191849. lajstromszámú szabadalom • Eljárás gyógyászati hatású vegyületek és ezeket tartalmazó készítmények előállítására új hromobacterium violaceum törzs felhasználásával

13

191849

14

\

A fenti eredményekből kitűnik, hogy 0,05 xng/kg Arphamenine A adagolásával jelentős sejtkőzvetitett immunitást növelő hatást értkúnk eh

3. Arphamenine rákellenes hatásának vizsgálata

Ehrlich tumor esetén

10* db Ehrlich ascites carcinoma tumor sejtet szubkután 8 hetes, nőstény ddY egerek (Charles River Inc., Japán) farába transzplantáltunk. A transzplantáció napját, 15 o-val jelöltük. Ezt követően 0,05, 0,005 mg/kg fiziológiás sóoldatban oldott vizsgálandó anyagot adagoltunk orálisan az

állatoknak, az adagolást minden második pon, az 1. nappal kezdődően a 15. napig gezve. A 30. napon meghatároztuk a daga tok nagyságát (kisebb átmérő2 x nagyi 5 átmérő/2) és súlyát. A daganat-gátló hat (tumor inhibition rate, TIR) százalékosan következő összefüggéssel számítottuk ki:

C-T

10 TIR%=----------- x 100

C

amelyben C a kontroll állatok daganataim súlyát és méretét, T a kezelt állatok dagam tainak súlyát és méretét jelenti.

A vizsgálati eredményeket a következő í táblázatban foglaltuk össze.

5. Táblázat

Vizsgált vegyület

Adag

(mg/kg)

Daganat átlagos mérete (mm3)

TIR

(X)

Daganat átlagos súlya (g)

TIR

(%>

Arphamenine A

0.5

4467±4311

15.8

2.62x1.90

1.9

u.a*

0.05

3120±3584

41.2

1.66x1.50

37.8

U.ÉU

0.005

2378±3138

55.2

1.62X1.44

39.3

BeBtatin

0.05

2089x1946*

60.6

1.47X0.92**

44.9

(összehasonlító

vegyület)

Kontroll-5305x2027

0

2.67x0.84

0

* P 0,1 (T-teszt)

** P 0,05 (T-teszt)

A fenti eredmények azt mutatják, hogy az Arphamenine A 0,05 és 0,005 mg/kg dózisnál gazdaközvetített antitumor hatást mutat.

Ily módon az Arphamenine A-ról és B-ról bizonyítható, hogy sejtkőzvetitett immunitást fokozó hatásuk van normál állatoknál, befolyásolják a rákos daganatok által elnyomott sejtkőzvetitett immunitást és gazdaközvetltett antitumor hatásúak.

Egereken végzett akut mérgezőhatás vizsgálataink azt mutatták, hogy az Arphamenine A 250 mg/kg iv dózisban, és az Arphamenine B 150 mg/kg iv dózisban nem halálos, igy mindkettő veszélytelen anyagnak tekinthető.

Mint a fentiekből kitűnik, az Arphamenine A és B Önmagában adagolva fokozza az immunitást és gazdaközvetített antitumor hatású, így e vegyületek alkalmasak immunopotenciáló é6 rákkal szembeni immunitást befolyásoló hatás kifejtésére, vagy alkalmasak rákos betegségeknél alkalmazott különböző kemoterápiás szerek hatásának fokozására.

Az Arphamenine-t hatóanyagként tartalmazó gyógyszerkészítmények előállításánál az Arphamenine A-t vagy B-t vagy mindkettőt,

40 vagy gyógyászatilag elfogadható sóit a szokásos hordozóanyagokkal és kívánt esetben további különböző kemoterápiás szerekkel keverjük össze. Az Arphamenine sói alatt értjük az Arphamenine-karboxilátokat, azaz 45 azokat a sókat, amelyeket az Arphamenine karboxilcsoportja gyógyászatilag elfogadható kationokkal, mint például ammóniumionokkal vagy alkálifém-ionokkal, mint például nátrium- vagy káliumionokkal, vagy alkáliföldfém- 50 -ionokkal, mint például kalcium- vagy magnéziumionokkal képez, valamint a savaddiciós sókat, amelyek az Arphamenine guanidilvagy aminocsoportja és gyógyászatilag elfogadható szervetlen - mint például sósav - 55 vagy szerves - mint például ecetsav - savak között képződnek,

A találmány szerint előállított vegyületeket vagy készítményeket orális-, injekciózható- vagy végbélkúp-készítmények formájában 50 alkalmazhatjuk.

A liofilizált injekciók készítésénél a hatóanyagot pH-beállitó-, puffer-, stabilizálóvagy kötőanyagokkal keverjük el, majd a keveréket ismert módon fagyasztva szárítjuk. 65 Szubkután-, intramuszkuléris- vagy intravé-8