191697. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új, a vér triglicerid-szintjet csökkentő poliszacharid és az ezt tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására

1

2

191.697

6. táblázat

Állatok Csökkentett

szint (%)

Sterilizált egerek * 45;4

Közönséges egerek * 41;6

Közönséges patkányok* 43,2

Közönséges patkányok** 42Xi

•Koleszterinnel terholt étrend **Fruktó//al terhell étrend

3) Hipotrigliceridémiás aktivitás (3)

4 nig/tnl TRS poliszacliaridot tartalmazó fiziológiás sóoldat minta 1 mi ét adtuk naponta 2 héten keresztül hiperlipidcmiás patkányoknak (18 hetes hím, átlagos testsúly 250 g, 5 patkány minden csoportban), melyeket „koleszterinnel terhelt” eledellel etettünk. A vér trigliceridszintjét a fent említett módszer szerint határoztuk meg. Az eredményeket a 7. táblázat tartalmazza. A táblázatban található értékek a nem kezelt csoporthoz viszonyított triglicerid-s/im csökkenést jelentik százalékban kifejezve.

7. táblázat

Állat Csökkenési

arány (%)

Kezelt 45,0

Kontroll 0

4) Dózisválasz

Fiziológiás sóoldatban 0,1 mg 20 mgínil TRS polis/acharidot oldottunk, és ennek I ml-ével kezeltük naponta a kísérleti közönséges patkányokat, (6 hetes hím, átlagos testsúly 216 g, 5 patkány egy csoportban) 4 héten keresztül. A vér trigliceridszintjét a fentiekben ismertetett módszerrel határoztuk meg (a kontroll csoportoknak nem adtunk TRS poliszacliaridot). Az eredményeket a 8. táblázat mutatja.

8. táblázat

Dózis

(mg/patkány)

Kontroll

0,1

1

10

20

Csökkenési

arány

(átlagos %) 0

10,0

17,4

43,0

48,2

5) Akut toxieitás

1, 10 és 100 mg TRS poliszacliaridot tartalmazó fiziológiás sóoldat mintákkal (0,5 ml/egér) intraperitoncálisan kezeltünk 1CR egereket (6 hetes hím, átlagos testsúly 3 1,4 ± 0,6 g, 10 egér minden csoportban). Az egerek thanatobiológíás megfigyelését 14 napon keresztül folytattuk. A kontroll anyag fiziológiás sóoldat volt.

Az l.Dso értéket a Behrens-Karber módszerrel [Arch. Fxp. Rath. Pharmakologie, 117. kötet, 379- 388 (1935)] határoztuk meg, és ez több volt, mint 1 200 mgftcslsűly kg.

Az anyag orális kezelés esetén lényegében nem volt toxikus.

ö ) ( iyógysz er kész ít menyek

I ) 25 mg tisztított 1RS poliszacliaridot 275 mg tisztított keményítőporral homogenizáltunk, ezután orális kezelésre alkalmas tablettákat formáztunk belőlük. 1./ a tabletta megfelel I0in hőkezelt sejt/test5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

súly kg nagyságú dózissal való kezelésnek (50 kg-os felnőtt).

2) A TRS políszacharid egységesen összekeverhető hígító bázisokkal, mint például a kalcium-karbonát, laktóz, stb., sikosítóanyagokkal, mint sztearinsav, (alkum, stb. és más adalékanyagokkal, és tabletták készíthetők orális kezelés céljára. A TRS poliszacharid napi dózisa általában 0,l 100 mg/testsúly kg.

3j 900 mg TRS polis/acharidot 30 ml desztillált vízben s'/us/pendáltunk és oldottunk, megédesítettük, és szirupot készítettünk belőle.

SZABADALMI IC, ÉN TTON TOK

I. Eljárás új. az emlősök vérének trigliceridszintjét csökkentő políszacharid, mely a következő tulajdonságokkal rendelkezik

a) specifikus forgatóképesség:

= ♦ 190,1 g ( 1,8 tómeg/tf%-os oldatban),

b) mólsúly gélszűrés alapján:

14 000 t 3000,

ct eukoröss/.elétel (tömeg% gázkromatográfiás analízis alapján),

glükóz 70,3

ramnóz 13,7

uronsav 16,0,

d I sav bázis jellemzők:

semleges poliszacharidok

előállítására, azzal jellemezve, bogy a Streptococcus nemzetséghez tartozó S. faecium, S. faecalis, S. avium, S, bovis, S. salivarius, S. durans, S. notis, S, equinus mikroorganizmusok legalább egyike megfelelő tápkozegben tenyésztjük, majd a vér tríglicerid-szintjct csökkentő aktív poliszacliaridot kinyerjük a tenyésztett sejtekből és/vagy a tápközeg felülúszó részéből.

2. Az 1. igénypont szerinti eljárás azzal j e 1 1 em c / v c, hogy mikroorganizmusként az alábbi mikroorganizmusok közül legalább egyet alkalmazunk:

S. faecium IT.RM BP-296,

S faeealis FERM BP-297,

S. avium FERM BP-298,

S. salivarius FERM BP-299,

S. durans FERM BP-300,

S. mitis FERM BP-301,

S. equinus FERM BP-302.

3. Az 1-2. igénypontok bármelyike szerinti eljárás azzal jellemezve, hogy a vér triglicerid- S7.iiitjét csökkentő poliszacliaridot a közegből úgy nyerjük ki, hogy szétroncsoljuk az összegyűjtött baktériumsejteket és elválasztjuk belőle a poliszaeharid frakciót.

4. A 3. igénypont szerinti eljárás azzal jellemezve, hogy a tápközeg felülúszó részét összegyűjtjük , és a poliszachurid-fiakciót ebből kinyerjük.

5. Eljárás a vér trigliccrid-szintjét csökkentő vagy atherosclerosis ellenes gyógyszerkészítmény előállítására, azzal jellem ez v e, hogy 1-4, igénypontok bármelyike szerint előállított poliszacharidot legalább egy gyógyászatilag alkalmas iner', szilárd vagy folyékony hordozóval és/vagy segédanyaggal összekeverjük és gyógyászati készítménnyé alakítjuk.

6