191104. lajstromszámú szabadalom • Gélcella gélelektroforézis végzésére, és ezt felhasználó elektroforetizáló berendezés

3 191 104 4 elektroforetizáló berendezés távlati képe részben kitöréses ábrázolásban. Az 1. ábrán a találmány szerint kialakított 10 gél­cella első kiviteli alakjának távlati képe látható. A 10 gélcella hőre lágyuló műanyagból, például poli­­vinil-kloridból, polikarbonátból, polisztirolból, metakrilátból vagy hasonló műanyagból egy darabban készül és két fő szerkezeti részre, úgymint 12 gélkam­rára és 20 tarlályrészre oszt haló. (izek a részek közvetlenül egymáshoz csatlakoznak és egymás foly­tatását képezik. A 12 gélkamra lapos hasáb alakú, amelyet két kes­keny 13 oldalfal és ezekre merőleges elülső és hátsó 14 fal határol. A falak lapos téglatest alakú belső teret határoznak meg, amely alul zárt kiképzésű. A belső téglatest alsó szélén túl a 14 falak egy keskeny 18 szélső zónában ívelten egymáshoz közelednek, majd 19 záróéi mentén egyesülnek. A 20 tartályrész a 12 gélkamra fölött, annak füg­gőleges középvonalára szimmetrikusan helyezkedik el. A 20 tartályrésznek a 12 gélkamra belső terével azonos hosszúságú, de annál lényegesen szélesebb téglatest alakú belső tere van, amely alul folyamato­san szűkülve a 12 gélkamra belső teréhez csatlakozik. A két tér keskeny téglalap alakú 15 nyíláson keresztül (1. ábra szaggatott vonal) egymással közlekedik. A 20 tnrfályrész függőleges falait leiül körhefuló vízszintes 27 perem határolja, amely a 10 gélcclla rögzítését segíti és a szerkezetet merevíti. A 20 tar­tályrész 23, 24 oldalfalai a 10 gélcella 13 oldalfalának meghosszabbítását képezik és rajtuk kétoldalt közé­pen egv-egy 25, ill. 26 bemélyedés található. A 25,26 bemélyedések a 20 tartályrész belső tere felé nyitot­tak és feladatuk a 20 tartályrészt működés közben kitöltő pufferoldatot érintkeztető elektród mechani­kai rögzítése. A 20 tartályrész és a 12 gélkamra között kialakított ívelt hátramenet előnyösen a rajzon vázolt módon képezhető ki, de egyes felhasználások­nál előnyös lehet, ha a 15 nyílás fölött közvetlenül egv öhlösödés, majd ezt követő meredekebb falsza­kasz képezi a ferde átmenetet. A 10 gélcellát átlátszó vagy legalábbis áttetsző mű­anyagból kell készíteni, mert a gélelektroforézis ezáltal válik követhetővé és megfigyelhetővé. A szer­kezeti kialakítás szempontjából annak van nagy jelen­tősége, hogy a 12 gélkamra felső terének lapfelületei egymással párhuzamosak legyenek. A párhuzamosság többféle módon biztosiiható. Az egyik előnyös megoldás az elülső és hátsó 14 falak külső bordázattal való merevítése. A 12 gélkamra 13 oldallapjainál az anyagvastagság lényegesen nagyobb a 14 falak vas­tagságánál, így a 13 oldalfalakig kinyúló bordák kellő megtámasztása megoldható. A 2. ábrán a 12 gélkamra falának merevítésére egy másik példát vázoltunk. Az itt látható 10 gélcella kialakítást tekintve lényegében azonos az 1. ábrán vázolttal, a különbséget csak az képezi, hogy a 12 gél­kamra falának vastagabb anyagból, esetleg merevítés­­sel ellátott kiképzése helyett mindkét 14 fal kisebb vastagsággal készül, amely a falak rugalmas elmozdu­lását megengedi. Az oldalfalak vastagsága ebben az esetben is lényegesen nagyobb a 14 falakénál. A mere­­vítést külső 16, 17 üveglapok biztosítják, amelyek a 12 gélkamra külsejéhez 