191108. lajstromszámú szabadalom • Eljárás M 9026 jelű antibiotikum-komplex komponensek előállítására
1 191 108 2 A találmány tárgya eljárás az előzetesen M 9026-tal jelzett antibiotikum-csoport, az M 9026 komplex fermentációs úton történő előállítására, valamint az 12. és 3. jelű komponenseknek a keverékből tisztán lörlénő előállítására. A szabadalmi leírásban szereplő M 9026 antibiotikumot egy eddig ismeretlen, a rendszertani vizsgálatok szerint a Micromonospora nemzetségébe tartozó baktériumfaj tenyészlevéből állítjuk elő. A Nangul-ban (India) gyűjtött törzs egy tenyészetét az 1982. július 30-í Budapesti Egyezmény rendelkezései alapján NRRL 15 118 sorszám alatt helyeztük letétbe az Agricultural Research Culture Collection-nél (NRRL): 1815 N. University Street, Peoria, Illionis 61601, USA. Az M 9026 antibiotikum-komplex, az M 9026 antibiotikum 1., 2. faktor és az M 9026 antibiotikum 3. faktor hasonlósága miatt, valamint a leírás megkönnyítése érdekében, a találmány ismertetése során ha az aktivitásokkal vagy az előállítási és tisztítási eljárásokkal foglalkozunk, az „M 9026 vegyületek” vagy „M 9026” antibiotikumok kifejezés alatt az M 9026 antibiotikum-komplexből kiválasztott vegyületet az M 9026 antibiotikum 2. komponenst és az M 9026 antibiotikum 3. komponenst értjük. Az M 9026 vegyületek in vitro gátolják bizonyos, különösen Gram pozitív patogén baktériumok növekedését és úgy találták, hogy hatásosan gátolják daganatsejtek növekedését, mind in yitro tenyészetekben, mind emlősökben in vivo kísérletek során. Az NRRL 15 118 Micromonospora sp. törzs jellemzőit az alábbiakban adjuk meg: Morfológia Az NRRL 15 118 Micromonospora sp. törzs jól nő különböző táp-agarakon zabliszt agaron a telepek 2—3 mm átmérőjűékre nőnek, körvonaluk szabályos, felszínük gyűrött. A légmicélium mindig hiányzik. Mikroszkópos megfigyelések szerint a micélium hosszú, elágazó, normális átmérőjű (0,6 pin). Nagy mennyiségben keletkeznek ovális és kerek spórák, átmérőjük 0,7—1,0 pm. A nyeletlen spórák közvetlenül a micélium-fonalból állnak ki és főleg szimpodiálisan elágazó spóratartón keletkeznek. A spórák és spóratartók megfigyelését Lucdemann szerint végeztük (Intern. J. Syst. Bact. 21, 240-247, 1971) rázott-lombikos folyadéktenyészetből. Tenyésztési jellemzők Az I. táblázatban a Shirling és Gottlieb által javasolt különböző standard táptalajokon (Inter. J. Syst. Bact. 16 313—340, 1966), valamint a Waksman által ajánlott más táptalajokon (The Actinomycètes, Vol. II, William and Wilkins Co. 1961) tenyésztett Micromonospora sp. NRRL 15 118 törzs tenyésztési jellemzőit közöljük. Ezeket a tulajdonságokat 7—14 napos 30 °C-on történő inkubálás után határoztuk meg. 1. táblázat A Micromonospora sp. NRRL 15 118 tenyésztési jellemzői Táptalaj Tenyésztési jellemzők 2. táptalaj (élesztőkivonat-maltóz agar) Nincs növekedés 3. táptalaj közepes növekedés durva, (zabliszt agar) világos narancs-barnás színű felület 12 E 8' 4. táptalaj bőséges növekedés, durva. (szervetlen sók-keményítő agar) narancsszínű felület 11 F 11 5. táptalaj gyenge növekedés, lapos (glicerin-aszparagin agar) átlátszótól narancsig változó fényű 6. táptalaj közepes növekedés ráncos, (pepton-élesztőkivonat-vas agar) borostyán színű 12 D 9 7. táplalaj gyenge növekedés lapos, (tirozin agar) átlátszó Zabliszt agar bőséges növekedés, durva, (Waksman szerint) narancsszínű feketés felület, nyirkos Hickey és Tresner agar bőséges növekedés gyűrött, barnás Czapek glükóz agar nincs növekedés Glükóz-aszparagin agar gyenge növekedés lapos, átlátszótól világos narancsig változó színű Táp-agar közepes növekedés, durva, narancs 10 T 9 Burgonyás agar bőséges növekedés, ráncos, narancsszínű feketés felület, nyirkos Bennett agar bőséges növekedés, durva, narancsszínű barnás felület Kalcium-malát agar gyenge növekedés, lapos átlátszó Fölözött-tej agar közepes növekedés, durva narancsszínű 11 C 10 Czapek agar kalciumgyenge növekedés, lapos, karbonáttal áttetszőtől narancsig változó színű Czapek agar gyenge növekedés, lapos, áttetszőtől narancsig változó színű Pepton-glükóz agar közepes növekedés, ráncos, narancsszínű II G 8 Emerson agar közepes növekedés, durva narancs barnás felület Burgonya-szelet nincs növekedés Burgonya-szelet közepes növekedés, ráncos, kalcium-karbonáttal piszkos-narancs színű 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 2
