191789. lajstromszámú szabadalom • Eljárás esztriolészter-származékok előállítására
1 2 A találmány tárgya eljárás új ösztriol-észter-származékok és az azokat tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására. Az ösztriol, kémiai nevén 1,3,5( 10)-ösztratrién-3,16a,17j3-triol fontos természetes ösztrogén. Az ösztriolt készítmények hatóanyagaként használják, ösztrogének helyettesítésére, ösztrogén-hiánybetegségek esetén, például nők posztmenopauzája esetén. Mivel az ösztriol a szervezetből gyorsan kiválasztódik, azt rövid időközönként (1—3-szor naponta) kell adagolni. Ismertek az irodalomból bizonyos ösztriol-észterek, például a Chem. Pharm. Bull., 11 (1963), 510-514 cikkéből az ösztriol-triészter, 16,17-diészter és 16-monoészter, illetve az Acta Chem. Scand., 22 (1968), 254 cikkből a 3-acetát-3,16-diacetát és a 16,17-diacetát. Az ösztriol-szukcinát kivételével, melyet naponta háromszor kell adagolni, ösztriol-észtereket a gyógyászatban nem alkalmaztak. Az ösztriol eddig nem ismert, 2-10 szénatomos monokarbonsavakkal alkotott 3,17/3-díészterei lényegesen felülmúlják az ösztriol ösztrogén hatását és annak időtartamát. A találmány szerinti hatóanyagok az (1) általános képletnek felelnek meg. A képletben az R csoportok azonosak vagy különbözőek lehetnek, és alifás, cikloalifás-alifás vagy aromás monokarbonsavból vezethetők le. Előnyös R acilcsoportok az ecetsav, propionsav, vajsav, izovajsav, pivalinsav, valeriánsav, kapronsav, önantsav, oktán- és dekánsav, valamint a ß-ciklopentil-propionsav és benzoesav acilcsoportjai. Az új ösztriol-észterek ösztrogén hatását és depó tulajdonságait az ösztriollal (E3) összehasonlítva Rubin (Endocrinology, 49. (1951), 429—439) szerint módosított méhfejlődési kísérletben, eltávolított petefészkű patkányokon határoztuk meg. Körülbelül 150 g súlyú, kifejlett patkányokat, melyeknek petefészkét eltávolítottuk (hat állat dóziscsoportonként), egyszeri alkalommal a vizsgált hatóanyaggal, illetve referenciaanyaggal (ösztriol) kezeltünk. Az anyag adagolásának napja a kísérlet első napja (dx). Az anyagokat benzil-benzoát-ricinusolaj 4 : 6 elegyben oldottuk, és naponta 0,2 ml-t adagoltunk szubkután (se). Egy kontrollcsoportnak csak 0,2 ml hordozót adagoltunk. A hatékony ösztrogének az eltávolított petefészkű patkányokon a vaginális felhámon jellemző változásokhoz vezetnek. Hatásukra a vaginális felhám erős burjánzása és a felületi sejtek elszarusodása lép fel. A kísérlet során naponta egyszer vaginakenetet készítettünk. A kenet képét citológiásan vizsgáltuk. A következő ciklusállapotokat különböztettük meg: 1) Diösztnisz (leukociták és maggal rendelkező felhámsejtek), 2) Proösztrusz (magot tartalmazó felhámsejtek), 3) ösztrusz (mag nélküli szarusejtek), 4j Metösztrusz (mag nélküli szarusejtek, leukociták, felhámsejtek). A vaginában kifejlett ösztrogén hatás időtartamát az ösztrusz fennmaradási napok számával határoztuk meg. Az alábbi, I. táblázatból látható, hogy ösztriol (E3) adagolása után az állatok egy napig maradtak ösztrusz állapotában, egyenértéknyi mennyiségű E3-dipropionát, E3-dibutirát, E3-diizobutirát, E3- divalerianát és E3-dihexanoát esetén az ösztrusz időtartama 8,16,23,28 illetve 27 nap. I. táblázat ösztrogén hatás időtartama vaginában ösztriol (E3) illetve különböző 3,17-diészterek egyszeri injekciója (s. c.) hatására petefészküktől megfoszfott patkányokon Veevület____________________________ösztrusz ösztriol (E3) 100/jg s. c. 1 nap E3-dipropionát 139 jug s. c. 8 nap E3-dibutirát 149 /tg s. c. 16 nap E3-diizobutirát 149 pg s. c. 23 nap E3-divalerianát 158 /ug s. c. 28 nap E3-dihexanoát 168 jug s. c. 27 nap A 11. táblázatban az ösztriol (E3) szérum-koncentráció (pmól/1) időbeli lefutását adjuk meg ösztriol (E3) és különböző E3-3,17-diészterek egyszeri szubkután injekciója hatására, petefészküktől megfoszfott patkányokon. Az állatoktól az 1. napon, 2 órával az injekció előtt, továbbá az injekciót követő 5., 10., 15., 20., 25., és 30. napon vért vettünk a szérum-E3-koncentráció RIA (Radio Immuno Assay) módszerrel történő meghatározására. A II. táblázatból látható, hogy ösztriol-3,17- -diészterek adagolása esetén a radioimmunológiásan mért E3-koncentráció 5-15-szöröse az egyenértéknyi mennyiségű ösztriol (E3) adagolása esetén kapottnak. Diészterek esetén az adagolást követően 30 napig figyeltünk meg megnövekedett E3-koncentrációt, míg ösztriol esetén csak 8 napon át. 191 789 6 10 15 20 25 30 35 40 45 2
