191990. lajstromszámú szabadalom • Eljárás szubsztituált vinil-3-cefém-4-karbonsav-származékok előállítására
29 191990 30 összegyűjtjük és 3 ml metanolban oldjuk. Az oldathoz 4,5 ml (4,5 millimólj 1M nátrium-2- etil-hexanoát-oldatot adunk (etil-acetátban oldva) és a keveréket egymás után 50 ml éterrel és 50 ml izopropil-éterrel hígítjuk. A csapadékot szűréssel összegyűjtve 710 mg nyers 24. vegyületet kapunk, melyet 20 ml vízben oldunk és PrepPAK/Cis patron 50 ml tartalmával megtöltött oszlopon (Waters) kromatografálunk. Az oszlopot vízzel és 10% metanollal eluáljuk. A kívánt terméket tartalmazó frakciókat összegyűjtjük (HPLC- vel ellenőrizve), és 5 ml-re bepárolva és liofilizálva 182 mg (31%) kívánt terméket kapunk, melynek olvadáspontja 200 °C és becsült tisztasága 50% (HPLC). IR (KBr): 1760, 1660, 1600, 1400, 1180, 1100 cm-1. UV (foszfátpuffer pH 7): Xoax nnifc) 282 (5500). NMR (DzO): 5 ppm 1,60 (3H, d, 6Hz, -C-CHa), 3,12 (1H, d, 18Hz, 2-H), 3,48 (111, d, 18 Hz, 2-H). 5,03 (1H, d, 4,5 Hz, 6-H), 5,62 (1H, d, 4,5 Hz, 7-H), 5,93 (1H, d, 10Hz, vinil-H), 5,2-5,8 (1H, m, vinil-H), 7,41 (5H, s fenil-H). 21. eljárás Benzhidril-7ß-[D-2-( terc-butoxi-karbonil-amino)-2-fenil-acetamido]-3-[(Z)-3-klór-l-propen-l-il]-3-cefem-4-karboxilát (25. vegyület) 2 g (2 millimól) 22. vegyület 50 ml kloroformmal készült oldatához 2 ml (2 millimól) In NaOH-oldatot tartalmazó 50 ml vizet adunk és a keveréket 3 percig rázzuk. A szerves fázist elválasztjuk, és vízzel és telített NaCl-oldattal mossuk. A szárított kloroformos oldatot csökkentett nyomáson 30 ml-re bepároljuk. Hozzáadunk 2 ml klór-acetaldehidet, a keveréket szobahőmérsékleten 1 óráig keverjük, és vízzel, majd telített NaCl-oldattal mossuk. A szerves oldatot szilikagél (Wako-gel C-200, 50 g) oszlopon kromatografáljuk, kloroformmal eluálva. A kívánt frakciókat összegyűjtve és szárazra párolva 534 mg nyers 25. vegyületet kapunk. IR (KBr): vW 1780, 1710, 1660, 1500, 1490, 1360, 1240, 1210, 1150 cm'1. Gyenge NMR spektruma miatt e minta szerkezetét nem tudtuk azonosítani. 22. eljárás Nátrium-7/3-(D-2-amino-2-fenil-acetamido)-3-[(Z)-3-klór-l-propen-l-ill-3-cefem-4- -karboxilát (26. vegyület, BB-S1066) 427 mg (0,7 millimól) 25. vegyület és 1,5 ml trifluor-ecet.sav elegyét 10-15 °C-on 15 percig keverjük, és éter/izopropil-éter (1:1) elegyével hígítva 330 mg halványsárga 16 csapadékot kapunk, melyet szűréssel összegyűjtünk. A csapadékot 3 ml metanolban oldjuk és hozzáadunk etil-acetátban felvett 2 ml (2 millimól) nátrium-2-etil-hexanoátot, majd a keveréket 50 ml etil-acetáttal hígítjuk. A képződött csapadékot szűréssel összegyűjtve és éterrel mosva 244 mg nyers terméket kapunk. A nyers terméket 10 ml vízben oldjuk és PrepPAK-500/Cis patron (Waters) 50 ml töltetét tartalmazó oszlopon kromatografáljuk. Az oszlopot vízzel és 10% metanollal eluáljuk. A kívánt, 10% metanollal eluált frakciókat egyesítve, 5 ml-re bepárolva és liofilizálva 60 mg szilárd terméket kapunk; olvadáspont 200 °C (fokozatos bomlás). IR (KBr) \W 1760, 1660, 1630, 1360, 1120, 1070 cm-1. UV (foszfátpuffer): Xsa* nin (£) 243 (12 700), 200 váll (4200). 23. eljárás 7/}-[D(-)-2-Amino-fenil-acetamido]-3-[(Z)-l-propen-l-il]-3-cefem-4-karbonsav (24. vegyület, BB-S1065 ikerion-alak) (7 képletű vegyület) Difenil-nietil-7/j-[D-2-( tere- butoxi-karbonil-amino)-2-fenil-acetamido]-3-(l-propenil)-3-cefem-4-karboxilátot (23. vegyület, 1,5 g 2,34 millimól) 3 ml trifluor-ecetsavval kezelünk és az elegyet szobahőmérsékleten 20 percig keverjük. 100 ml éterrel hígítva 1,15 g (96%) nyers BB-S1065-Lrifluor-acetátot kapunk. IR (KBr): 0*ax 1760, 1670, 1200, 1130 cr1, UV (foszfátpuffer pH 7): Xux 283 nm (£ 8300). A trifluor-acetátot (1,1 g, 2,25 millimól) 20 ml vízben oldjuk és az oldatot PrepPAK/ /Cib latron (Waters) 100 ml töltetét tartalmazó oszlopon kromatografáljuk. Az oszlopot vízzel, 10% metanollal és 30% metanollal eluáljuk. A 30% metanolos eluátumot 10 ml-re bepároljuk. A kristályos terméket elválasztjuk. A terméket összegyűjtjük és acetonnal mossuk. Vákuumban foszfor-pentaoxid felett szárítva 505 mg (46%) tiszta BB-S1065 vegyületet (ikerionforma) kapunk; olvadáspont 180-183 °C (bomlás). Becsült tisztasága 95%. IR (KBr): \W 1750, 1690, 1590, 1400, 1350 cm-1. UV (foszfátpuffer pH 7): X»ax 282 nm. (E 8800). NMR (Ü20+NaHC03): í ppm 1,58 (3H, d, J=6Hz, C-CHs), 3,3 (2H, d, 2-H), 5,03 (1H, d, J=4,5 Hz, 6-H), 5,20, (Ili, s, CH-CO), 5,1-5,8 (1H, m, CH=C), 5,63 ( 1H, d, J=4,5 Hz, 7-11), 5,92 (111, d, J=12 Hz, CH=C), 7,4 (511, s, fenil-H). 24. eljárás D- ( — )—2— ( le/’c-Butoxi-karbonil-amino)-2- -(3-klór-4-hidroxi-fenil)-eoetsav (28. vegyület) 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
