191371. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új muramil-peptid-származékok és ezeket a vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
1 191 371 2 oldatához 2,6 g (25,8 mmól) N-metii-morfolint adunk és a reakcióelegyet 20 órán át hagyjuk állni szobahőmérsékleten. A tiszta, sárga oldatot nagy vákuumban 30 °C-on ? bepároljuk, a félig szilárd maradékot 500 ml etilacetátban oldjuk és hétszer extraháljuk 50-50 ml vízzel. I A szerves fázist vízmentes nátriumszulfát felett szárítjuk. Az etilacetát lepárlása után a maradékot 600 g 60 jelű szilikagélen (Merck, szemcsenagyság 0,07-0,2 mm, ASTM) 98:2 arányú kloroform-metanol rendszerben kromatografálva tisztítjuk. A 36—82 frakcióban levő anyagot összegyűjtjük és szárítjuk. Így az N-terc-butiloxl - karbonil - L - alanil - D - glutaminsav - (Ca) - n - butilészter-(C7>benzilésztert nyerjük színtelen olajos anyag alakjában. [ajp0 = +7°±10 (c = 0,315; dimetil-formamidban), Rf = 0 ,73 (kloroform-izopropanol-ccetsav, 70:8:2 rendszerben) és Rf = 0,75 (n-butanol-ecetsav-víz, 75 :7,5 :21 rendszerben). A kiindulási anyagot a következőképpen állítjuk elő: 11.0 g (30 mmól) N-terc-butil-oxi-karbonil-D-glutaminsav-(Ca)-n-butil-észter-(C7)-benzilésztert oldunk 25 ml vízmentes etilacetátban, majd hidegen keverés közben, a nedvesség kizárása mellet 25 ml 4 n etilacetátos sósavoldatot adunk hozzá és a reakcióelegyet egy órán át hagyjuk állni. Az illékony alkotórészeket 25 °C-on lepároljuk, az olajos maradékot 150 ml vízmentes dietiléterben oldjuk, majd bepároljuk (ezt a műveletet háromszor ismételjük). Az olajos maradékot nátronazbeszt felett szárítjuk, nagy vákuumban. Így a D-glutaminsav(Ca)-n-butil-észter-(C7)-benzilészter-hidrokloridot nyerjük. [a]0° = -9°±1° (c = 0,646<; metanolban) Rf = 0,82 (kloroform-metanol-víz, 70:30:5 rendszerben) és Rf = 0,68 (etilacetát-n-butanol-piridin-ecetsav-víz, 42:21:21:6:10 rendszerben). A kiindulási anyagot a következőképpen állítjuk elő: 20.0 g (64,6 mmól) N-lerc-butil-oxi-karbonil-D-glutaminsav-(C7)-benzilésztert oldunk 750 ml vízmentes tetrahidrofuránban, majd 21,05 g (64,6 mmól) céziumkarbonát (Fluka, purum) 80 ml vízzel készített oldatát csepegtetjük hozzá és a reakcióelegyet vízsugárszivattyú vákuumban szárazra pároljuk. A maradékot 200 ml vízmentes dimetil-formamidban oldjuk, az oldószert lepároljuk. Ezt a műveletet megismételjük. A keletkezett kristályos maradékot nagy %'ákuumban szárítjuk, majd 1 liter vízmentes dimetil-formamidban oldjuk és ehhez az oldathoz keverés közben 13,3 g (97 mmól) n-butil-bromidot csepegtetünk. A reakcióelegyet 18 órán át keverjük szobahőmérsékleten, a keletkezett szuszpenziót szűrjük, a szűrletet fele térfogatúra pároljuk be, majd 1 liter etilacetát hozzáadása után tízszter 100-100 ml vízzel alaposan extraháljuk. A szerves fázist vízmentes nátriumszulfát felett szárítjuk és bepároljuk. Az olajos maradékot 100 ml dietiléterbcn oldjuk, 1800 ml petrolétert adunk hozzá és —10 °C-on hagyjuk állni. Így kristályos anyagot nyerünk, melyet