21 és 22 szorítok és 28 csa­varok .segítségével (amelyek műanyagból készülnek) könnyen hozzákapcsolhatók. A 12 gélkamra belső terét a gélkészítés során gélesedő eleggyel töltjük föl, és az elegy hidrosztatikus nyomásának hatására a rugalmas 14 falak a 16, 17 üveglapokhoz simulnak és annak sík alakját veszik fel. A gélképződés befejező­dése után a sík alakzatot a géltest megtartja. A 16 és 17 üveglapok helyett műanyag lemezek is használ­hatók. A 12 gélkamra mérete a felhasználástól függően különböző lehet. Fehérjék gélelektroforéziséhez elő­nyösen a 2X150X150 mm belméret, míg nukleinsa­­vak, polipeptidek és polinukleotidok esetében 1- 2X X300X600 mm méret tűnik alkalmasnak. A 2. ábrán vázolt megoldás különösen nagyobb méretű gélkam­rák használata esetében előnyös, mert nagy méretek mellett a falpárhuzamosság biztosítása komoly mű­szaki nehézséget jelenthet. Most a 3. ábrára hivatkozunk, amelyen a találmány szerinti gélcella egy további kiviteli alakja látható. Az itt vázolt 30 gélcella 20 tartályrészéhez két 12 és 11 gélkamra csatlakozik, ígv vele egyidejűleg két minta gél-elektroforézise végezhető. A kettős gélkam­rával ellátott gélcella felépítése minden egyéb szem­pontból azonos az 1. ábrán vázolttal, a 11 és 12 gél­kamrák kiképezhetek merevített fallal, de a külső üvcglapos merevítés a kellős kivitelnél is használható. A találmány szerint kialakított gélcella felhaszná­lása során először a géltestet kell kiképezni, és ebből a célból a függőleges helyzetben tartott gélkamrákba a 20 tartályrészen keresztül a gélesedő elegvet töltjük, és adott esetben a 15 nyíláson keresztül a gélkamra belső terébe mintatér kialakító fésűt helye­zünk. A gélkamra alsó végét a gélelektroforézis meg­kezdése előtt fel kell nyitni. Ez a művelet a 14 falak­nak a 18 szélső zónában történő felvágásával végez­hető el. A 18 szélső zónában a laptávolság nagyon kicsi, a felvágás ollóval vagy egyéb vágóeszközzel meg­oldható. A vágás elősegítése céljából a 1 8 szélső zóná­ban a falanyagban a 19 zárószéllcl párhuzamos hor­nyot is kialakíthatunk. A 19 záróéi eltávolítása után a géltesthez alulról is hozzáférhetünk. Ezt követően a mintatérbe mintát helyezünk, és a gél-elektroforézist megkezdhetjük. A gél-elektro­­forézis végzése legelőnyösebben a találmány szerint kialakított és a 4. ábrán vázolt gél-elektroforelizáló berendezésben végezhető. Mosl a 4. ábrára hivatkozunk, amelyen átlátszó falú, téglatest formájú 31 tank belsejében egymás mellett két 10a és 10b gélcella helyezkedik el. A 31 tankot átlátszó 32 fedél zárja le, amelynek belsejében a rajzon csak vázlatosan jelölt 33 mikrokapcsolök helyezkednek cl, és e/.ck-a 32 ledéi üzemi (zárt) hely­zetében az elektroforetizáló áramkört zárják. A 10a és 10b gélcellák 27 peremeik révén a 31 tank felső szélére támaszkodnak. A 31 tank belsejé­ben a gélkamrák körül 34 csőkígyó van elrendezve, amelynek helyzetét több keskeny 35 tartólap bizto­sítja, és ennek furatain a csőkígyó egyes menetei átvezetnek. A 34 csőkígyó végei a 31 tankból kivezet­nek és hűtőfolyadék keringető berendezéshez csatla­koztathatók. A 34 csőkígyó magassága lényegében azonos a gélcellák gélkamráinak magasságával. A 31 tank alján a gélkamrák közötti szakaszon 3 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65

Next

/
Thumbnails
Contents