191371. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új muramil-peptid-származékok és ezeket a vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
1 191 371 2 [a]p° = +16,1°±0,1° (c = 1,463; metanolban), Rf = 0,24 (kloroform-metanol, 9:1 rendszerben) és Rf = 0,55 (kloroform-metanol, 5:1 rendszerben) és Rf = 0,94 (kloroform-metanol-víz, 70:30:5 rendszerben). A kiindulási anyagot a következőképpen állítjuk elő: 13.2 g (35.77 mmól) 4,6-0-izopropilidén-N-propiomldezinetilmuraminsav-nátriumsó 200 ml dimetil-formamiddal készített szuszpenziójához szobahőmrsékleten, keverés közben 9,6 g (46,5 mmól) diciklo-hexil-karbodiimidet, 5,35 g (46,5 mmól) N-hidroxi-szukcinimidet és 12,8 g (35,77 mmól) L-a!anil-D-glutaminsav-(Ca)metilészter-(C7)-benzilészter-hidrokIoridot adunk és az egészet 21 órán át keverjük szobahőmérsékleten. A keletkezett fehér színű szuszpenzióhoz 200 ml etilacetátot adunk 1 órán át keverjük 0 °C-on, a kiváló diciklohexilkarbamidot szűrjük, jéghideg etilacetáttal utánamossuk és a szűrletet vákuumban, 30 °C-on bepároljuk. A maradékot 300 ml etilacetátban oldjuk és egymást követően 50-50 ml 2 n citromsavoldattal, vízzel, 10 ?ros nátriumhidrogén-karbonát-oldattal és vízzel mossuk. Az etilacetatot fázisokat egyesítjük, nátriumszulfát felett szárítjuk, szűrjük és vákuumban bepároljuk. így a 4,6-0-izopropilidén-N-propionil-dezmetilmuramil-L-alanil-D-glutaminsav-(Ca )-metilészter-(C7 ) - bcnzil - észtert kapjuk. Rf = 0,65 (kloroform-metanol, 9:1 rendszerben) és Rf = 0,86 (kloroform-metanol, 5:1 rendszerben). A két kiindulási anyagot a következőképpen állítjuk elő: 20.3 g (48,0 mmól) N-terc-butiloxi-karbonil-L-alanil- D-glutaminsav-(Ca)-metilészter(C7)-benzilészter [P. Lefrancier, M. Derrien, I. Lederman, F. Nicf, J. Clioay és E. Lederer, Int. J. Peptide Protein Rés. 11, 289-296 (1978)J 100 ml vízmentes etilacetáttal készített oldatához OsC-on 100 ml körülbelül 5 n sósavas etilacetát oldatot adunk és két órán át keverjük 0 °C-on. A sárgás színű oldatot vákuumban bepároljuk, a maradékot kétszer 100-100 ml etilacetáttal elkeverjük és ismételten bepároljuk. Kétszer 100-100 ml vízmentes dietiléterrel történő digerálás után a maradékot nagyvákuumban szárítjuk. így az L-alanil-D-glutaminsav-(Ca. )metilészter-(C7)-benzilészter-hidrokloridot nyerjük, mely 0,31 mól kristályvizet tartalmaz. íö]f)0 = +18.6°±0.1° (c = 0.043; metanolban), Rf = 0,72 (kloroform-metanol-víz; 70:30:5 rendszerben) Rf = 0,44 (kloroform-metanol, 5:1 rendszerben) és Rf = 0,3l (kloroform-metanoi, 9:1 rendszerben). 