190809. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új 76-11 jelű antibiotikum előállítására
1 . 190 809 2 benzollal, 11 (5 : 1 térf. arányú) benzol-etilacetát eleggyel, 1 1 (1 : 1 térf. arányú) benzol-etilacetát eleggyel végezzük. Az aktív frakciókat (1:1 térf. arányú) benzol-etilacetát eleggyel extraháljuk, öszszegyűjtjük, vákuumban betöményítjük és nátrium-hidroxidos metanollal kezeljük; kb.l g nyers kristályt kapunk. Metanolból végzett többszöri átkristályosítással 400 mg 76-11 antibiotikumnátriumsót kapunk, tiszta kristályok alakjában. Olvadáspontja 210-212 °C (bomlik). A következőkben egy kísérleti példát mutatunk . be a találmány szerinti kokcidiózis elleni szerre vonatkozóan. 1. sz. kísérleti példa Kokcidiózis elleni szer Vizsgált anyagok: A kísérlet során felhasznált hatékony komponenseket homogén elegy keletkezéséig összekeverjük, egy adott koncentráció eléréséig, egy kokcidiózis elleni szert nem tartalmazó teljes kombinált csirke-táppal (ennek összetételét az 1. táblázatban mutatjuk be; az Oriental Yeast Co. gyártmánya). Az így kapott tápokat ad libitum adagoljuk csirkéknek, az oocisztákkal való fertőzést megelőzően 2 nappal kezdve az etetést, a kísérlet végéig (a fertőzés után 8 nappal bezáróan). Kontrollként szalinomicint alkalmazunk. 1. táblázat % kukorica 61,2 búzaliszt 5,13 szójababolaj 3,07 szójababliszt 15,4 halliszt 10,3 lucemaliszt 3,07 kálciumkarbonát 0,3 NaCl 0,5 vitaminkeverék 1,03 A felhasznált csirkék : Shaver Starcross típusú egészséges, 7 napos (azaz a fertőzés időpontjában 9 napos) kakasokat használunk, amelyeket előzetesen a kokcidiózis-fertőzéstől teljesen mentes körülmények között tartottunk. Az egyes csoportok 5-5 csirkéből állnak. Bevitt oociszták és az inokulum mennyisége : A fertőzéshez használt oociszta az Eimeria tenella egy érzékeny törzséből származik. Az egyes csirkék begyébe - orálisan, fémszonda alkalmazásával- teljesen kifejlett oocisztákat (5 x 104) viszünk be. Az eredmények kiértékelése : A szerek hatását az antikokcidiózis index (ACI) alapján értékeljük, amelyet a következőképpen határozunk meg: ACI = (relatív súlynövekedés + túlélési arány)- (oociszta érték + megbetegedési érték) (i) Relatív súlynövekedés A vizsgált csirkék súlyát mértük a kísérlet kezdetekor (az inokulálás előtt 2 nappal vagy a -2. napon), az inokulálás napján (0. nap), majd az inokulálás után 2, 4, 5, 6, 7 és 8 nappal. A kísérlet befejezésekor meghatározzuk mindegyik kísérleti csoport súlynövekedését és a relatív súlynövekedést a kontroll csoport súlya alapján számítjuk ki, ezt 100-nak tekintve, amelyet a kokcidiózis elleni szertől mentes táppal etetünk és nem inokulálunk. (ii) Oociszta érték A fertőzés utáni 8. napon meghatározzuk az oociszták számát a vakbélben, a bélcsatorna homogeni/ álása segítségével. Az oociszta értéket a következők szerint határozzuk meg: A bélcsatomában talált oociszták száma Az oociszta érték 0,0-0,1 x 10« 0 0,1-1,0 x 10« 1 1,0-5,0 x 10« 10 5,0-11,0 x 10« 20 11,0 x 10e felett 40 (iii) A bélcsatorna megbetegedési indexe \ kísérlet végén (a fertőzés utáni 8. napon) a csirkéket felboncoljuk és szemmel megvizsgáljuk a bélcsatomát, a megbetegedési index meghatározására. A megbetegedési indexet a következőképpen definiáljuk, és a megbetegedési értéket a megbetegedési index tízszeresének tekintjük : 0 ( - ) ... A vakbél teljesen normális. Ha vérző foltot találunk, a (-) jelet ( + )-ra változtatjuk. 1 ( + ) ... A vakbél alakja normális. Tartalma kissé folyós és sárgás. A vakbél nyálkahártya membránja egy részén enyhe duzzadás található, amely megfehéredik. 2 ( + +)'... A vakbél alakja általában normális. A nyálkahártya membrán teljes felülete duzzadt. Tartalmában vérnyomok nem találhatók. A nyálka enyhén sárgás és halvány. A nyálkahártyán néhány fehér foltszerű elhalás vagy vérző folt található. 3 (+ + +)... A vakbél nyilvánvalóan sorvadt és alakja megváltozott; a végbélnél kissé hosszabb. Tartalma teljesen rendellenes: gyakran koagulált vér vagy fehéres-drapp színű, sajtszerű bomlott anyag tölti meg. A vakbél fala nyilvánvalóan duzzadt, kissé megtört és olykor még visszamaradnak vérző foltok. A károsodott szakasz eléri a vakbél alját, de a végbelet nem. 4(+ + + +)...A vakbél elsorvadása és deformációja feltűnő mértékű. A vakbél kolbász alakú és a végbélnél nem hosszabb. A károsodás eléri a végbél Vá-át vagy Vi-ét. Az egyéb észleletek a 3 szerintiekkel megegyeznek. (iv) Táplálékigény Az egyes vizsgált csoportok táplálékigényét az átlagos súlynövekedés és a kísérlet teljes időtartama (10 nap) alatt elfogyasztott táplálék teljes mennyisége alapján határozzuk meg: , _ Felvett táplálék mennyisége ° y súlynövekedés Az eredményeket a 2. és 3. táblázatban adjuk meg. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 7
