191944. lajstromszámú szabadalom • Eljárás antimikrobás aktivitású benzoesav-származékok előállítására
11 191944 1 2. Táblázat A minimális baktericid koncentráció értékeket (MBC) ug/ml-ben fejezzük ki A vegy. jele 1 Baktérium 2 törzs 3 sorszáma 4 5 SR 41945 500 750 250 500 500 CM 40937 600 200 100 800 600 CM 40939 500 800 1300 1000 1000 SR 41709 250 100 500 400 100 A fenti eredményekből kitűnik, hogy a találmány szerinti vegyületek a vizsgált bak- 15 térium törzseken széles spektrumú hatást mutatnak. A találmány szerinti vegyületek gomba-ellenes hatását agar táptalajon hlgitási sorozatos módszerrel szintén meghatároztuk. 20 20%-os tetraglikollal a különböző vegyületek törzsoldatait állítjuk elő, és a törzsoldatokból 1/2-es faktorú geometriai sorozat szerinti hígításokat készítünk. E hígítások mindegyikéből 2-2 ml-t és Sabouraud-Dex- 25 tróz-Agar agar táptalajból 1,8 ml-t Petri-csészébe helyezünk. Az élesztőgombák vizsgálatára való inoculum 27 °C hőmérsékleten 48 órán át Sabouraud folyékony táptalajon tartott kultúra ^0 1/20-ad hígításából áll, miß dermatofiták és fertőzések vizsgálatára szolgáló inokulumot Sabo iraud agar táptalajban lévő kultúra gyűjtésével, 5 ml folyékony Sabouraud kultúrál használva állítjuk elő. Az inokulumot több oldalú inokulátorral a Petri-csészék felületére helyezzük. Élesztőgombák esetén 48 órán 27 °C-on végzett inkubáció után, dermatofiák esetén 7 napos 27 °C-on végzett inkubálás után, míg a fertőzések esetén 4 napos 27 °C-on végzett inkubélás után értékelünk. A minimális inhibitor koncentrációt (MIC) - mely azt a legkisebb koncentrációértéket jelenti, ahol növekedés nem megy végbe - wg/ml-ben fejezzük ki. Az eredményeket a 3. táblázatban foglaltuk össze. 3. Táblázat Gomba-ellenes hatás A vegy. jele élesztőgombák dermatofiták fertőzések SR 41709 150-750 19-75 750 SR 41945 750 9-75 750 CM 40939 200-500 25 200-500 CM 40937 100-500 50-100 100-500 A kísérleteket 22 élesztőgomba, 18 dermatofita és 18 fertőző törzzsel végeztük. A megadott eredmények (MIC, /ug/ml-ben kifejezve) az egyes típusokra vonatkozó szélső értékeket szemléltetik. A 3. táblázat adatai azt mutatják, hogy a találmány szerinti vegyületek a vizsgált gombák ellen jó hatásúak. A találmány szerinti vegyületekkel szembeni toleranciát tengeri malacokon tanulmányoztuk. Az állatok szőrzetét a hét középvonalának valamelyik oldalán leborotváljuk és ezt minden két napban megismételjük. A találmány szerinti vegyület vizes vagy alkoholos oldatának 0,2 ml-nyi mennyiségével a leborotvált területen hatos csoportokat kezelünk. Amennyiben alkoholos oldatokat alkalmazunk, az állatok kontroll csoportját az egyik oldalon alkohollal kezeljük. A bőr tolerancia előzetes vizsgálata céljából 3 hétig hetente 6 napon át, a 7. nap kivételével, naponta egyszer végzünk keze-45 lést. Megállapítjuk eritéma, bór-erupció vagy hiperkeratózis jelenlétét és ezek rögzített skála szerinti intenzitását. A bőr érzékenységi tesztet 2 hetes szünet után ugyanazokon az állatokon végezzük. 50 A kezelés 1 hétig tart, az előzővel megegyező módon. A helyi tolerancia vizsgálatánál ismertetett szempontok és skála szerint értékelünk. Tengeri malacokon továbbá vizsgálatot végeztünk a találmány szerinti vegyüle- 55 tek fototoxikus és fotoallergiás hatásának meghatározása céljából. A vizsgálati módszert az irodalom ismerteti (J. Unkovic, G. Mazue, J. Girard: Sciences et Techniques de l’Animal de laboratoire, Vol. 8 (3), 149-160 (1983), 60 mely L. C. Harber és munkatársai (Arch. Dermatol., 1967, Vol. 96, 646-656) és L. J. Vinson és munkatársai (J. Soc. Cosm. Chem., 1966, Vol. 17, 123-130) által leirt módszer alkalmazása.) 65 Tengeri malacokon a vizsgált vegyületek egyikével szemben sem mutatkozik csekély 7
