oldjuk és a benzol eltávolítása után ismét benzolban oldjuk, majd a benzol ledesztiUálása után 7 g cím szerinti terméket kapunk. e) N-(l -karboxi-3-fenil-propil)-L-3-(3’-tienil)-alanil -L-alanin 3,75 g (13,4 mmól) L-3{3-tienil)-alanil-L-alanintrifluor-acetát és 11,0 g (13,4 mmól) 2-oxo-4-fenilvajsav vizes olatának pH-ját 1 n nátrium-hidroxid oldattal 6,8-ra állítjuk. 2,2 g (34,8 mmól) nátrium-ciano-bórhidridet adunk az oldathoz egy részletben és a kapott reakcióelegyet szobahőmérsékleten 64 órán át keverjük. Az oldat pH-ját ezután 29-re állítjuk 1 n sósav oldattal A kivált gumiszerű terméket néhányszor vízzel mossuk, majd 20 ml acetonitrüben oldjuk és az olatot 10 ml éterrel hígítjuk. Hűtésre szilárd anyag válik ki, amelyet szűréssel elkülönítünk. Az anyalúgot hűtőszekrényben állni hagyjuk két napig, mialatt fehér szüárd anyag válik ki. Ezt a szilárd anyagot szűrjük, acetonitrillel mossuk és szárítjuk, így a cím szerinti vegyüfet N-(L-1) diaszteieomeijét kapjuk amely I92,5-193°C-on ohad. Az először említett szilárd kivált anyagot etanolból átkristályosítva az N-(D-l) diasztereoizomert kapjuk, olvadáspontja 163—164°C. 2—7. példa Az 1. példában leirt eljárást követve és a megfelelő kiindulási anyagokat alkalmazva a következő vegyületeket és diasztereomer elegyeket állítjuk elő : 2. N-(L-1 -karboxi-3-fenil-propil)-L-fenü-alanü-L- alanin, op. 176-179°C, 3. N-(D,L-1 -karboxi-3-fenü-pronil)-L-3-(2’-naftil)alanü-L-alanin, op. 149—155 c, 4. N-(L-1 -e toxi-karbonil-3-fe nil-propü) -L-3-(2 ’-tienil)-alanil-L-alanin-maleát, op. 124—125°C, 5. N-(D,L-l-karboxi-etü)-L-fenil-alanil-L-alanin, op 125—135°C, 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 6
