191603. lajstromszámú szabadalom • Diagnosztikai reagens és eljárás hidrofil latexrészecskéket tartalmazó szuszpenziók előállítására
3 191 603 4 giailag aktív anyagokat kovalens kötéssel kötni képesek, a biológiailag aktív proteinek szerkezetét nem roncsolják, aktivitásukat nem csökkentik, továbbá a részecskék szuszpenzióját a centrifugálás nem töri meg. A részecskék koagulálhatók legyenek, és a koagulátum könnyen újból szuszpenzióba vihető legyen. A fenti cél elérése érdekében olyan eljárást dolgoztunk ki, amelynek során egy vagy több, vízben nehezen oldódó glicidil-metakrilát- és/vagy glicidilakrilát monomerből, vizes diszperzióban, szabad gyököket szolgáltató iniciátor jelenlétében, védőgáz atmoszféra alatt latexszuszpenziót állítunk elő. Az eljárásra jellemző, hogy a monomert emulgeátortól. stabüizátortól és nedvesítőszertől mentes közegben emulziós polimerizálással homo- vagy kopolimerizáljuk és kívánt esetben a kapott latexrészecskék terminális epoxiesoportjait kémiailag módosítjuk. Meglepő módon bebizonyosodott, hogy a szak-, körökben régóta uralkodó, a technika fent megadott állásában is tükröződő nézettel ellentétben az emui- f ziós polimerizálás végrehajtható emulgeátorok vagy nedvesítőszerek hozzáadása nélkül. Az emulgeátormaradékoknak a polimer latexrészecskékből való eltávolítását célzó bonyolult és körülményes, de mindezideig szükséges művelet feleslegessé válik, hiszen erre a műveletre csak azért volt szükség, mert az emulgeátorként alkalmazott fémszappanok vagy tenzidek a latexrészecskékből kidiffundálnak és a részecskéken kovalens kötéssel kötött proteinek biológiai aktivitását csökkentik vagy teljesen megsemmisítik. Monomerként legalább egy polimerizálható kettőskötést tartalmazó glicidil-vegyületeket alkalmazunk. Ezen vegyületek szerkezetében a polimerizálható kettőskötésben hidrofób rész, az epoxiesoportban, azaz az oxirángyűrűben ugyanakkor hidrofil rész van. A találmány szerinti eljárás során képződő iatexszuszpenziók mindennemű emulgeátor, stabilizator vagy nedvesítőszer távolléte ellenére sem koagulálnak. A centrifugálás nem töri meg a szuszpenziót. Tekintetttel arra, hogy a terminális epoxidcsoportok igen könnyen reagálnak (hidrolízis, ammonolizis, aminolízis, kondenzációs reakciók), a monodiszperz eloszlásban jelen levő latexgömböcskék felületén az epoxidcsoportoknak úgy kell elhelyezkedniök, hogy kifelé a vizes fázisba orientálódjanak. A találmány szerinti eljárásban monomerként glicidil-metakrilát vagy glicidil-akrilát alkalmazható. Ha egyetlenegy monomerből indulunk ki, a képződő hidrofil latexrészecskék homopolimerizátumot képeznek, de úgy is eljárhatunk, hogy a fenti monomerek elegyeit kopolimerizáljuk. Az epoxiesoportok mennyiségének szabályozása céljából az említett glicidil-vegyületekkel együtt egyéb monomereket is kopolimerizálhatunk, példul a következőket: sztirol, diének, akril-amid, metakrilamid, alkil-, hidroxi-alkil- és aminoalkil-akrilátok, alkil-, hidroxialkil- és aminoalkil-metakrilátok, viniléterek, vinil-észterek, N-vinil-pirrolidon stb. A polimerizálást színezékek vagy fluoreszkáló vegyületek, például Fluoreszein monomer, de polimerizálható származékainak jelenlétében is elvégezhetjük. Ez esetben színes, illetve fluoreszkáló latexrészecskéket kapunk, amelyek állati vagy emberi testszövetekben levő antigének, illetve antitestek kimutatására alkalmazhatók. Az ilyen kimutatás különösen a hisztológiában, szövetmetszetek előállításához alkalmas. A monomer, de polimerizálható származékokként előnyösen olyan színezékeket, illetve fluoreszkáló anyagokat alkalmazunk, amelyekbe önmagában ismert módon metakril- vagy akrilcsooortokat építettünk be. A képződő latexrészecskék vízben való oldhatatlanságának fokozása céljából az emulziós polimerizálás során a szokásos térhálósító szereket, például alkilén- vagy hidroxi-alkilén-alkriátokat, alkilén- vagy hidroxi-alkilén-metakrilátokat, alkilén-bisz(akiilamid)ot, divinilbenzolt stb. adagolhatunk. Iniciátorként az emulziós polimerizáláshoz szokásosan használt, vízben oldódó iniciátorok bármelyikét alkalmazhatjuk. A peroxodiszulliUokat, peroxoborálokat, hidrogén-peroxidot és alkalmas redoxendszereket előnyben részesítünk. A találmány értelmében emulgeálószermetesen végzett emulzós polimerizálás a levegő oxigénjére, illetve minden szabad oxigénre érzékeny. Ezért az összes alkalmazott polimcrizációs komponensekből és ez edényekből gondosan végzett kiforralás, védőgáz alatti desztillálás vagy nitrogén, argon vagy egyéb közömbös gáz átbugyborékoltatása útján el kell távolítani az oxigént. Az emulgeátormentes emulziós polimerizálás során a vizes fázis és a monomerfázis térfogalaránya előnyösín 8:1 és 16:1 közötti érték. A vizes fázisban oldott iniciátor koncentrációja előnyösen 0,5-1,5 g/1, és a monomer-fázis epoxidtrrtalma előnyösen 1—100 t%. Az emulziós polimerizálást előnyösen 0—80 °C- on végezzük. A hőmérséklet az alkalmazott inicíátortól függ: kálium-peroxo-diszulfát esetén előnyösen 60-70 °C-on dolgozunk. A reakció időtartama szintén az iniciátortól függ, és 5-től 40 óráig terjedhet. A találmány szerint, előállított hidrofil latexrészecskék szigorúan gömbalakú, megközelítően azonos méretű, monodiszperz eloszlásban levő részecskék, átmérőjük mintegy 0,15 és 1,5 jum között változhat. A hidrofil latexrészecskék a polimerizálás után nem reagált monomer nyomait tartalmazhatják, amelyek vízgőzdesztillációval vagy dialízissel távolíthatók el. A latexrészecskék tisztítása szempontjából különösen előnyös az a tulajdonságuk, hogy centrifugálással ieülepíthetők anélkül, hogy a szuszpenzió megtörne. A leülepített részecskék utána újból diszpergálhatók, így a latex tisztítását egyszerű módon, többszörös centrifugálással és dekantálással végezhetjük el. A találmány szerint előállított latex terminális szabad epoxiesoportjai a legkülönbözőbb kémiai anyagokkal szemben igen reakcióképesek, így könnyen hidrolizálódnak, perjodáttal vagy petjódsawal aldehid-csoporttá reagálnak, ammóniával, primer aminokkal diaminokkal vagy hidrazinokkal primer vagy szekunder aminocsoporttá alakulnak, vagy egyéb ismert reakciókkal módosíthatók. A találmány szerint előállított latexemulzió az emulgeátor 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 3
