190952. lajstromszámú szabadalom • Eljárás háziállatok húgyúti, légúti és egyéb vérfertőzéseinek kezelésére alkalmas szinergetikus hatású új gyógyszerkombináció előállítására
1 190 952 2 A találmány tárgya a háziállatok húgyúti, légúti és egyéb vérfertőzéseinek kezelésére alkalmas, új, szinergetikus hatású gyógyszerkombináció előállítására vonatkozó eljárás. Közelebbről a találmány tárgya eljárás hatóanyagként diterpén típusú, tiamulin-hidrogén-fumarátot, aminoglycosid típusú apramycin-szulfátot vagy gentamicin-szulfátot tartalmazó antibakteriális és antiprotozoás gyógyszerkombináció előállítására, amely parenterálisan gyógykezelésre, perorálisan megelőzésre és gyógykezelésre egyaránt alkalmas. Az antibiotikumok választékának bővülésével a bakteriális és protozoás eredetű fertőzéses megbetegedéseket nagymértékben csökkenteni lehetett. Az antibiotikumok széles körű alkalmazása azonban egyre inkább olyan rezisztens törzsek kialakulását eredményezte, amelyekkel szemben az antibiotikumok önmagukban fokozatosan hatástalanná váltak. A rezisztencia kialakulásának elkerülése érdekében az egyes antibiotikumokat rendszerint rövid ideig alkalmazzák és ezért mindig újabb antibiotikum előállítása válik szükségessé, aminek viszont jelentős költségkihatásai vannak. Viszonylag új antibiotikumnak számít az állatgyógyászatban az apramycin aminoheterozid típusú antibiotikum, amely kémiailag 04-[3a-amino- 6a-(4-amino-4-dezoxi-a-D-glukopiranoziloxi)- 2,3,4,4aß,6,7,8,8aa-oktahidro-8ß-hidroxi-7ß-metilaminopirano-(3,2-b)piran-2a-il]-2-dezoxi-D-streptamin. Alkalmas a coli hasmenés, oedema betegség, sertésdizentéria (Ryden, R., Moore, B.J.J. Antimicrob. Chemother. 1977. 3. 6. 609-613), a magzatburok visszamaradás, továbbá méhgyuiladás, tüdőgyulladás, baromfikolera, baromfinátha, baromfi colisepticaemia gyógykezelésére és megelőzésére. Az apramycin tehenek Gram negatív és Gram pozitív kórokozók által okozott tőgygyulladásának, kocák MMA szindrómájának orvoslására is felhasználható. Fontos a Pseudomonas törzsek okozta mastitis gyógykezelésére. Azonban éppen a rezisztenciaveszély miatt már megfigyelhetők törekvések az apramycinnek és más kemoterápiás szerekkel való kombinálására. Ilyen kombinációt ismertet a 886 765 tsz. belga szabadalmi leírás, ahol aminoheterosid típusú antibiotikumokat (mint pl. apramycin, tobramycin, nebramycin) makrolid antibiotikumokkal (tylosin, spiramycin, oleandomycin) együtt alkalmazzák colibacillosis és Mycoplasma hyorhinis fertőzések esetén. A tiamulin pleuromutilin származék, amely kémiailag 14-dezoxi-14-(2-dietil-aminoetil)-merkapto-acidoximutilin-hidrogénfumarát. Hatásosnak bizonyult több Gram pozitív baktérium, mycoplasma ágens és a fontosabb treponémák ellen. Perorálisan alkalmazva különösen hatásos a sertésdizentériát (2072 012 Lsz. nagy-britanniai szabadalmi leírás) okozó Treponema hyodysenteriae és az enzootiás pneumonia ágense, a Mycoplasma hyopneumoniae ellen (Taylor, D. J., IPVS Congress, Mexico, 1982. július 26-31.). A tiamuünnak kombinációban való alkalmazására történtek már kísérletek anthelmintikumokkal, tetramisol-lal, dichlorvos-sal, fen- és parbendasollal, piperazinnal és levamizollal kapcsolatban. A kísérletek során elsősorban a kombináció toxicitását és inkompatibilitását vizsgálták. Antibiotikumokkal való kombinációja ezideig még nem vált ismertté. A találmány célkitűzése olyan ismert antibiotikumokat tartalmazó gyógyszerkombináció előállítása, amely nem igényel nagy költségráfordítást, ugyanakkor a két vagy több komponens együttes alkalmazásával elért hatás felülmúlja az egyes komponensek külön-külön kifejtett hatásának összegét. Kísérleteket végeztünk a komponensek alkotóinak önmagukban beteg állatokból kitenyésztett patogén törzsekre kifejtett hatásának megállapítására. Azt tapasztaltuk, hogy az egyes komponensek minimális gátló értéke eltérő. A mértékek adatáit az 1., a 2. és a 3. táblázatban tüntetjük fel, ahol megadjuk az egyes komponensek ugyanazon tenyészetben mért minimális gátló (MIC) és minimális baktericid (MBC) mennyiségeit mg/1 egységben. Az 1. táblázatban az apramycin-szulfát gátló értéket soroljuk fel. Ebből látható, hogy az apramycin a Gram negatív törzsekre közel azonos mennyiségben, a Gram negatív spp. közül a Pseudomonas aeruginosa kultúrákban már 5-10-szer alacsonyabb koncentrációban is hat. A Mycoplasma hyorhinis tenyészetek fejlődését is gátolja. A 2. táblázatban a tiamulin-hidrogén-fumarát MIC és MBC értékeit tüntettük fel. Gram pozitív baktériumokra gyakorolt hatása elsősorban a Streptococcus tenyészetben feltűnően alacsony. Hatástalan gyakorlatilag in vitro az E. coli, Klebsiella, Salmonella és Proteus, továbbá a Psudomonas törzsekre. A tiamulin mérési adataink szerint a mycoplasma tenyészetekre már alacsony koncentrációban is kitűnően hat. Majd kísérleteket végeztünk a gyógyszerkombinációval ugyanazon törzsekre kifejtett hatásának megállapítására és meglepő módon azt találtuk, hogy a találmány szerint előállítható gyógyszerkombináció alkalmazása esetén nem egyszerűen az egyes komponensek hatásának összegeződéséből eredő hatás érvényesül, hanem a komponensek szinergetikus kölcsönhatásba lépnek és kisebb koncentrációban fejtik ki hatásukat, mint az egyes komponensek külön-külön. A 3. táblázatban a gentamicin MIC és MBC értékeit tüntettük fel. Gram pozitív baktériumokra gyakorolt hatása elsősorban a Staphylococcus, Listeria és Corynebacterium, a Gram negatív mikroorganizmusok közül főleg a Klebsiella, Pasteurella és Pseudomonas tenyészetekben érvényesül. A gyógyszerkompozíció hatását a 4-5. táblázatban foglalt mikrobiológiai mérési adatok mutatják. A szinergizmus tényét a 6-7. táblázat tünteti fel. A 6. táblázatból látható, hogy a vizsgált 15 törzs közül 8 speciesnél jelentős hatásfokozódás mutatkozik. Törzstípusoktól föggően a hatás mértéke 4-10-szeres, sőt 80-100-szoros nagyságot is eléri, ami egyértelműen a szinergizmus tényét bizonyítja. Nagyon kifejezetten érvényesült az E. coli törzsekre gyakorolt erőteljes gátlás, amely ugyanolyan mértékben századnyi gyógyszerkombinációval is biztosítható volt. A találmány szerinti gyógyszerkombinációt önmagában ismert módon, azaz a hatóanyagok és az állatgyógyászatban használatos valamely segéd-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 2