szűrünk, mosunk és szárítunk. A termék az N-terc-butil-oxi-karbonil-D-glutaminsav(Ca)-n-butil-észter-(C7)-benzilcszter. mely színtelen tűs kristályú anyag és 70 —71 °C-on olvad. [aJo°= 20°±1° (c = 1,149; metanolban), Rf = 0,77 (kloroform-izopropanol-ecetsav, 30:8:2 rendszerben) és Rf = 0,92 (ecetsav-elil-észter-n-butanol-piridin-ecetsavvíz, 42:21 :21:6:10 rendszerben). E vegyület előállítását már röviden ismertették a következő helyen: P-Lefrancier és E. Lederer, Fortschritte d. Chem. Org. Naturst. 40, 1-47, 13. oldal (1980). A kiindulási anyagként szolgáló L-alanin-2-(l ,2-dipalmitoil-sn-glicero-3-hidroxi-foszforil-oxi)-etilamidot a következőképpen állítjuk elő: 13,25 g (14,9 mmól) N-terc-butil-oxi-karbonil-L-alanin - 2 - ( 1,2 - dipalmitoil - sn - glicero - 3 - hidroxi - foszforil-oxi)-ctilamtdot adunk keverés közben 170 ml 1:3 arányú (v/v). 0°C-ra hűtött trifluor-ecetsav-metilénklorid elegyhez, eközben tiszta oldat képződik. A reakcióelegyet 2 és fél órán át hagyjuk állni szobahőmérsékleten, majd forgóbepárolón bepároljuk. A félig szilárd maradékból a felesleges trifluor-ecetsavat ügy távolítjuk el, hogy 100 ml metilén-kloridot adunk hozzá, majd bepároljuk. Ezt a műveletet többször ismételjük. A maradékot ötször dörzsöljük el 100—100 ml vízmentes dietíléterrel és a felülúszót dekantáljuk. Így egy jól szűrhető szuszpenziót nyerünk. A szűrés után a szilárd anyagot először dietiléterrel, majd kétszer 100—100 ml forró acetonnal mossuk és vízsugárszivattyús vákuumban szárítjuk, 60-70 °C-on. így 10,9 g (az elméleti hozam 95,6 %-a) L-alanin-2-(l ,2-dipalmitoil-sn-glicero-3-hidroxi-foszforii-oxi)-etil-amidot nyerünk, színtelen, kristályos anyag alakjában. A termék 138—147 °C-on olvad. [a]“ = +30°±1° (c = 1; kloroform-metanol-víz, 70:30:5 elegyben) Rf = 0,14 (kloroform-metanol, 7:3 rendszerben) és Rf = 0,40 (kloroform-metanol-víz, 70:30:5 rendszerben). Az így keletkezett terméket a következőképpen alakítjuk át nátriumsóvá: 3,82 g (5 mmól) L-alanin-2-(l,2-dipalmitoil-sn-glicero- 3-hidroxi-foszforil-oxi)-etilamidot oldunk 100 ml 7:3 arányú kloroform-metanol elegyben, 35 °C-on történő rövid melegítés közben. Ezután az oldatot lehűtjük, és óvatosan 5 ml 1 n nátrium-hidroxid-oldatot csepegtetünk hozzá. A tiszta oldatot ezután az eredeti térfogatnak körülbelül 1/3-ára pároljuk be, majd 200 ml dioxán hozzáadása után liofilizáljuk. Így az L-alanin-2-(l,2-dpalmitoil - sn - glicero - 3 - hidroxi - foszforil - oxi) - etilamid-nátriumsót nyerjük, laza poralakú anyag formájában. 2. példa Az 1. példában leírt módszerhez hasonlóan állítjuk elő a 3 -10. példákban említett, valamint a következő vegy ületeket: N-acctil-muramil-N-metil-L-alanil-D-glutamil-ÍCo,)etilészter-(C7>L-alanin-2-(l ,2-dipalmitoil-sn-glicero-3- hidroxi-foszforil-oxi)-eti!amid-nátriumsó: N-acetil-dezmetil-muramil-L-alanil-D-glutamil-(Ca)mctilcsztcr-(C7 )-L-alanin-2-(l ,2-dipa!mitoil-sn-glicero- 3-hidroxifoszforil-oxi)-etilamid-nátriumsó; 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 9
