190897. lajstromszámú szabadalom • Eljárás állatoknál növekedés vagy táplálékhasznosítás fokozására növekedési hormon fehérjeszint növelésével
1 190 897 2 A találmány tárgya eljárás állatok növekedési hormon fehérjeszintjének növelésével a növekedés vagy táplálékhasznosítás fokozására vagy a zsír-húsarány növelésére növekedési hormon fehérjét tartalmazó egyedi sejtekkel való közvetlen táplálás útján. 5 A fiziológiailag aktív anyagok - vakcinák, hormonok, antibiotikumok és más hasonlók - adagolása állatoknak az általában ismert módszerek szerint, közvetlenül injekciózással történik, amelynek hátránya, hogy igen idő- és költségigényes. A leggyakrabban 10 alkalmazott fiziológiailag aktív fehérjék, a növekedési hormonok esetében az előállítási eljárás - termelő sejtekből történő kivonás - is igen költséges. A költségeket tovább növeli, hogy a fenti anyagokat általában injekciók vagy inplantátumok formájában 15 adagolják, így minden egyes állat esetében külön eszköz szükséges. A találmány célja olyan eljárás megvalósítása, amely a növekedési hormon fehérjék adagolását idő-, költség- és munkamegtakarítással oldja meg, azokat 20 olyan formában adagolja az állatoknak, hogy azoknak fiziológiás hatása legyen. A találmány alapja az a felismerés, hogy a növekedési hormon fehérjék adagolása állatoknak történhet fiziológiailag aktív fehérjét tartalmazó egyedi sejtek 25 közvetlen etetésével. Ez az eljárás igen gazdaságos idő-, munka- és költségráfordítás szempontjából egyaránt. A találmány értelmében a növekedési hormon fehérje meghatározás olyan fehérjét jelent, amely élő 30 állatokban növekedés- vagy táplálékhasznosítást fokozó hatással rendelkezik. így megkülönböztetjük azoktól a fehérjéktől, amelyeknek az állatok csak a tápértékét hasznosítják. Ez utóbbi fehérjék közvetlenül az őket alkotó aminosavakká bomlanak le, és a 35 szervezet ezeket hasznosítja mint tápanyagforrásokat. Ezzel szemben a növekedési hormon fehérjékre az jellemző, hogy azokat a szervezet lényegében érintetlen, intakt formában hasznosítja, és így céljuk nem tápláló, hanem fiziológiai hatás elérése. 40 A növekedést elősegítő fiziológiailag aktív fehérjék olyan növekedési hormonok, amelyek általában fajtaspecifikusak, vagyis jellemzőjük, hogy az egyes hormonok hatása azoknál a fajoknál, amelyekből származnak, nagyobb. így például a szarvasmarha 45 hormon hatásosabb a Bős nemzetség tagjainál, a sertés növekedési hormon hatásosabb a Sus scofra fajták tagjainál, míg a csirke növekedési hormon hatásosabb a Gallus gallus fajtáknál való alkalmazás esetén. 50 A növekedési hormon fehérjéket állatoknál alkalmazhatjuk a táplálékfeldolgozás elősegítésére is. így például a sertés növekedési hormon módosíthatja a zsír/hús arányt a hústermelésben. A találmány szerinti eljárásban bármilyen baktéri- 55 um, gomba vagy élesztő organizmus alkalmazható, amelynek genetikus anyagát a technika állása szerint ismert eljárásokkal úgy módosíthatjuk, hogy képessé tegyük őket a kívánt növekedési hormon fehérjék előállítására. (R. Williamson szerkesztésében: „Ge- 60 netic Engineering” 4. kötet, Academic Press 1983, 163-169; Goeddel és mtársai: „Direct Expression in E. coli of a DNA sequence coding for human growth hormone” Nature, 281, (1979), 544-548.) E folyamatnál a gének kódolását végezhetjük természetes fehérjeforrás felhasználásával, vagy szintetikus géneket állíthatunk elő aminosav vagy nukleotid sorozatinformáció-felhasználással, vagy alkalmazhatjuk a kettő kombinációját is. A gén beépítését a mikroorganizmusba genetikus kezeléssel végezzük. Újabban alkalmaznak olyan eljárásokat is, amelyek során organizmusokból távolítanak el olyan géneket, amelyek bizonyos anyagok termelését kódolják, majd ezeket a géneket egy másik organizmusba beépítve alkalmassá teszik őket a kívánt anyagok termelésére. A plazmidok és bakteriofágok alkalmas hordozók a fiziológiailag aktív anyagok termelésére kódoló anyagok átvitelére bizonyos organizmusokba, így például az E. coli organizmusba. A 0-036-259-A-2 számú Europa-bejelentésben és a 81/02426 számú PCT bejelentésben ismertetnek olyan genetikus kezelési eljárásokat, amelyek sikerrel alkalmazhatók idegen gének bizonyos mikroorganizmusokba való klónozására. Hasonló eljárásokat alkalmaztunk baktériumokból és gombákból történő növekedési hormonok (human, szarvasmarha, sertés, juh), előállítására. A találmány szerinti eljárásnál gombák, élesztők és baktériumok alkalmazhatók. Alkalmas gomba- és élesztő-fajok az alábbi nemzetségekhez tartozó fajok: Candida, Hansenula, Neurospora, Rhodotorula, Torulopsis, Saccharomyces, Schizosaccharomyces, Pichia, Debaryomyces, Kluyveromyces, Lipomyces, Cryptococcus, Nematospora és Brettanomyces. Példák az alkalmas fajokra: Candida boidinii Candida utilis Candida robusta Candida rugósa Hansenula minuta Hansenula californica Hansenula silvicola Candida mycoderma Candida stellatoidea Candida claussenii Brettanomyces petrophilium Hansenula saturnus Hansenula mrakii Hansenula polymorpha Hansenula wickerhamii Hansenula capsulata Hansenula glucozyma Hansenula henricii Hansenula nonfermentans Torulopsis Candida Torulopsis versatilis Torulopsis molishiana Torulopsis nitratophila Pichia farinosa Pichia membranaefaciens Pichia pastoris Neurospora crassa Saccharomyces cerevisiae Saccharomyces roseí Saccharomyces elegáns Saccharomyces lactis Schizosaccharomyces pombe Alkalmas baktériumok az alábbi nemzetségekhez tartozó fajok: Bacillus, Escherichia, Streptomyces, Micromonospora, Streptoverticillium, Nocardia, Pseudomonas, Methanomonas, Protaminobacter, Methylococcus, Arthrobacter, Methylomonas, Bre-Hansenula philodendra Torulopsis bolmii Torulopsis glabrata Torulopsis numodendra Torulopsis pinus Pichia polymorpha Pichia pinus Pichia trehalophila Phodotorula rubra Saccharomyces fragilis Saccharomyces acidifaciens Saccharomyces rouxii Saccharomyces fractum 2