34.4 g (73,8 mmól) még 2,14 mmól/g nátriumklorldot tartalmazó lcv-0-benzil-4,6-0-izopropilidén-N-propionil-dezmetilmuraminsav-nátriumsó 340 ml vízzel készített oldatát, 7,1 állandó pH értéken 6,0 g palládiumszén katalizátor jelenlétében 23 órán át hidrogénezzük normál nyomáson és szobahőmérsékleten. Ezután a katalizátort szűrjük, a szűrletet pH = 7,1 értéknél vákuumban, 30 °C-on bepároljuk és a maradékot nagyvákuumban foszforpentoxid felett szárítjuk. így a 4,6-0-izopropilidén-N-propionil-dezmetil-muraminsav-nátriumsót kapjuk, színtelen por alakjában. Rf = 0,50 (kloroform-metanol-víz, 70:30:5 rendszerben) és Rf = 0,66 (acetonitril-víz, 3:1 rendszerben). A kiindulási anyagot a következőképpen állítjuk elő: 14.3 g (32,7 mmól) la-0benzil-4,60-izo-propilidén- N-propionil-dezmetilmuraminsav-metilészter 130 ml metanollal készített oldatához 24,4 ml (48,7 mmól) 2 n nátriumhidroxidot adunk és 1,5 órán át keverjük szobahőmérsékleten. Az így keletkezett tiszta, halványsárga oldat pH-ját 1 n sósav hozzáadásával 7,0 értékre állítjuk, majd 30 °C- on vákuumban bepároljuk. A termeket foszforpentoxid felett szárítjuk. Az labenzil4,6-0-izopropilidén-N-propionil-dezmetilmuraminsav-nátriumsó színtelen kristályos anyag. Rf = 0,67 (kloroform-metanol-víz, 70:30:5 rendszerben) és Rf = 0,74 (acetonitril-víz, 3 :1 rendszerben). A kiindulási anyagot a következőképpen állítjuk elő: 6,75 g (224.7 mmól) nátriumhidrid 120 ml vízmentes tetrahidrofuránnal készített szuszpenziójához 5 °C-on, nitrogénatmoszférában keverés közben 5 perc alatt 31,3 g (85,65 mmól) la-O-benziI-2-dezoxi-4,6-0-izopropilidén-N-propion-amido-a-D-glükopiranozid 200 ml vízmentes tetrahidrofuránnal készített oldatát csepegtetjük. Eközben a hőmérséklet 20 °C-ra emelkedik. Az így keletkezett szüszpenziót két órán át keverjük 40 °C-on, majd 0 °C-ra hűtjük le, és nitrogénatmoszférában keverés közben 20,7 g (135,77 mmól) brómecetsavmetilészter 95 ml vízmentes tetrahidrofuránnal készített és -15°C-ra hűtött oldatához csepegtetjük 30 perc alatt. A szüszpenziót még három órán át keverjük 0—5 °C- on, majd 20 ml tetrahidrofuránt adunk hozzá. A pH-t 4,5 ml jégecet hozzáadásával 6 értékre állítjuk, majd a reakcióelegyet vákuumban, 30 °C-on bepároljuk. A maradékot 200 ml metilénkloridban oldjuk és az így keletkezett oldatot háromszor mossuk 125-125 ml vízzel. A metilénkloridos fázisokat egyesítjük, nátriumszulfát felett szárítjuk, szűrjük és vákuumban, 30 °C-on bepároljuk. A halványsárga, kristályos nyersterméket 500 g semleges alumíniumoxiddal (Woelm N, Super 1) töltött oszlopon kromatografálva tisztítjuk. Eluálószerként etilacetátot alkalmazunk. 10 ml-es frakciókat fogunk fel. A 14- 236 frakciókat egyesítjük és vákuumban bepároljuk. így az la-O-benzil-4,6-0-izopropilidén-N-propionildezmetilmuraminsav-metilésztert nyerjük, színtelen kristályos anyag alakjában. A termék olvadáspontja 121 — 123 C (1:2 arányú dictilcter-pctroléter elcgycből átkristályosítva). [or]20 = + !46.9°±0.1° (c = 0,849, kloroformban), Rf = 0.67 (kloroform-metanol, 9:1 rendszerben). 5 10 15 20 25 30 35 10 15 50 55 60 65 15
