191320. lajstromszámú szabadalom • Oxidációs eljárás
1 2 191 320 célszerűen az oxidálószer előtt adjuk a rendszerbe. Eljárhatunk azonban úgy is, hogy a két reagenst párhuzamosan vagy váltakozva adagoljuk megfelelő keverés közben. Dienol-csoportot tartalmazó cukorszármazékként alkalmazhatunk reduktont, reduktinsavat, hidroxi-tetron- 5 savat, vagy előnyösen aszkorbinsavat, izoaszkorbinsavat. Az oxidáció következtében a kiindulási sötétvörös átlátszatlan oldatból halvány-sárgás áttetsző oldat keletkezik, ami azt bizonyítja, hogy a színtelenítő eljárás lényegében sikerrel járt. 1 q Az oldatban lévő kedvezőtlen ízanyagok és egyéb melléktermékek eltávolítására az eljárás ezen szakaszában célszerű az oldatot dalizálni. Erre a célra 500—50000 mólsúlyú terméket áteresztő (,,cut range”) membrán alkalmazásával, víz vagy fiziológiás konyhasó-oldat elleni -| 5 dialízis a legcélszerűbb. Az így kapott, színtelenített és ízanyagaitól megtisztított oldatot előnyösen ultraszűrő segítségével koncentrálhatjuk. Előnyös, ha 10—40 t% szárazanyag-tartalomig koncentráljuk be az elegyet. 20 A színtelenített oldat ebben a formájában sok célra már közvetlenül felhasználható, mint táplálék-adalékanyag. Koncentrálás előtt célszerű a semleges körüli pH-érték beállítása lúg hozzáadásával. Szükséges lehet hogy vízoldható por alakjába hozzuk a terméket olyan esetekre, 25 amikor a szilárd anyagot kívánjuk tovább felhasználni, illetve szállítási és tárolási problémák miatt így előnyösebb. Poralakú termékek előállítására a színtelenített hemoglobin-oldat pH-értékét semleges kémhatásúra ál- 30 Htjuk be lúg adagolásával, az oldatot bekoncentráljuk, majd porlasztva megszárítjuk. Erre a célra az ismert porlasztva szárító berendezések alkalmazása megfelelő. Ha teljesebb vérkoncentrátumot vagy vérport kívánunk előállítani, akkor a hemoglobin-koncentrátumot plazmá- 35 val vagy plazmasűrítménnyel keveijük. Ha olyan mennyiségű plazmát adunk a koncentrátumhoz, ami a vérben lévő természetes arányoknak megfelel, olyan teljes vérport kapunk, amely később, vízzel való hígítás után gyakorlatilag a vér összetételének felel meg bioló- 40 giai értékesülés szempontjából. A találmányunk szerint előállított hemoglobin-koncentrátum, hemoglobin-por, vér-koncentrátum vagy vér-por egyaránt alkalmazható táplálék-adalékként. Ize és színe nem zavarja a táplálék eredeti színét, ízét. így kivá- 45 lóan alkalmazható humán fogyasztásra. Emulgeáló hatása kiváló. Kívánt esetben granulálható. A színtelenített vérpor aminosav-összetétele gyakorlatilag megfelel a kiindulási anyagként alkalmazott vér összetételének. 50 Eljárásunk részleteit a példákban mutatjuk be. I. példa Vágóhídon függesztett, vagy döntött állatokból (szarvasmarha, sertés) csőkés segítségével bocsátjuk le a 55 vért 251-es tejeskannákba, amelyekbe 500 ml alvadásgátló oldatot mértünk be (100 g citromsav, 150 g nátrium-bikarbonát, 625 ml vízben). Az alvadásgátlóval egyenletesen elkeverjük a vért, majd a kannákat lezárjuk és a vérfeldolgozás helyére szállítjuk. 