191990. lajstromszámú szabadalom • Eljárás szubsztituált vinil-3-cefém-4-karbonsav-származékok előállítására
21 191990 22 gyűjtve 17,4 g (85,5%) 5. vegyületet kapunk, melynek olvadáspontja 170-180 °C. A szürletet 100 ml térfogatra bepároljuk és 500 ml éterrel hígítjuk. Ilyen módon további 1,1 g 5. vegyületet kapunk. A teljes kitermelés 18,5 g (91%). Az 5. vegyület bruttó kitermelése a 2. vegyületből 74,5%. Ez 87,5%-ig emelhető, ha a fenti tisztítási és izolálási műveletet elhagyjuk. IR (KBr): Oku, 1780, 1670, 1490, 1420, 1350, 1240, 1150, 1090 cm-1. NMR (DMSO): £ ppm 1,42 (9H, s, C-CHa), 3,45 (2H, széles s, 2-H), 5-5,4 (3H, m, 3-H és 6-H), 5,7 (1H, m, 7-H), 6,63 (2H, d, 9Hz, fenil-H), 7,1-7,45 (12H, m, fenil-H), 7,5-7,9 (15H, m, fenil-H). Elemanalizis C52H49N307SPI-re: C H N S Számított 61.36 4.85 4.13 3.15 Talált 61.26 4.82 4.11 3.92. 6. eljárás Benzhidril-7ß-[D-2-( terc-butoxi-karbonil-araino)-2-(í>-hidroxi-fenil)-acetamido]-3- -[(Z)-l-propen-l-il]-cef-3-em-4-karboxilát (6. vegyület) (5 képlet) 1|8 g (1,77 millimól) 5. vegyületet 100 ml kloroformban oldunk és az oldathoz 2 ml (2 millimól) In nátrium-hidroxidot tartalmazó 100 ml vizet adunk, és a keveréket 5 percig rázatjuk. A szerves fázist elválasztjuk, vízzel mossuk és vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk. A kloroformos oldatot leszűrjük és a szűrletet csökkentett nyomáson 50 ml térfogatra bepároljuk. 1 g acetaldehidet adunk hozzá, az elegyet szobahőmérsékleten 2 óráig keverjük és szárazra pároljuk. Az olajos maradékot szilikagéloszlopon (Wako-gel C-200, 50 g) kromatografáljuk, kloroformmal és kloroformmetanol (99:1) eleggyel eluálva. A kívánt frakciókat összegyűjtve és bepárolva 318 mg (28%) 6. vegyületet kapunk; olvadáspont 120-130 °C (bomlás). IR (KBr): Omuc 1780, 1670, 1710, 1490, 1360, 1210, 1150 cm-1. NMR (CDCh): 5 ppm 1,3-1,5 (12H, m, C-CH3), 3,22 (2H, széles s, 2H), 4,90 (1H, d, 4,5 Hz, 6-H), 5,15 (széles s, SH-CO), 5,5-6,1 (3H, m, CH=CH és 7-H), 6,63 (2H, d, 9Hz, fenil-H), 6,91 (1H, s, CH-Ph), 7,09 (2H, d, 9Hz, fenil-H), 7,2-7,5 (10H, m, fenil-H). 7. eljárás Nátrium-7ű-[D-2-amino-2-(p-hidroxi-fenil)-acetamido]-3-[ (Z)-l-propen-l-il]-3-cefem-4-karboxilát (7. vegyület, BMY-28 100 nátriumsó) (6 képlet) 318 mg (0,48 millimól) 6. vegyület és 2,5 ml trifluor-ecetsav (TFA) keverékét szobahőmérsékleten 1 óráig keverjük, majd 50 ml éterrel és 50 ml izopropil-éterrel higiljuk. A kivált csapadékot szűréssel összegyűjtjük és éterrel mossuk. A 7. vegyület trifluor-acetátját (188 mg, 77%) kapjuk, melyet 2 ml metanolban oldunk. Az oldathoz etil-acetáttal készült 2 ml (2 millimól) nátrium-2-etilhexanoát-oldatot adunk, a keveréket 30 ml etil-acetáttal hígítjuk és az elvált csapadékot szűréssel összegyűjtjük, éterrel mossuk és vákuumban foszfor-pentaoxid felett szárítjuk. 144 mg (a 6. vegyületből 73%) nyers 7. vegyületet kapunk. A nyersterméket (135 mg) 10 ml vízben oldjuk és az oldatot oszlopon (25 mmxlOO mm) mintegy 20 ml Pre- Pak-500/Cis (Waters) töltetet használva. Az oszlopot vízzel eluáljuk és a kívánt terméket tartalmazó eluátumot bepárolva és liofilizálva 93 mg (67%) 7. vegyületet kapunk. Olvadáspont 200 °C (fokozatos bomlás). Becsült tisztaság 60% (HPLC). IR (KBr): 0«ax 1760, 1660, 1590, 1400, 1360, 1250 cm"1. UV (foszfátpuffer): X««* 227 (11 300), 280 (8200) nm (e). NMR (D2O): & ppm 1,65 (3H, d, 6Hz, C-CHí), 3,21 (1H, d, 18Hz, 2-H), 3,52 (1H, d, 18Hz, 2-H), 5,12 (1H, d, 4,5 Hz, 6-H), 5,68 (1H, d, 4,5 Hz, 7-H), 5,5-5,9 (1H, ra, vinil-H), 5,95 (1H, d, 11,5 Hz, vinil-H), 6,94 (2H, d, 8Hz, fenil-H), 7,36 (2H, d, 8Hz, fenil-H). 8. eljárás 7ß-[D-2-Amino-2-(p-hidroxi-fenil)-acetamido]-3-[(E)-l-propen-l-il]-3-cefem-4-karbonsav (8. vegyület, BB-S1067) A 7. eljárásban kapott nyersterméket, a nyers 7. vegyületet (11,9 g) kromatográfiás tisztítás előtt 50 ml 0,01M foszfátpuffer (pH 7,2)-metanol (85:15) elegyben és az oldat pH-ját 6n sósavoldattal 6-ra állítjuk be. Az oldaton preparatív HPLC-t végzünk (PrePak-5OO/C18, System 500, Waters), eluensként 15% metanolt tartalmazó 0,01M foszfátpuffert (pH 7,2) használva. Az eluciót analitikai HPLC-vel követjük és azt találjuk, hogy az első 4 literes frakció cisz-izomert (BMY-28 100) tartalmaz. A transz-izomert tartalmazó második 1 literes frakciót összegyűjtjük és 500 ml térfogatra bepároljuk. Az utóbbi pH-ját 3-ra állítjuk be híg sósavoldattal és HP-20 oszlopon (100 ml) kromatografáljuk 1-1 liter vízzel és 30%-metanollal eluálva. Az utóbbi eluátumot (körülbelül 300 ml térfogat) 10 ml-re bepároljuk és liofilizáljuk. 290 mg nyers transz-izomert kapunk (55% tisztaság). Az anyagot 100 ml 50% metanolban oldjuk és aktív szénnel kezeljük. A szűrletet 20 ml térfogatra bepároljuk és éjszakán 5 °C-on állni hagyjuk. A termék színtelen prizmák alakjában kristályosodik ki, melyeket szűréssel összegyűjtünk és vákuumban meg-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 12
