191129. lajstromszámú szabadalom • Eljárás riboflavin előállítására
5 191 129 6 Melasz Takarmányélesztő szárított biomasszája Ammónium-szulfát Káüum-dihidrogén-foszfát Dikálium-hidrogén-foszfát M agnézi um-szulfát Víz pH-érték 6,0 1,0 0,1 0,3 0,7 0,01 a fennmaradó rész 6,5 Az inokulumot 750 ml térfogatú Erlenmeyerlombikban (a tápközeg térfogata 25 ml) rázóasztalon 200 löketszám/perc sebességgel, 37 *C hőmérsékleten 20 órán át tenyésztjük, majd 10 tömeg % mennyiségben az alábbi (tömeg %-ban megadott) összetételű fermentációs közegbe visszük : Melasz 12,0 Taka rmány élesztő szárított biomasszája 2,0 Ammónium-szulfát 0,4 Káüum-dihidrogén-foszfát 0,1 Dikálium-hidrogén-foszfát 0,1 Magnézium-szulfát 0,2 Víz a fennmaradó rész pH-érték 7,0 A fermentációt 750 ml térfogatú lombikban (a tápközeg térfogata 25 ml), rázóasztalon 200 löketszám/ perc sebességgel, 37 *C hőmérsékleten végezzük. A kultúrafolyadék 48 órás fermentáció után 1600 mg/liter riboflabint tartalmaz. •*. ■ 2. példa Az inokulumot az l. példában leírtakhoz hasonlóan tenyésztjük. Fermentációs közegként az alábbi (tömeg';á-ban megadott) összetételű közeget alkalmazzuk : oltókacs segítségével az alábbi (tömeg %-ban megadott) összetételű kultúraközegre oltjuk: Szaccharóz g Takarmányélesztő szárított biomasszája Karbamid Kálium-dihidrogén-foszfát Dikálium-hidrogén-foszfát , 0 Magnézium-szulfát Víz pH-érték 3.0 2.0 0,6 0,1 0,1 0,2 a fennmaradó rész 6,5 15 20 25 30 35 40 Az inokulumot 750 ml térfogatú Erlenmeyerlombikban (a tápközeg térfogata 30 ml) rázóasztalon 200 löketszám/perc sebességgel, 37 °C hőmérsékleten 20 órán át tenyésztjük, s utána 5 tömeg % mennyiségben az alábbi (tömeg%-ban megadott) összetételű fermentációs közegbe visszük: Szaccharóz Takarmányélesztő szárított biomasszája Karbamid Kálium-dihidrogén-foszfát Dikálium-hidrogén-foszfát Magnézium-szulfát Viz pH-érték 7.0 2.0 0,6 0,1 0,1 0,2 a fennmaradó rész 6.5 A fermentációt 0,5 literes térfogatú fermentorban, erélyes levegőztetés (1 liter tápközegtérfogatra számítva 1,5 liter levegőtérfogat) és keverés közben (a keverőberendezés fordulatszáma percenként 1000), 40 °C hőmérsékleten valósítjuk meg. 16 óra elmúltával steril körülmények között 3 súly% cukrot adunk a fermentációhoz. A kultúrafolyadék 40 órás fermentáció után 3500 mg/liter riboflavint tartalmaz. Szaccharóz ■ 10,0 Takarmányélesztő szárított biomasszája 2,0 Karbamid 0,6 Káüum-dihidrogén-foszfát 0,1 Dikálium-hidrogén-foszfát 0,1 Magnézium-szulfát 0,2 Víz a fennmaradó rész pH-érték 6,5 A fermentációt 0,5 literes térfogatú fermentorban, erélyes levegőztetés ( 1 liter tápközegtérfogatra számítva 1,5 liter levegőtérfogat) és keverés közben (a keverőberendezés fordulatszáma percenként 700-1000) 37 "C hőmérsékleten valósítjuk meg. A kultúrafolyadék 48 órás fermentáció után 2100 mg/liter riboflavint tartalmaz. 3. példa 24 órás, hús - pepton - ferdeagaron tenyésztett bacillus sublilis VNllGenetika 304/pMX45 tenyészetet í 4. példa 45 50 55 60 24 órás, eritromicint tartalmazó hús - pepton — agaron tenyésztett Bacillus subtiiis VNllGenetika 304/ pMX45 tenyészetet 12 órán át az oltóberendezésben az alábbi (tömeg%-ban megadott) összetételű tápközegen inkubáljuk: Élelmezési célokra alkalmas cukpr Taka rmá/iyéiesztő szárított biomasszája Karbamid Kálium-dihidrogén-foszfát Dikálium-hidrogén-foszfát Magnézium-szulfát Víz pH-érték 5.0 1.0 0,6 0,1 0,1 0.1 a fennmaradó rész 6,5 12 órás fermentáció után további 5 tömeg % cukrot adunk hozzá. A kultúrafolyadék 25 órás fermentáció után 4500 mg/liter riboflavint tartalmaz. 4