60 20 1 alvadásgátolt vért vérszeparátoron átvezetve plazmára és alakos elemekre választunk szét. Az alakos elemeket ismert módon, például mechanikusan gerjesztett nagy-frekvenciás berendezésben, nagy-frekvenciás rezgés alkalmazásával felnyitjuk és ily módon kiszabadul a hemoglobin. A hemoglobin oldatot víz hozzáadásával hemoglobinra nézve 5—7 t/tf%-osra hígítjuk, majd az oldat kémhatását 1:10 hígítású sósavval pH 2-re savanyítjuk, a sav lassú adagolásával, állandó keverés mellett. Az elegyhez 1 t/tf% aszkorbinsavat adagolunk, majd 30%-os hidrogénperoxid-oldatot csorgatunk az elegyhez, amíg az oldat peroxidra nézve 2 t%-os lesz. 3—4 óráig szobahőmérsékleten kevertetjük, majd a „plazma színű” oldatot ultraszűrőn vízzel szemben dializáljuk. Az ultraszűrés 10.000-s membránon keresztül történik. A hemoglobinoldatot dializálás után ugyancsak ultraszűrő segítségével lehetőség szerint minél nagyobb szárazanyagtartalomig koncentráljuk (15—30%), majd az oldat kémhatását nátrium-hidroxid hozzáadásával pH 7,5 értékre állítjuk. Az átlátszó, halványsárga színű hemoglobin-oldatot összekeverjük plazmáról olyan arányban, hogy a kiinduló teljes vér plazma/hemoglobin arányát kapjuk és a keveréket porlasztvaszárítón megszárítjuk. 4 kg száraz, sárgás-fehér színű porterméket kapunk. A plazma/hemoglobínpor minősége: Nedvességtartalom : 10% Fehérje tartalom: 80% Oldékonyság: 80% Bakteriológiai minősítés: emberi fogyasztásra alkalmas. Ciszteinsavat, metionin-szulfonsavat kimutatható mennyiségben nem tartalmaz. 2. példa Az 1. példa szerint kapott vért az ott leírt módon alvadásgátló oldattal kezelünk, majd vérszeparátoron átvezetve plazmára és alakos elemekre választjuk szét. Az alakos elemeket tartalmazó frakciót víz hozzáadásával négyszeres térfogatra hígítjuk az alakos elemek feltárására. Ezután az élénk piros oldat kémhatását 1:10 hígítású vizes sósavval pH 3 értékre állítjuk be. Az elegyhez előbb 0,5 t/tf% izoaszkorbinsavat, majd annyi 30%-os hidrogénperoxid — oldatot adagolunk, amíg az oldat peroxidra nézve 1 t%-os lesz. Ezután 15 percig 40 °C hőmérsékleten kevertetjük, majd újra 0,5 t/tf % izoaszkorbinsavat és annyi 30%-os hidrogénperoxid oldatot adagolunk, amíg a kapott elegy peroxidra nézve 2 t%-os lesz. A halványsárgás fehér színű elegyet ezután 30 percig 40 °C hőmérsékleten kevertetjük, majd ultraszűrőn vízzel szemben dializáljuk. A színtelenített oldatot 30 t% hemoglobintartalomig betöményítjük, majd nátriumhidroxid hozzáadásával pH 7 kémhatásúra állítjuk be és porlasztva szárítón megszárítjuk. Száraz, sárgásfehér színű port kapunk. Nedvességtartalma 10%, fehérjetartalma 88%, oldékonysága 80%. Automatikus aminosav-analizátorral végzett vizsgálatok szerint nem tartalmaz kimutatható mennyiségben sem ciszteinsavat, sem metioninszulfonsavat. Bakteriológiai minősítés: humán fogyasztásra alkalmas. Az ember számára esszenciális aminosav- tartalom a hemoglobin-porban: lizin 9,8% fenilalanin 7,0% metionin 0,4% treonin 4,0% leucin 12,0% izoleucin 0,2% valin 7,9% Ezen felül aiginint (4,5%), hisztidint (7%) és tirozint (5%) is tartalmaz. 3
